| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cy3-N3 does not bind to a biological target; it is a chemical labeling reagent. The azide group (-N3) is a bioorthogonal functional group that reacts specifically with alkynes via click chemistry. The Cy3 fluorophore provides orange fluorescence (Ex/Em ~550/570 nm) for detection. This approach allows labeling of biomolecules without interfering with their native functions.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外,Cy3-N3 可用于通过点击化学对生物分子(肽、蛋白质、寡核苷酸、碳水化合物)进行荧光标记。对于 CuAAc 反应,将炔基标记的分子与 Cy3-N3(1-5 当量)在含有 CuSO4(1 mM)和抗坏血酸钠(2-5 mM)的 PBS 缓冲液(pH 7.4)中,于 37℃ 孵育 1-12 小时。对于 SPAAC 反应,将 Cy3-N3 与 DBCO 或 BCN 偶联的分子在 PBS 缓冲液(pH 7.4)中于 37℃ 孵育 2-4 小时。标记产物经透析或 HPLC 纯化后用于后续实验。
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| 体内研究 (In Vivo) |
CY3-N3 不直接用于体内活性检测,而是通过点击化学反应标记靶向配体。Cy3 标记的缀合物(例如抗体、肽)可用于动物模型,进行可见光范围(激发/发射波长约为 550/570 nm)的荧光成像。然而,由于组织吸收率较高且在较短波长下存在自发荧光,Cy3 与近红外染料(例如 Cy5、Cy7)相比,不太适合深层组织成像。
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| 酶活实验 |
在体外点击化学偶联反应中,Cy3-N3 可用于无酶或 CuAAc 催化的反应。CuAAc 的标准操作流程如下:将 1 umol 炔基功能化的生物分子溶解于 200 uL 脱气 PBS 缓冲液(pH 7.4,0.2 M)中。加入 1-1.5 umol Cy3-N3(溶于 10-20 uL DMSO)。新鲜配制 100 mM 抗坏血酸钠溶液和 10 mM CuSO4 溶液。向反应混合物中加入 20 uL 100 mM 抗坏血酸钠溶液(终浓度 10 mM)和 20 uL 10 mM CuSO4 溶液(终浓度 1 mM)(最终体积 200-250 uL)。在惰性气氛(N2 或 Ar2)下,于 37℃ 孵育 4-12 小时,并轻柔摇动。对于SPAAC反应,将1 umol DBCO或BCN偶联分子溶解于200 uL PBS缓冲液(pH 7.4)中。加入1-1.2 umol Cy3-N3(溶于10-20 uL DMSO)。于37℃孵育2-4小时。通过薄层色谱(硅胶,10%甲醇/二氯甲烷)或液相色谱-质谱联用(LC-MS)监测偶联反应。采用尺寸排阻色谱(例如Sephadex G-25)或透析(截留分子量3.5-10 kDa)进行纯化。通过测量550 nm(Cy3)和280 nm(蛋白质)处的吸光度来确定标记效率。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测,Cy3标记的探针可用于活细胞或固定细胞成像。将细胞(例如,8孔板中每孔5×10⁴个细胞)接种并培养过夜。向培养基中加入Cy3标记的抗体或肽(1-10 ug/mL),并在37℃下孵育1-4小时。用PBS洗涤细胞(3次)。对于活细胞成像,加入新鲜培养基,并立即使用带有Cy3滤光片(激发波长540-560 nm,发射波长570-590 nm)的荧光显微镜进行成像。对于固定细胞成像,用4%多聚甲醛固定15分钟,洗涤,用Hoechst 33342或DAPI对细胞核进行复染,封片,然后成像。对于抗体结合和内化研究,可考虑使用共聚焦显微镜进行z轴扫描。
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| 动物实验 |
在体内动物研究中,Cy3标记的偶联物通常通过静脉注射或瘤内注射给药于小鼠。然而,由于Cy3的荧光位于可见光范围内(激发/发射波长约为550/570 nm),其应用通常仅限于组织穿透性要求较低的皮下或表面肿瘤。典型剂量:每只小鼠50-100 μg Cy3标记抗体,溶于100-200 μL PBS缓冲液中。体内荧光成像使用激发波长为540-560 nm、发射波长为570-590 nm的成像系统进行。生物分布可通过安乐死后进行离体器官成像来评估。对于深层组织成像,通常优先选择近红外染料(如Cy5、Cy7)而非Cy3。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Cy3-N3 的分子量为 712.88 Da。该化合物为固体,应储存于 -20℃,避光防潮。粉末在 -20℃ 下可稳定保存长达 3 年,在 4℃ 下可稳定保存长达 2 年。DMSO 储备液(10-20 mM)应储存于 -80℃ 下长达 6 个月,或在 -20℃ 下长达 1 个月,并应避光以防止光漂白。Cy3-N3 可溶于 DMSO(例如,10-50 mg/mL),在水中溶解度中等(磺化形式;非磺化形式需要有机溶剂)。用于体内制剂的常用溶剂包括 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% 生理盐水,或 DMSO:玉米油 (1:9)。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cy3-N3 在典型的研究浓度(用于偶联反应的微摩尔至低毫摩尔浓度范围)下被认为无毒。应遵循标准的实验室安全操作规程:佩戴手套、实验服和护目镜;避免吸入粉尘。本产品仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。目前尚未有明显的毒性报告。对于体内研究,应进行标准的安全性监测(体重、行为)。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Cy3-N3(叠氮化花菁3)是一种用于点击化学的荧光标记试剂。主要特点:(1) Cy3荧光团,激发/发射波长最大值约为550/570 nm,发出明亮的橙红色荧光;(2) 叠氮基团,可通过CuAAc或SPAAC进行生物正交偶联;(3) 磺化衍生物具有优异的水溶性。常见应用包括寡核苷酸(例如,用于FISH)、肽、蛋白质(例如,用于免疫荧光)和小分子的标记。该化合物也用于代谢标记研究(例如,通过含叠氮基团的糖进行聚糖标记)。纯度通常≥98%(HPLC测定)。CAS号:1621101-43-6。
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| 分子式 |
C34H44N6O7S2
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| 分子量 |
712.88
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| 外观&性状 |
Brown to black solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4028 mL | 7.0138 mL | 14.0276 mL | |
| 5 mM | 0.2806 mL | 1.4028 mL | 2.8055 mL | |
| 10 mM | 0.1403 mL | 0.7014 mL | 1.4028 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。