| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CaMK
Autocamtide‑2 targets the substrate‑binding site of CaMKII and is phosphorylated by CaMKII on a specific serine residue. The peptide contains the CaMKII substrate consensus sequence (RXXS/T) and has high selectivity for CaMKII over other protein kinases, including PKA, PKC, CaMKIV and CaMKI. Autocamtide‑2 is a more selective substrate than syntide‑2, making it the preferred tool for measuring CaMKII activity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞激酶活性测定中，重组CaMKII以Ca2+/钙调蛋白依赖的方式磷酸化autocamtide-2酰胺。CaMKII的Km值通常为10-20 uM，kcat值为5-10 s-¹。浓度高达100 uM时，PKA、PKC、CaMKIV或CaMKI均不能显著磷酸化该肽。与游离酸形式相比，酰胺修饰不改变底物动力学，但可提高其在细胞裂解液中的稳定性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
由于autocamtide-2是一种底物而非治疗剂，因此未见其直接的体内活性描述。然而，它可用于体外激酶活性测定，以测量神经系统疾病（例如阿尔茨海默病、LTP诱导）、心脏疾病（例如肥大、缺血）和癌症动物模型组织裂解液中CaMKII的激活情况。该肽有助于阐明CaMKII在突触可塑性、心脏收缩力和肿瘤进展中的作用。
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| 酶活实验 |
标准CaMKII激酶活性测定（放射性）：将Autocamtide-2酰胺（终浓度10-100 uM）与重组CaMKII（5-20 nM）在测定缓冲液（50 mM HEPES pH 7.4、10 mM MgCl2、0.5 mM CaCl2、1 uM钙调蛋白、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA）中于30℃孵育5-10分钟。加入100 uM ATP（含0.5 uCi/孔33P-ATP）启动反应。5-20分钟后，将反应液点样至P81磷酸纤维素滤纸上终止反应，用0.75%磷酸洗涤3次，并用液体闪烁计数器计数。不添加Ca2+/钙调蛋白或添加EGTA（2 mM）的对照组用于测定Ca2+非依赖性活性。CaMKII抑制剂的IC50值可通过向反应混合物中添加抑制剂来计算。
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| 细胞实验 |
细胞CaMKII活性测定（离体）：将细胞或组织样本（例如，原代神经元、心肌细胞、脑组织裂解液）在含有磷酸酶和蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液中裂解。将蛋白浓度标准化（0.5-1 ug/uL）。向裂解液中加入Autocamtide-2酰胺（50 uM）、Ca2+/钙调蛋白（0.5 mM CaCl2，1 uM钙调蛋白）和ATP（100 uM）。反应在30℃孵育30分钟。通过将反应转移至链霉亲和素包被的微孔板（如果使用生物素标记的肽）并用抗磷酸化特异性抗体检测或通过测量掺入的33P-ATP来定量磷酸化。CaMKII活性以每毫克蛋白每分钟掺入的磷酸盐的皮摩尔数表示。
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| 动物实验 |
CaMKII活性测定的一般动物实验方案：雄性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠接受调节CaMKII活性的处理（例如，电刺激诱导长时程增强（LTP）、缺血再灌注损伤、横向主动脉缩窄导致的心脏压力负荷过重）。动物通过颈椎脱臼或异氟烷过量麻醉处死。迅速解剖脑组织（海马、皮层）或心脏组织，液氮速冻，并储存于-80℃。活性测定时，将组织在裂解缓冲液中匀浆，并按照细胞分析方案进行处理。酶活性根据总蛋白含量（BCA法）或总CaMKII蛋白水平（Western blot法）进行标准化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种肽底物，autocamtide-2 酰胺由于易被蛋白水解酶快速降解，其血浆半衰期很短（仅几分钟），因此不用作治疗药物。在体外实验中，该肽直接添加到组织裂解液中，因此其药代动力学性质不适用。酰胺修饰可减少羧肽酶的切割，但不影响吸收或分布。冻干粉末应储存在-20℃或-80℃，并避光防潮。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Autocamtide-2 酰胺是一种研究级肽，不适用于人体或治疗用途。在激酶活性测定所用的浓度（10-100 μM）下，该肽对细胞无毒性。动物实验中，不直接给药，仅检测组织裂解液。处理冻干粉末或储备液时，应遵循标准的实验室安全操作规程（佩戴手套、实验服和护目镜）。
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| 其他信息 |
Autocamtide-2 酰胺的肽序列为 KKALRRQEAVDAL（磷酸化位点通常位于 RXXS/T 基序内的丝氨酸残基上；具体序列可能因生产商而异）。它是 autocamtide-2 的酰胺化衍生物，其 C 端酰胺化以防止蛋白水解。Autocamtide-2 广泛应用于神经科学和心血管研究，用于研究 CaMKII 依赖性信号通路，包括突触可塑性、神经元兴奋性、心肌收缩力和肥大。它常与抑制肽 AIP 联合使用，以验证 CaMKII 特异性活性。
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| 分子式 |
C65H119N23O19
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|---|---|
| 分子量 |
1526.78
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~50 mg/mL (~32.75 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.6550 mL | 3.2749 mL | 6.5497 mL | |
| 5 mM | 0.1310 mL | 0.6550 mL | 1.3099 mL | |
| 10 mM | 0.0655 mL | 0.3275 mL | 0.6550 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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