| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Fluorescent Dye
Cy7 tyramide is a fluorescent substrate for horseradish peroxidase (HRP) and does not have a specific pharmacological target. It is used in tyramide signal amplification (TSA) techniques, where HRP catalyzes the deposition of tyramide-conjugated fluorophores onto tissue sections or cell samples, enabling highly sensitive detection of low-abundance targets. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Cy3酪胺信号放大（TSA）检测实验方案
原理：本方法基于酪胺信号放大技术，利用辣根过氧化物酶催化Cy7荧光标记的酪胺底物。该过程在靶位点产生高强度共价结合的荧光信号，从而实现对靶蛋白的高灵敏度检测。 实验步骤： 1. 细胞固定 使用含3.7%多聚甲醛的1×PBS溶液在室温下固定细胞20分钟。 固定后，用1×PBS溶液冲洗细胞两次，以彻底去除固定剂。 2. 细胞透化 使用0.1% Triton X-100溶液在室温下透化细胞1至5分钟（具体时间应根据细胞类型进行优化）。 透化后，用1×PBS溶液冲洗细胞两次。 3. 阻断内源性过氧化物酶活性 使用含3% H₂O₂的1×PBS溶液在室温下孵育10分钟，以淬灭细胞内的内源性过氧化物酶活性。 完成后，用1×PBS溶液冲洗细胞两次。 4.封闭非特异性位点 使用含1%牛血清白蛋白的1×PBS溶液作为封闭缓冲液，于4℃孵育30分钟以封闭非特异性结合位点。 5. 一抗孵育 去除封闭缓冲液，直接加入适量一抗工作液（用含1% BSA的PBS稀释）。 孵育条件：室温孵育1小时，或4℃过夜。 孵育后，用1×PBS溶液洗涤细胞3次，每次5分钟。 6. 二抗-HRP孵育 加入100 µL辣根过氧化物酶标记的二抗工作液，避光室温孵育1小时。 孵育后，用1×PBS溶液洗涤细胞3次，每次5分钟。时间。 7. Cy3 酪胺信号放大和检测 加入 100 µL 预先优化的 Cy7 酪胺工作液，并在室温下避光孵育 5 至 10 分钟。 孵育后，用 1× PBS 溶液彻底冲洗细胞三次，每次 5 分钟，以去除未反应的酪胺底物。 8. 成像 使用配备适用于 Cy7 荧光团的滤光片组（通常激发/发射波长约为 ~750/~770 nm）的荧光显微镜进行图像采集。 注意事项： 关键优化步骤：Cy7 酪胺工作液的最佳浓度对信噪比至关重要。建议根据具体的实验系统（例如细胞类型、一抗）通过预实验（例如浓度梯度实验）进行精确优化。 作为一种荧光底物，Cy7酪胺本身不具有药理活性。它的作用在于其酶促活化：在辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢存在下，生成酪胺自由基，并与蛋白质上附近的酪氨酸残基共价结合，从而实现局部信号放大。近红外荧光（激发/发射波长756/779 nm）具有高灵敏度和低背景噪声的特点。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
作为一种荧光探针，Cy7酪胺主要用于离体组织分析，而非直接体内给药。辣根过氧化物酶（HRP）催化的酪胺沉积技术应用于固定组织切片或细胞，用于高灵敏度地检测抗原或核酸。近红外荧光使其能够与其他荧光染料进行多重检测，并兼容多种成像平台。
|
| 酶活实验 |
Cy7酪胺的非细胞检测方案涉及免疫组织化学（IHC）或原位杂交（ISH）中的酪胺信号放大（TSA）。典型的方案包括：阻断内源性过氧化物酶活性，将样品与一抗或探针孵育，与HRP标记的二抗或检测试剂孵育，加入Cy7酪胺工作液（通常用含0.003% H₂O₂的放大缓冲液以1:50–1:200的比例稀释），孵育5–30分钟，洗涤，最后封片进行荧光成像。
|
| 细胞实验 |
使用 Cy7 酪胺进行的细胞分析通常在固定细胞或组织切片上进行。一个典型的实验方案包括：用多聚甲醛固定细胞，用 Triton X-100 进行透化处理，用血清封闭，与一抗孵育，与 HRP 标记的二抗孵育，应用 Cy7 酪胺底物孵育 5-30 分钟，洗涤，并使用配备 Cy7 滤光片组的荧光显微镜或共聚焦显微镜进行成像。
|
| 动物实验 |
由于Cy7酪胺用于离体组织分析而非活体动物给药，因此不适用于体内动物研究。酪胺信号放大技术应用于从动物模型中采集的组织切片或细胞样本，用于高灵敏度地检测生物标志物。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
由于Cy7酪胺是一种用于体外研究的试剂，而非用于活体生物的治疗药物，因此其药代动力学特性不适用。该化合物旨在用于组织切片或细胞制备物中的酶促活化。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种用于科研的荧光染料，Cy7酪胺不适用于人类治疗。目前尚无毒理学数据。处理该染料时应遵循标准安全预防措施。该化合物应储存在4°C的密封容器中，避光防潮。DMSO储备液在适当条件下稳定。
|
| 参考文献 |
[1]. Tyramide signal amplification for analysis of kinase activity by intracellular flow cytometry. Cytometry A. 2010 Nov; 77(11):1020-31.
|
| 其他信息 |
细胞内流式细胞术能够对单细胞水平上的多种分子靶标进行定量分析。然而，检测灵敏度的限制限制了该方法的应用，有时导致无法测量极低丰度的蛋白质或区分表达略有不同浓度蛋白质的细胞。为了改善这些测量，我们优化了一种称为酪胺信号放大（TSA）的酶放大方法，以评估细胞内激酶级联反应。首先，我们证明了太平洋蓝、太平洋橙和Alexa Fluor 488酪胺报告分子在透化细胞中具有低非特异性结合。接下来，我们研究了抗体浓度、酪胺浓度和反应时间对检测分辨率的影响。与标准非放大检测方法相比，优化的TSA方法提高了内源性Erk和Stat细胞信号通路的测量分辨率，提升了10倍或更多。TSA还提高了检测灵敏度，并且当与荧光细胞条形码结合时，基于用于评估高通量药物筛选的指标增强了检测性能。TSA被用于分析初级免疫系统细胞中的Stat1磷酸化，揭示了不同细胞群体之间的异质性，包括CD4+FoxP3+调节性T细胞。我们预计该方法将在信噪比低的细胞内流式细胞术分析中得到广泛应用。[1]
Cy7酪胺（Cy7 TSA）是酪胺信号放大的强大工具，能够在免疫组化和原位杂交中提供对低丰度靶标的高灵敏度检测。Cy7的近红外荧光使其能够与其他荧光染料进行多重标记，并与各种成像平台兼容。HRP催化的沉积机制相比直接荧光标记允许显著的信号放大，使其非常适合检测稀有抗原或核酸靶标。 |
| 分子式 |
C49H66N4O8S2
|
|---|---|
| 分子量 |
903.20
|
| 精确质量 |
902.432207
|
| PubChem CID |
169494300
|
| 外观&性状 |
Dark green to black solid powder
|
| tPSA |
191 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
17
|
| 重原子数目 |
63
|
| 分子复杂度/Complexity |
1740
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CCN\1C2=C(C=C(C=C2)S(=O)(=O)[O-])C(/C1=C\C=C\C=C\C=C\C3=[N+](C4=C(C3(C)C)C=C(C=C4)S(=O)(=O)[O-])CCCCCC(=O)NCCC5=CC=C(C=C5)O)(C)C.CC[NH+](CC)CC
InChIKey: PKVPZSGTNHZHDH-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Key |
PKVPZSGTNHZHDH-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C43H51N3O8S2.C6H15N/c1-6-45-37-24-22-33(55(49,50)51)29-35(37)42(2,3)39(45)15-11-8-7-9-12-16-40-43(4,5)36-30-34(56(52,53)54)23-25-38(36)46(40)28-14-10-13-17-41(48)44-27-26-31-18-20-32(47)21-19-31;1-4-7(5-2)6-3/h7-9,11-12,15-16,18-25,29-30H,6,10,13-14,17,26-28H2,1-5H3,(H3-,44,47,48,49,50,51,52,53,54);4-6H2,1-3H3
|
| 化学名 |
(2E)-1-ethyl-2-[(2E,4E,6E)-7-[1-[6-[2-(4-hydroxyphenyl)ethylamino]-6-oxohexyl]-3,3-dimethyl-5-sulfonatoindol-1-ium-2-yl]hepta-2,4,6-trienylidene]-3,3-dimethylindole-5-sulfonate;triethylazanium
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~110.72 mM; with sonication (<60°C))
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1072 mL | 5.5359 mL | 11.0717 mL | |
| 5 mM | 0.2214 mL | 1.1072 mL | 2.2143 mL | |
| 10 mM | 0.1107 mL | 0.5536 mL | 1.1072 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
