Calcineurin substrate TFA

目录号: V77173 纯度: ≥98%
钙调磷酸酶底物 (TFA) 是从 cAMP 依赖性蛋白激酶的调节 RII 亚基中提取的多肽。
Calcineurin substrate TFA 产品类别: Autophagy | 自噬
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
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  • 神经储钙蛋白基质
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产品描述
钙调磷酸酶底物(TFA)是从cAMP依赖性蛋白激酶的调节亚基RII中提取的一种多肽。钙调磷酸酶底物(TFA)可用于测定钙调磷酸酶活性。
钙调磷酸酶底物TFA是一种源自cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)调节亚基RII的肽。它被用作钙调磷酸酶(Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白磷酸酶,PP2B)酶活性测定的底物。该肽含有一个可磷酸化的丝氨酸残基,该残基首先被PKA磷酸化,磷酸化产物随后作为检测钙调磷酸酶活性的底物。TFA盐形式可提高其在生化应用中的溶解度。
生物活性&实验参考方法
靶点
Calcineurin substrate TFA targets calcineurin (Ca2+/calmodulin-dependent protein phosphatase, also known as PP2B), a conserved serine/threonine phosphatase. It functions as an enzyme substrate rather than a pharmacologically active drug. After being phosphorylated at the serine residue by PKA, the phosphorylated peptide can be used for the detection of calcineurin activity. This allows for the measurement of calcineurin-mediated dephosphorylation, which is involved in T cell activation, cardiac hypertrophy, and synaptic plasticity.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,钙调磷酸酶底物三氟乙酸(TFA)是钙调磷酸酶的底物,其磷酸化形式可用于生化分析中检测钙调磷酸酶的活性。由于TFA是一种生化试剂而非生物活性调节剂,因此通常不用于细胞活力或增殖实验。该肽序列来源于蛋白激酶A(PKA)的调节亚基RII,包含PKA识别的特异性磷酸化位点(丝氨酸)和钙调磷酸酶识别的去磷酸化位点。
体内研究 (In Vivo)
由于钙调磷酸酶底物TFA是一种用于无细胞活性测定的生化底物,因此其体内活性数据不适用。它并非设计用于体内治疗,也没有针对此类底物肽的标准动物疗效或药代动力学研究。它仅作为酶学研究的工具。
酶活实验
钙调磷酸酶底物TFA的磷酸化形式可用于非细胞检测,以测定钙调磷酸酶的磷酸酶活性。该方法包括将纯化的钙调磷酸酶与不同浓度的磷酸化肽底物在含有Ca2⁺、钙调蛋白和Ni2⁺的反应缓冲液中孵育。反应进行后,使用孔雀绿比色检测试剂盒定量释放的游离磷酸盐,或通过高效液相色谱(HPLC)或质谱(MS)测定剩余磷酸化肽的量。
细胞实验
钙调磷酸酶底物TFA不作为活性调节剂用于基于细胞的功能分析。在分析应用中,该肽可用于评估细胞裂解液中的钙调磷酸酶活性。细胞裂解后,将裂解液与磷酸化的钙调磷酸酶底物TFA在Ca2+和钙调蛋白存在下孵育。终止去磷酸化反应,并通过比色法定量释放的磷酸盐量。这可以用于测量细胞样品中的内源性钙调磷酸酶活性。
动物实验
由于钙调磷酸酶底物TFA是一种用于体外检测的生化工具,因此不进行体内动物实验。标准产品说明书中未描述该底物肽的动物模型或给药方案。该化合物严格用于裂解液或纯化体系中的酶活性测定。
药代性质 (ADME/PK)
钙调磷酸酶底物TFA的药代动力学数据不可用或不适用。该化合物是一种肽底物,用于体外生化分析以测定钙调磷酸酶活性。它并非设计或用于体内给药,标准产品资料中未提供ADME(吸收、分布、代谢、排泄)数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
标准产品说明书中未报告钙调磷酸酶底物TFA的全面毒理学数据。作为一种研究用肽底物,其急性毒性、遗传毒性和器官特异性毒性的标准安全性评估通常不予描述。实验室使用时,应遵循肽类化合物的标准化学安全操作规程。该化合物在生化分析所用浓度下通常被认为无害。
参考文献
[1]. Crabtree GR, et al. Calcium, calcineurin, and the control of transcription. J Biol Chem. 2001 Jan 26;276(4):2313-6.
其他信息
钙调磷酸酶底物TFA(PKA RII肽TFA)是一种合成肽,可作为钙调磷酸酶的底物。搜索结果中未提供其确切序列和分子量信息。该肽来源于cAMP依赖性蛋白激酶(PKA)的调节亚基RII。通常储存于-20℃,并需防潮。本产品仅供研究使用,用作钙调磷酸酶活性测定的阳性对照。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C94H151F3N28O31
分子量
2226.37
相关CAS号
Calcineurin substrate;113873-67-9
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~25 mg/mL (~11.23 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.4492 mL 2.2458 mL 4.4916 mL
5 mM 0.0898 mL 0.4492 mL 0.8983 mL
10 mM 0.0449 mL 0.2246 mL 0.4492 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们