| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
(Arg)9, FAM-labeled is used as a tool to study cellular uptake mechanisms, intracellular trafficking, and subcellular localization of cell-penetrating peptides and their cargoes. The FAM fluorophore allows tracking of the peptide's binding to the cell surface, endocytosis, and intracellular distribution. (Arg)9 is known to bind to heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) on the cell surface, which facilitates its internalization primarily through macropinocytosis and other endocytic pathways.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，(Arg)9肽可被多种细胞类型内化，包括原代细胞和细胞系。FAM标记可用于通过流式细胞术（中值荧光强度）或荧光显微镜定量测量细胞摄取。该肽通常以浓度依赖的方式（0.1-10 uM）在15-60分钟内被快速摄取。低温、细胞ATP耗竭以及使用巨胞饮抑制剂（如EIPA和rottlerin）处理均可抑制(Arg)9的摄取，证实其进入细胞的过程依赖于能量，并通过巨胞饮作用介导。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，全身给药后，(Arg)9肽会在多种组织中积聚。在成像研究中，小鼠经静脉(IV)或腹腔(IP)注射FAM标记的(Arg)9肽，剂量为0.5-5 mg/kg。FAM荧光（激发波长λ_ex 494 nm，发射波长λ_em 518 nm）可通过荧光显微镜或全身成像在组织切片中检测。该肽主要分布于肾脏（由于肾脏清除）、肝脏和肺脏，并且也有少量脑组织摄取。(Arg)9肽通常与治疗性载体偶联，以增强其在体内的细胞递送和组织渗透性。
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| 酶活实验 |
采用基于FAM荧光的流式细胞术进行摄取实验。将贴壁细胞（例如HeLa、CHO、HEK293）接种于12孔或24孔板中。当细胞汇合度达到70-80%时，用浓度为0.1-10 uM的FAM标记的(Arg)9在37℃下处理15-120分钟。处理后，用PBS洗涤细胞3次以去除未结合的肽，然后用胰蛋白酶消化，并重悬于FACS缓冲液中。使用流式细胞仪（激发波长488 nm，发射波长525/530 nm）测量荧光强度。记录荧光强度中值并根据细胞计数进行标准化。在抑制实验中，将细胞与摄取抑制剂（EIPA、细胞松弛素D、罗特林、制霉菌素）预孵育30分钟。
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| 细胞实验 |
对于共聚焦显微镜观察，将细胞接种于盖玻片或玻璃底培养皿中。用 FAM 标记的 (Arg)9 (1-5 uM) 处理细胞 30-60 分钟，洗涤后用 4% 多聚甲醛 (PFA) 固定。细胞核用 DAPI 或 Hoechst 33342 复染。为了观察内体/溶酶体定位，将细胞与 LysoTracker Red DND-99 (50 nM) 或 CellLight Early Endosomes-GFP (BacMam 2.0) 进行共染色。为了观察质膜染色，将细胞与小麦胚凝集素 (WGA) Alexa Fluor 647 染色。使用共聚焦激光扫描显微镜采集图像，并使用 ImageJ/Fiji 软件进行分析。
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| 动物实验 |
在体内生物分布研究中，将雌性BALB/c小鼠（6-8周龄）经尾静脉注射（IV）或腹腔注射（IP）FAM标记的(Arg)9（1-10 mg/kg），溶于无菌生理盐水中。注射后不同时间点（0.5、1、2、4、8、12、24小时），处死小鼠，并收集器官（肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、心脏、脑、肠）。荧光成像方面，使用IVIS Spectrum成像系统（激发波长λ_ex 465 nm，发射波长λ_em 520 nm）对组织进行离体成像。或者，将组织冷冻、切片（10-20 μm），然后用荧光显微镜成像。定量生物分布分析方面，将组织匀浆，并使用酶标仪测量荧光强度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
FAM标记的(Arg)9是一种细胞穿透肽(CPP)。在体内，由于其分子量小（(Arg)9加FAM的分子量约为1500 g/mol）且带正电荷，该肽主要分布于肾脏，经肾小球滤过和肾脏清除。由于肾脏清除迅速，其血浆半衰期较短（小鼠体内通常为5-20分钟）。进行药代动力学(PK)分析时，需在不同时间点采集血样，分离血浆，并测量FAM荧光强度。为了延长循环时间，(Arg)9通常与较大的载体（例如PEG、蛋白质或纳米颗粒）偶联。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种由天然氨基酸（L-精氨酸）和FAM染料（Arg）9组成的肽，FAM标记的(Arg)9在细胞摄取研究所用的浓度（1-20 μM）下通常无毒。在细胞活力检测（MTT、CellTiter-Glo）中，浓度高达20 μM时未观察到明显的细胞毒性。在极高浓度（>50 μM）下，由于该肽的阳离子性质，可能会发生一些膜破坏和细胞毒性。体内实验表明，小鼠对高达10-20 mg/kg的剂量耐受性良好，未出现明显的体重减轻、器官毒性或行为改变。预计不会产生遗传毒性或免疫原性。
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| 参考文献 |
[1]. CPProtectides: Rapid uptake of well-folded β-hairpin peptides with enhanced resistance to intracellular degradation. Pept Sci (Hoboken). 2019 Mar; 111(2): e24092.
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| 其他信息 |
细胞穿透肽（CPP），包括(Arg)9，被广泛用作多种治疗和成像药物的递送载体，例如寡核苷酸（siRNA、反义寡核苷酸、miRNA）、蛋白质、肽和纳米颗粒。九精氨酸序列（Arg9）是最有效的CPP之一，常被用作CPP摄取研究的阳性对照。FAM标记（5-羧基荧光素）是一种明亮、光稳定的绿色荧光染料，激发波长λ_ex 494 nm，发射波长λ_em 518 nm，常用于流式细胞术和荧光显微镜。本产品仅供研究使用，未经FDA批准用于人体治疗。
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| 分子式 |
C75H120N36O16
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| 分子量 |
1782.00
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| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5612 mL | 2.8058 mL | 5.6117 mL | |
| 5 mM | 0.1122 mL | 0.5612 mL | 1.1223 mL | |
| 10 mM | 0.0561 mL | 0.2806 mL | 0.5612 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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