| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cy5 amine TFA does not bind to a biological target; it is a chemical labeling reagent. The primary amine (-NH2) group can react with carboxyl groups via carbodiimide-mediated (EDC/NHS) chemistry to form stable amide bonds, or with activated ester groups (e.g., NHS esters) for covalent conjugation to proteins, peptides, or other biomolecules. The Cy5 fluorophore provides far-red fluorescence for detection.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外,Cy5胺TFA可用于制备Cy5标记的化合物或聚合物,这些化合物或聚合物可用于细胞过程和药物转运的成像。伯胺基团能够通过标准的EDC/NHS偶联化学方法与含有羧基的分子进行偶联。典型步骤:将含羧基的分子(1 umol)溶解于200 uL MES缓冲液(pH 5.5-6.0)中。加入2-5当量的EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化羧基,反应15-30分钟。加入1-2当量的Cy5胺TFA(溶于DMSO或水中),并将pH值调节至7.2-7.5。室温孵育2-4小时或在4℃下过夜。标记产物经透析或高效液相色谱纯化后,可用于成像应用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
Cy5胺TFA不直接用于体内活性研究。它通过胺-羧基偶联化学方法标记靶向配体(例如抗体、肽、纳米颗粒)。Cy5标记的偶联物可用于动物模型进行远红外荧光成像。与Cy3相比,Cy5具有更深的组织穿透深度(可达数毫米),但不如Cy7等近红外染料。本产品适用于皮下肿瘤的体内成像和生物分布研究。
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| 酶活实验 |
体外标记含羧基分子的EDC/NHS化学方法:(1) 将1 umol含羧基的生物分子(例如,透明质酸、脂肪酸或含游离-COOH的肽)溶解于200 uL 0.1 M MES缓冲液(pH 5.5-6.0)中。(2) 加入2-5 umol EDC和2-5 umol NHS(溶于水)。混合后,室温孵育15-30分钟以活化羧基。(3) 向活化混合物中加入1-2 umol Cy5胺TFA(溶于20 uL DMSO或50 uL水中)。(4) 加入50-100 uL 0.2 M磷酸钠缓冲液(pH 7.5)调节pH至7.2-7.5。 (5) 室温下轻柔摇晃孵育 2-4 小时,或在 4℃ 下过夜。(6) 通过透析(使用合适的截留分子量)或尺寸排阻色谱法(例如 Sephadex G-25 柱)纯化标记产物。(7) 通过测量 650 nm(Cy5)和 280 nm(蛋白质,如果适用)处的吸光度来确定标记程度。对于使用 Cy5 的 NHS 酯形式进行蛋白质标记,胺形式不直接反应;因此,应使用 Cy5 NHS 酯进行胺反应性标记。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测,使用Cy5标记的化合物或纳米颗粒进行细胞摄取成像。将细胞(例如,8孔板中每孔1×10⁵个细胞)接种并培养过夜。向培养基中加入Cy5标记的探针(1-20 ug/mL),并在37℃下孵育1-6小时。用PBS洗涤细胞(3次),用4%多聚甲醛固定(如果不是活细胞成像),用Hoechst 33342或DAPI对细胞核进行复染,并使用带有Cy5滤光片(激发波长640-660 nm,发射波长660-680 nm)的荧光显微镜进行成像。对于药物摄取的活细胞成像,细胞可在洗涤后直接成像。对于定量摄取,可将细胞用胰蛋白酶消化,重悬于 PBS 中,然后使用 Cy5 通道(激发波长 640 nm,发射波长 670 nm)通过流式细胞术进行分析。
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| 动物实验 |
在体内动物研究中,通常将Cy5标记的缀合物(例如抗体、纳米颗粒)通过尾静脉或腹腔注射给药给小鼠(6-8周龄,20-25克)。剂量:每只小鼠50-100微克标记蛋白,溶于100-200微升PBS缓冲液中。使用激发波长为640-650纳米、发射波长为670-700纳米的成像系统,在不同时间点(例如注射后1、6、12、24、48小时)进行体内荧光成像。对于皮下肿瘤模型,在成像过程中使用异氟烷麻醉小鼠。在实验终点,切除主要器官进行离体成像,以量化生物分布。通过比较肿瘤荧光信号与邻近肌肉或皮肤的荧光信号,计算肿瘤与背景信号比值。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Cy5胺TFA的分子量为731.33 Da(TFA盐)。该化合物为固体(棕色至深棕色固体),应在-20℃下避光防潮保存。粉末在-20℃下可稳定保存3年,在4℃下可稳定保存2年。DMSO储备液(10-20 mM)应在-80℃下保存长达6个月,或在-20℃下保存长达1个月。溶解性:DMSO(可溶,典型浓度为10-50 mg/mL);水(由于TFA盐的存在,溶解度中等;可能需要超声处理才能溶解)。体内给药时,应使用标记的偶联物(而非游离染料);游离染料不可直接给药。偶联时,Cy5胺TFA通常溶解于DMSO或水中。与游离碱相比,TFA盐形式的水溶性更佳。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cy5胺TFA在典型的研究浓度(微摩尔至低毫摩尔范围)下被认为无毒。应遵循标准的实验室安全操作规程:佩戴手套、实验服和护目镜;避免吸入粉尘。本产品仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。目前尚未有明显的毒性报告。对于体内研究,应进行标准的安全性监测(体重、行为)。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Cy5胺TFA(花菁5胺TFA)是一种用于远红外/近红外区域的荧光标记染料。主要特性:(1) Cy5荧光团,激发/发射最大值约为650/670 nm(典型值)或645/665 nm;(2) 伯胺官能团(-NH2)可通过EDC/NHS化学方法与羧基偶联;(3) TFA盐形式增强了水溶性和稳定性;(4) 远红外发射可降低生物样品的自发荧光背景,适用于体外和体内成像。常见应用:标记纳米颗粒、聚合物、肽和小分子,用于细胞摄取、药物转运和生物分布研究。该化合物还可用于制备Cy5.5标记化合物(Cy5.5是其衍生物,光谱略微红移)。纯度通常≥98%(HPLC测定)。游离碱(Cy5胺)的相关CAS号:1807529-70-9。
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| 分子式 |
C40H54CLF3N4O3
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| 分子量 |
731.33
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| 相关CAS号 |
Cy 5 amine;1807529-70-9
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| 外观&性状 |
Brown to dark brown solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3674 mL | 6.8369 mL | 13.6737 mL | |
| 5 mM | 0.2735 mL | 1.3674 mL | 2.7347 mL | |
| 10 mM | 0.1367 mL | 0.6837 mL | 1.3674 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。