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16-38-Thymosin β4 (cattle) (TFA)

目录号: V77332 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
16-38-Thymosin β4（牛）TFA 是一种高亲和力的 Ca2+ 依赖性 MLCK 激活剂。
16-38-Thymosin β4 (cattle) (TFA) 产品类别: Myosin
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
16-38-胸腺素β4（牛）TFA 是一种高亲和力的 Ca2+ 非依赖性 MLCK 激活剂。
16-38-胸腺素beta4（牛）TFA是一种合成肽，来源于牛胸腺素beta4 (Tbeta4) 的羧基末端区域（氨基酸16-38）。它是一种高亲和力、不依赖于Ca2+的肌球蛋白轻链激酶 (MLCK) 激活剂。TFA盐可提高肽的溶解度和稳定性。它可作为研究细胞骨架信号传导和肌肉收缩的研究工具。分子量：2841.10。
生物活性&实验参考方法
靶点
MLCK[1].
Myosin light chain kinase (MLCK). This peptide is a specific activator of MLCK. Unlike calmodulin (CaM), which requires Ca2+, this peptide activates MLCK in a Ca2+-independent manner. It binds to MLCK and enhances the phosphorylation of the myosin regulatory light chain (LC2), a critical step in the initiation of smooth muscle contraction and cytoskeletal reorganization.
体外研究 (In Vitro)
在缺乏外源钙调蛋白 (CaM) 的情况下，16-38-胸腺素 β4 牛 TFA (50 pM) 大大增强了 LC2 的磷酸化百分比。
体外实验表明，16-38-胸腺素β4（牛源）三氟乙酸（TFA，50 pM）在无外源钙调蛋白（CaM）的情况下，能显著提高LC2（肌球蛋白轻链2）的磷酸化水平。这表明其能强效且不依赖于Ca2+激活MLCK。该方法可用于研究肌球蛋白II的非经典激活途径。
体内研究 (In Vivo)
该肽在体内被用于研究血管和平滑肌功能。局部或全身给药后，它可通过激活MLCK（一种不依赖于传统Ca2+/CaM通路的MLCK）诱导血管收缩并调节肠道蠕动。这有助于研究人员解析Ca2+依赖性和Ca2+非依赖性MLCK激活在生理学中的不同作用。
酶活实验
进行非细胞激酶活性测定。将纯化的MLCK与肽段（0.1-1000 nM）及其底物肌球蛋白调节轻链（LC2）在ATP存在下孵育。反应在含有螯合剂（EGTA）的缓冲液中进行，以排除Ca2+。使用磷酸化特异性抗体（p-MLC2）通过Western blot检测磷酸化LC2的水平，以确定其激活程度（EC50）。
细胞实验
在细胞实验中，将平滑肌细胞接种于6孔板中，并进行血清饥饿处理。然后用16-38-胸腺素β4（牛源）TFA（1-100 pM）处理细胞5-30分钟。收集细胞裂解液，并通过Western blot分析MLC2（p-MLC2）和其他下游靶点的磷酸化水平。该肽可诱导强烈的MLC2磷酸化，且该过程不依赖于Ca2+内流。
动物实验
在体内研究中，可将16-38-胸腺素β4（牛源）TFA以1-50 μg/kg的剂量通过静脉注射（IV）给予麻醉大鼠。通过颈动脉导管监测血压。该肽以推注方式注射，以观察其血管活性作用（例如，平均动脉压）。也可将肠系膜动脉连接到肌动描记仪上，以测量等长张力。
药代性质 (ADME/PK)
TFA盐形式易溶于水和DMSO，分子量为2841.10。体外研究中，可将其溶解于无菌水或PBS缓冲液中。体内给药时，可将其配制成生理盐水溶液。由于易受蛋白水解酶降解，该肽的半衰期很短（仅几分钟），通常用于急性实验。储存：冻干粉，-20℃保存。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
该肽在研究常用浓度（pM 至 nM）下通常无毒。高剂量全身给药时，可能导致持续性血管收缩，进而引起缺血。TFA 反离子在低浓度下无毒。目前尚未发表该研究用肽的正式毒理学研究报告。该肽仅供研究使用。
参考文献

[1]. A hypothalamic activator of calmodulin-dependent enzymes is thymosin beta 4 (1-39). Neurochem Res. 1992 Aug;17(8):773-7.
其他信息
16-38-胸腺素β4（牛源）TFA 是一种研究级肽工具，用于研究肌球蛋白轻链激酶 (MLCK) 激活和平滑肌收缩。它并非药物，也未获得美国食品药品监督管理局 (FDA) 批准用于人体治疗。它广泛应用于血管生物学研究，用于解析钙离子依赖性和非钙离子依赖性通路。关键参考文献描述了其在无钙调蛋白 (CaM) 的情况下激活 MLCK 的活性。本品仅供研究使用 (RUO)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C120H205F3N32O43
分子量
2841.10
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.3520 mL 1.7599 mL 3.5198 mL
5 mM 0.0704 mL 0.3520 mL 0.7040 mL
10 mM 0.0352 mL 0.1760 mL 0.3520 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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电话: 020-31522723 传真: 463611831 邮箱: sales@invivochem.cn
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