| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cy 3 (Non-Sulfonated) (triethylamine) does not bind to a biological target; it is a chemical labeling reagent. As a non-sulfonated Cy3 dye, it has a hydrophobic character compared to sulfonated versions. The dye can be used for non-covalent (electrostatic or hydrophobic) interactions or covalently incorporated via functional groups (if present; the triethylamine salt form is typically for storage and the dye may be used as a free acid or NHS ester). The Cy3 fluorophore provides green fluorescence for detection.
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| 体外研究 (In Vitro) |
操作指南:以下是建议的操作步骤。本方案仅提供指导,应根据您的具体需求进行调整。蛋白质标记[2]:1. 将100 μL蛋白质加入到预先配制有Cy3非磺化三乙胺的96孔黑色微孔板中,于37 °C孵育50分钟。然后按照常规方案进行细胞培养。2. 使用BioTek扫描微孔板,并在激发波长470 nm和发射波长515 nm及565 nm处采集数据。
在体外,Cy3(非磺化)三乙胺可用于活细胞的高密度单颗粒追踪,无需紫外光照射和细胞毒性添加剂。典型的蛋白质标记方案:将100 uL蛋白质(例如,浓度为0.1-1 mg/mL的抗体)加入到96孔黑色微孔板中预先配制的Cy3非磺化三乙胺溶液中。在37℃下孵育50分钟。然后按照标准方案进行细胞孵育。扫描微孔板,并在470 nm激发波长和515 nm及565 nm发射波长下采集数据。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Cy 3(非磺化)三乙胺不直接用于体内活性测定。非磺化形式的疏水性强于其磺化形式,这会影响其溶解度和生物分布。它可用于标记亲脂性生物分子或用于需要最小电荷的应用。对于体内成像,通常优选磺化(水溶性)形式。本产品更适用于体外和离体标记应用。
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| 酶活实验 |
对于体外蛋白质标记(通过 NHS 酯形式,如果三乙胺盐已转化或染料以 NHS 酯形式获得):将 1 mg 蛋白质(例如,牛血清白蛋白 (BSA) 或抗体)溶解于 1 mL 0.1 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3)中。配制浓度为 1-10 mM 的 Cy3 NHS 酯(由三乙胺盐合成)的无水 DMSO 溶液。向蛋白质溶液中加入 5-20 当量的 Cy3 NHS 酯(例如,对于 1 mg/mL 的蛋白质溶液,加入 10 uL 浓度为 10 mM 的 Cy3 DMSO 溶液;DMSO 浓度 <5%)。在室温下轻柔混合孵育 1 小时。避光反应。通过透析或尺寸排阻色谱法(例如,Sephadex G-25)去除未反应的染料。标记程度 (DOL) 是通过测量 550 nm (Cy3) 和 280 nm (蛋白质) 处的吸光度来计算的。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测,使用Cy3标记的蛋白质(例如抗体、凝集素)进行荧光显微镜观察。将细胞(例如,8孔板中每孔5×10⁴-1×10⁵个细胞)接种并培养过夜。将Cy3标记的探针加入培养基中,使其最终浓度为1-20 ug/mL,并在37℃下孵育1-4小时。对于活细胞成像,用PBS洗涤细胞(3次),并立即使用配备Cy3滤光片组(激发波长~540-560 nm,发射波长~570-590 nm)的荧光显微镜进行成像。对于固定细胞成像,洗涤细胞,用4%多聚甲醛固定(室温下15分钟),再次洗涤,用DAPI或Hoechst 33342对细胞核进行复染,封片后进行成像。对于需要单颗粒追踪的研究,可将细胞与低浓度(例如 0.1-1 ug/mL)的 Cy3 标记探针孵育,以实现单分子分辨率,并使用全内反射荧光 (TIRF) 显微镜或高时间分辨率的共聚焦显微镜进行成像。与磺化型 Cy3 相比,非磺化 Cy3 染料可能表现出更强的疏水相互作用,这可能会影响其膜分配和细胞摄取。这种特性可能有利于某些应用,例如亲脂性药物追踪或膜标记。
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| 动物实验 |
Cy3(非磺化)三乙胺通常不单独用于动物实验。标记的偶联物(例如,Cy3标记的抗体)可通过尾静脉注射给小鼠(6-8周龄,20-25克),用于浅表靶点(例如,皮下肿瘤)的成像。典型剂量为50-100微克标记蛋白溶于100-200微升PBS缓冲液中。由于Cy3的发射波长在可见光范围内(激发/发射波长约为550/570纳米),其组织穿透深度有限;它适用于皮下或表面组织的成像,但不适用于深层组织成像。体内成像使用配备Cy3滤光片组(激发波长540-560纳米,发射波长570-590纳米)的成像系统进行。成像过程中,小鼠使用异氟烷麻醉。成像可在注射后不同时间点进行(例如,注射后 1、6、12 和 24 小时)。在终点时间点,可对采集的器官进行离体成像,以评估生物分布。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Cy 3(非磺化)(三乙胺)的分子量为 1255.06 Da(三乙胺盐形式)。该化合物为固体粉末,应在 -20℃ 下避光防潮保存。粉末在 -20℃ 下可稳定保存长达 3 年,在 4℃ 下可稳定保存长达 2 年。DMSO 储备液(例如 10 mM)应在 -80℃ 下保存长达 6 个月,或在 -20℃ 下保存长达 1 个月。溶解性:非磺化形式的水溶性低于磺化形式;通常将其溶解于 DMSO 或 DMF 中用于偶联反应。三乙胺反离子用于中和染料(可能以羧酸或磺酸游离酸形式存在),以改善操作性和稳定性。对于体内应用,使用的是标记的偶联物(而非游离染料),其在生理盐水或PBS中的溶解度取决于偶联物本身。偶联时,染料通常溶于DMSO溶液中。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Cy 3(非磺化)三乙胺在典型的研究浓度(微摩尔级)下被认为无毒。应遵循标准的实验室安全操作规程:佩戴手套、实验服和护目镜。本产品仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。目前尚未有明显的毒性报告。与磺化形式相比,非磺化形式的生物学特性可能略有不同(例如,细胞膜分配增加),这可能会影响高浓度下的毒性;然而,在标签浓度下,预计不会产生不良反应。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Cy3(非磺化)(三乙胺)(花菁3三乙胺)是一种非磺化花菁染料,带有三乙胺反离子。主要特点:(1) 非磺化结构,使染料具有更强的疏水性,适用于需要最小电荷相互作用的应用;(2) 激发/发射最大值:激发波长约为470 nm,发射波长为515 nm和565 nm(某些配方的Cy3具有典型的双峰发射光谱);(3) 无需紫外激发即可用于活细胞中高密度单颗粒追踪;(4) 三乙胺反离子用于形成盐和稳定化合物。该产品通常用作蛋白质和核酸的荧光标记。纯度通常为≥98%(HPLC测定)。游离碱(非磺化Cy3)的相关CAS号:146397-20-8。
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| 分子式 |
C49H65N5O14S2
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| 分子量 |
1255.06
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| 相关CAS号 |
Cy 3 (Non-Sulfonated);146397-20-8
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7968 mL | 3.9839 mL | 7.9677 mL | |
| 5 mM | 0.1594 mL | 0.7968 mL | 1.5935 mL | |
| 10 mM | 0.0797 mL | 0.3984 mL | 0.7968 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。