| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PCSK9/Low Density Lipoprotein Receptor
The primary molecular target of Enlicitide chloride is PCSK9 (proprotein convertase subtilisin/kexin type 9), a key regulator of plasma LDL cholesterol levels. PCSK9 binds to the LDL receptor (LDLR) and promotes its degradation, thereby reducing the clearance of LDL cholesterol from the circulation. By antagonizing PCSK9, Enlicitide chloride prevents the degradation of LDLR, leading to increased LDLR levels on the cell surface and enhanced clearance of LDL cholesterol from the blood. This mechanism results in significant reductions in plasma LDL-C levels. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
本研究采用新型mRNA展示筛选技术鉴定先导化合物，并结合新型合成化学方法，通过基于结构的药物设计对其进行优化，最终筛选出对PCSK9具有极高活性和选择性的大环肽（MK-0616）。MK-0616源自Tucker等人先前报道的先导化合物44，该化合物是通过mRNA展示筛选结合基于结构的药物设计和迭代药物化学方法筛选得到的。体外研究表明，恩利西肽氯化物（MK-0616）对PCSK9具有高亲和力，Ki值为5 pM。该化合物能有效结合PCSK9，并阻止其与LDL受体的相互作用。这种对PCSK9功能的拮抗作用导致LDL受体水平升高，并增强细胞对LDL胆固醇的摄取。体外实验通常包括结合实验以评估化合物对PCSK9的亲和力，以及功能实验以评估其对PCSK9介导的LDLR降解的抑制作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
MK-0616 在体外对 PCSK9 表现出高亲和力（Ki = 5 pM），且在临床前研究中显示出足够的安全性和口服生物利用度，使其能够进入临床试验阶段。在健康成人的 I 期临床研究中，单次口服 MK-0616 可使游离、未结合的血浆 PCSK9 水平几何平均值降低 93% 以上（95% CI，84-103）；在接受他汀类药物治疗的受试者中，每日一次口服 20 mg MK-0616 14 天后，低密度脂蛋白胆固醇水平几何平均值最大降低了 61%（95% CI，43-85）。
盐酸恩利西肽的体内研究已证实其可有效降低血浆低密度脂蛋白胆固醇水平。该化合物在临床前研究中显示出足够的安全性和口服生物利用度，使其能够进入临床开发阶段。动物模型研究表明，MK-0616 能显著降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。目前已在健康成年人中开展了 I 期临床研究，以评估该化合物的安全性、耐受性和药代动力学。 |
| 酶活实验 |
Alexa荧光共振能量转移PCSK9结合分析
PCSK9时间分辨荧光共振能量转移Alexa荧光共振能量转移标准分析用于测量PCSK9与AlexaFluor647 (AF)标记的环状肽（试剂A，KD = 83 nM）之间的相互作用。配制含有1 nM生物素化PCSK9和2.5 nM Lance链霉亲和素铕(Strep-Eu)的溶液，该溶液溶于50 mM HEPES (4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸) pH 7.4、0.15 M NaCl、5 mM CaCl2、0.01%牛血清白蛋白(BSA)和0.01%表面活性剂P20的缓冲液中。另配制含有40 nM AF标记的环状肽的溶液，该溶液也溶于相同的缓冲液体系中。使用回声液体处理仪（Beckman）将0.750 μl待测化合物转移至检测板，随后加入15 μl PCSK9+Stept-Eu和15 μl AF肽。最终检测体积为30.750 μl，包含0.5 nM PCSK9、1.25 nM Strep-Eu和20 nM AF环状肽。反应在室温下孵育至少2小时后，使用Envision多功能酶标仪进行荧光测量。IC50值通过非线性回归拟合S型剂量反应曲线确定。然后根据IC50和AF环状肽的KD值计算Ki值。监测铕标记的PCSK9的计数（B计数）以观察化合物是否对PCSK9产生不利影响。 B计数的减少提示结合抑制可能出现假阳性结果。 人血浆中PCSK9的体外滴定 为了评估PCSK9抑制剂与人血浆中PCSK9的体外结合效力（MRL志愿者献血者计划用于研究；n=20人对照），使用HP D300数字分液器，在150 μL混合乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血浆（人或食蟹猴）中配制浓度递增（0、0.3、1、3、5、10、50、100、500和1000 nM）的测试化合物4418和MK-0616（均以0.1 mM的二甲基亚砜起始浓度）溶液。将用化合物 44 或 MK-0616 滴定的血浆样品在 25°C 下孵育 30 分钟，取各样品 50 μL 用于评估 PCSK9 靶点结合情况，方法采用文献[1]所述的亲和捕获、酶解和液相色谱-串联质谱联用技术。体外酶/受体结合试验通常研究 Enlicitide 氯化物与 PCSK9 的相互作用。可使用表面等离子共振 (SPR) 或荧光偏振技术测定化合物与 PCSK9 的结合亲和力 (Ki)，其中 MK-0616 的 Ki 值为 5 pM。可使用标记的 PCSK9 或标记的配体进行竞争性结合试验，以确定化合物的抑制浓度 (IC50)。功能性试验，例如 LDLR 降解试验，可用于评估化合物抑制 PCSK9 介导的 LDLR 降解的能力。 |
| 细胞实验 |
被动通透性测定
简而言之，将MDCKII细胞培养于96孔Transwell培养板中。膜面积为0.11 cm²。MDCKII细胞最初由荷兰癌症研究所（阿姆斯特丹，荷兰）的P. Borst博士提供，并根据许可协议使用。将[³H]MK-0616 (5 µM)、[³H]维拉帕米 (1 μM)或[³H]甘露醇 (5 μM)溶于Hanks平衡盐溶液中，该溶液含有0.1% (w/v)牛血清白蛋白、10 mM HEPES (pH 7.4)、10 μM环孢素（用于抑制转运活性）和1.2 μM葡聚糖德克萨斯红。将底物溶液（150 µL）加入培养板的顶端或基底外侧室，并将缓冲液（150 µL；Hanks平衡盐溶液，含0.1% (w/v) BSA、10 mM HEPES、10 µM环孢素，pH 7.4）加入另一侧室。3小时后，分别从两侧取50 µL等分试样，并使用MicroBeta Wallac Trilux液体闪烁计数器测定放射性。实验重复三次。质量平衡≥70%被认为是可接受的。使用葡聚糖德克萨斯红作为细胞旁通透性的标记物来确认单层细胞的完整性。维拉帕米（Papp = 28.5×10⁻⁶ cm/s）和甘露醇（Papp = 2.1×10⁻⁶ cm/s）的被动通透性证实了该检测方法的功能。报告的表观渗透率 (Papp) 是 t = 3 小时时从顶端到基底外侧的 Papp 和从基底外侧到顶端的 Papp 的平均值，单位为 10⁻⁶ cm/s。体外细胞实验中，Enlicitide 氯化物的活性通常包括用该化合物处理培养细胞（例如肝细胞），然后评估 PCSK9 抑制情况和 LDLR 水平。细胞用 MK-0616 处理后，测量 LDLR 水平和 LDL 胆固醇摄取量。进行剂量反应实验以确定该化合物抑制 PCSK9 介导的 LDLR 降解的效力。此外，还可以进行细胞活力测定以评估该化合物的安全性。 |
| 动物实验 |
Enlicitide 氯化物的体内动物研究通常包括给动物模型给药，以评估其降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的疗效。已在相关动物模型中开展临床前研究，以评估该化合物的药代动力学、药效学和安全性。典型终点包括测量血浆 LDL-C 水平、评估低密度脂蛋白受体（LDLR）表达以及评估心血管结局。临床前研究已证实该化合物具有良好的安全性和口服生物利用度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Enlicitide 氯化物的药代动力学特性包括其口服生物利用度，这已在临床前研究中得到证实。该化合物的分子式为 C82H110ClFN14O15，分子量为 1586.29。作为一种环状肽，其设计旨在实现口服生物利用度，这比注射型 PCSK9 抑制剂具有显著优势。已开展药代动力学研究，以表征该化合物的吸收、分布、代谢和排泄。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Enlicitide氯化物的毒性特征已在临床前研究中得到评估，结果表明其安全性足以支持临床开发。该化合物拟用于心血管疾病的研究，目前正在进行临床试验。已在健康成人中开展I期临床研究，以评估其安全性和耐受性。建议在处理该化合物时遵循标准实验室安全操作规程，包括使用个人防护装备。
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| 参考文献 |
[1]. Orally Bioavailable Macrocyclic Peptide That Inhibits Binding of PCSK9 to the Low Density Lipoprotein Receptor. Circulation. 2023 Jul 11;148(2):144-158.
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| 其他信息 |
Enlicitide氯化物（MK-0616）是一种强效的PCSK9拮抗剂，是一种新型的口服生物利用度环肽PCSK9抑制剂。它显著降低LDL-C，并对PCSK9表现出高亲和力（Ki = 5 pM）。该化合物用于研究心血管疾病，如动脉粥样硬化、高胆固醇血症、冠心病、代谢综合征和急性冠脉综合征。它在临床前研究中显示出足够的安全性和口服生物利用度，已进入临床开发，第一阶段研究在健康成年人中进行。该化合物的分子式为C82H110ClFN14O15，分子量为1586.29。
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| 分子式 |
C82H110CLFN14O15
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|---|---|
| 分子量 |
1586.28702306747
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| 精确质量 |
1584.794
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| 元素分析 |
C, 62.09; H, 6.99; Cl, 2.23; F, 1.20; N, 12.36; O, 15.13
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| CAS号 |
2407527-16-4
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| 相关CAS号 |
2407527-16-4 (chloride); 2407527-14-2 (cation)
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| PubChem CID |
166642685
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
366Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
10
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| 氢键受体(HBA)数目 |
17
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| 可旋转键数目(RBC) |
12
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| 重原子数目 |
113
|
| 分子复杂度/Complexity |
3240
|
| 定义原子立体中心数目 |
10
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| SMILES |
[Cl-].FC1C=CC2=C(C=1)C1=CN2CCCCCCN2C(CCC(N[C@@H](C)C(N[C@H](CNC(CCCCC[N+](C)(C)C)=O)C(N[C@H]3CC4C=CC=C(C=4)CNC(CO[C@H]4CCN(C([C@H](C1)NC3=O)=O)[C@@H]4C(N[C@@H]([C@@H](C)O)C(N[C@@H](CC1C=CC(=CC=1)OC)C(N1CCC[C@]1(C(NCCC1C=CC(C2)=CC=1)=O)C)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O
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| InChi Key |
KZFXQSLIAQMQRP-MQCRZNPVSA-O
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| InChi Code |
InChI=1S/C81H104FN15O15S2/c1-50-73(101)87-63-40-54-15-10-14-52(35-54)13-8-9-31-112-68-22-27-94-72(68)77(105)90-71(51(2)98)76(104)89-64(39-53-16-19-61(109-7)20-17-53)79(107)95-26-11-24-81(95,3)80(108)83-25-34-114-49-56-36-55(48-113-33-23-69(99)86-66(75(103)85-50)43-84-70(100)47-111-30-12-29-110-32-28-97(4,5)6)37-60(38-56)96-46-59(91-92-96)45-93-44-57(41-65(78(94)106)88-74(63)102)62-42-58(82)18-21-67(62)93/h8-10,14-21,35-38,42,44,46,50-51,63-66,68,71-72,98H,11-13,22-34,39-41,43,45,47-49H2,1-7H3,(H7-,83,84,85,86,87,88,89,90,99,100,101,102,103,104,105,108)/p+1/b9-8+/t50-,51-,63+,64+,65+,66+,68+,71+,72+,81+/m1/s1
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| 化学名 |
L-Proline, L-alanyl-3-[[1-oxo-6-(trimethylammonio)hexyl]amino]-D-alanyl-3-[[(2-hydroxyacetyl)amino]methyl]-L-phenylalanyl-1-[6-[[[4-(2-aminoethyl)phenyl]methyl](3-carboxy-1-oxopropyl)amino]hexyl]-5-fluoro-L-tryptophyl-(3S)-3-hydroxy-L-prolyl-L-threonyl-O-methyl-L-tyrosyl-2-methyl-, (4→1),(8→4)-dilactam, cyclic (3→5)-ether, chloride (1:1)
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| 别名 |
MK0616; MK-0616; Enlicitide chloride; 2407527-16-4; 3D2DNA8NXK; RefChem:1084095; Enlicitide (chloride); MK 0616
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.6304 mL | 3.1520 mL | 6.3040 mL | |
| 5 mM | 0.1261 mL | 0.6304 mL | 1.2608 mL | |
| 10 mM | 0.0630 mL | 0.3152 mL | 0.6304 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Link: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT06814106
Conditions:HealthyLink: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT06655311
Conditions:Healthy|HypercholesterolemiaLink: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT05070390
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