| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
QPCTL (glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) – IC50 = 3.8 ± 0.7 nM. [1]
QPCT (glutaminyl-peptide cyclotransferase) – comparable inhibition to QPCTL (exact IC50 not provided in main text; supplementary Fig. S3 shows dose-response curve). [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
QP5038 在 HEK293T 细胞中抑制 CD47 焦谷氨酸化（pGlu-CD47），IC50 为 3.3 ± 0.5 nM（通过剂量依赖性抑制实验测定）。[1]
QP5038 在 HEK293T 细胞中以剂量依赖性方式减弱 CD47 与 SIRPα 的结合，IC50 为 8.5 ± 4.9 nM，效力优于 PQ912 和 SEN177。[1] 在 HEK293T 和 Raji 细胞中，QP5038（100 nM）对 CD47 焦谷氨酸化的抑制效果优于 SEN177 和 PQ912，且不改变细胞表面 CD47 的总水平。[1] QP5038 显著减弱多种癌细胞系中的 CD47 焦谷氨酸化，包括 B16F10、HCT116、SKOV3、Huh7、T24、MCF-6、SU-DHL-8、H929 和 H1299。[1] 在体外吞噬实验中，QP5038（10 μM，处理48小时）显著增强巨噬细胞对抗 TRP1 抗体 TA99 处理的 B16F10 细胞的吞噬，以及对利妥昔单抗处理的 Raji 细胞的吞噬。QP5038 的吞噬效率远优于 SEN177 和 PQ912。[1] QP5038 不显著损害 Raji 或 B16F10 细胞的活力（补充图 S5）。[1] QP5038 不降低骨髓来源巨噬细胞（BMDM）的活力，也不减弱其对凋亡 Jurkat 细胞的吞噬能力（补充图 S8）。[1] 在衰老模型中，QP5038 预处理可阻断衰老细胞对巨噬细胞介导的凋亡细胞胞葬作用的抑制（补充图 S7）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 B16F10 同种移植小鼠肿瘤模型（C57BL/6 小鼠，皮下注射 1×10⁶ 个 B16F10 细胞）中，QP5038（25 mg/kg，腹腔注射，每日一次）与抗 PD-1 抗体（80 μg/只，腹腔注射，从第12天开始每周一次）联合治疗，与各单药治疗组及 SEN177 治疗组相比，显著抑制了肿瘤生长和肿瘤重量，且对小鼠体重无影响。[1]
在另一个 B16F10 模型（5×10⁶ 个细胞）中，QP5038（25 mg/kg，腹腔注射，从第6天起每日一次）联合抗 PD-1 抗体显示出优于 SEN177 联合抗 PD-1 的抗肿瘤疗效。[1] 使用抗 CD3 抗体耗竭小鼠 T 细胞后，QP5038 对抗 PD-1 抗体介导的肿瘤抑制的增强作用被阻断，表明 QP5038 的抗肿瘤作用是通过激活免疫反应实现的。[1] |
| 酶活实验 |
将 QPCTL 或 QPCT 蛋白（7 ng/μL，12.5 μL）和不同浓度的待测化合物（2.5 μL）加入 384 孔板中，置于冰上。反应体系在 37°C、100 rpm 摇动下孵育 10 分钟。然后加入 10 μL 荧光底物 H-Gln-AMC（500 μM），在 37°C、100 rpm 下孵育 20 分钟。最后加入 25 μL PGPEP I（焦谷氨酰氨基肽酶 I，5.74 ng/μL），在 37°C、100 rpm 下孵育 30 分钟。在激发波长 380 nm/发射波长 460 nm 处测量荧光。使用 GraphPad Prism 8.0 计算 IC50 值。QP5038 对 QPCTL 的 IC50 为 3.8 ± 0.7 nM。[1]
PGPEP I 蛋白从转化了含人 PGPEP I 的 pET28a 载体的 E. coli BL21(DE3) 细胞中纯化。细胞用 1 mM IPTG 在 20°C 诱导 48 小时，通过高压匀浆裂解，经 Ni-NTA 亲和层析和尺寸排阻层析纯化。[1] QPCTL 蛋白使用含人 QPCTL cDNA 的 pGEX-4T-2 载体在 E. coli BL21(DE3) 细胞中表达。细胞用 1 mM IPTG 在 20°C 诱导 8-10 小时，通过超声破碎裂解，使用 GST 亲和珠纯化。[1] |
| 细胞实验 |
HEK293T、B16F10、HCT116、SKOV3、Huh7、T24、MCF-6、SU-DHL-8、H929、Raji、H1299 和 Jurkat 细胞在含 10% FBS、青霉素（100 U/mL）和链霉素（100 μg/mL）的 DMEM 或 RPMI 1640 培养基中，于 37°C、5% CO2 条件下培养。[1]
CD47 焦谷氨酸化实验：用指定浓度的 QP5038（如 100 nM 或用于 IC50 测定的剂量梯度）处理细胞。通过流式细胞术使用特异性抗体检测 pGlu-CD47 水平和总 CD47 表面水平。[1] SIRPα 结合实验：细胞与 PE 标记的重组人或小鼠 SIRPα 蛋白在冰上避光孵育 1 小时，然后通过流式细胞术分析。QP5038 在 HEK293T 细胞中以剂量依赖性方式降低 SIRPα 结合，IC50 为 8.5 ± 4.9 nM。[1] 吞噬实验：癌细胞用 5 μM CFSE 在 37°C 染色 10 分钟。巨噬细胞（BMDM）以 1×10⁵ 个细胞/孔铺于 48 孔板。靶细胞与巨噬细胞在 37°C 共培养 4 小时。巨噬细胞用 APC 标记的抗 F4/80 抗体标记，进行流式细胞术分析。吞噬率（%）= [CFSE⁺F4/80⁺ 细胞数 / 总 CFSE⁺ 细胞数] × 100%。QP5038（10 μM，癌细胞预处理 48 小时）显著增强了与 TA99 或利妥昔单抗联合时的吞噬作用。[1] 胞葬实验：衰老 B16F10 细胞通过 10 μM 顺铂诱导 4-7 天，并用 β-半乳糖苷酶染色确认。凋亡 Jurkat 细胞通过 5 μM 喜树碱诱导 4 小时。BMDM 与衰老细胞共培养 16 小时，然后加入 CFSE 标记的凋亡 Jurkat 细胞（巨噬细胞:Jurkat = 1:2）孵育 60 分钟。胞葬率计算为 F4/80⁺ 细胞中 CFSE⁺F4/80⁺ 细胞的百分比。QP5038 预处理阻断了衰老细胞对胞葬作用的抑制。[1] 细胞活力实验：Raji 细胞（5000 个/孔）、B16F10 细胞（3000 个/孔）或 BMDM（10000 个/孔）铺于 96 孔板，使用 CCK-8 试剂盒按说明书检测细胞活力。QP5038 不显著损害细胞活力。[1] |
| 动物实验 |
B16F10 同种移植肿瘤模型（首次）：雄性 C57BL/6 小鼠在第 0 天皮下接种 1×10⁶ 个 B16F10 细胞（溶于 100 μL DMEM）。抗 PD-1 抗体（克隆 RMP1-14）或小鼠 IgG2a 同型对照从肿瘤接种后第 12 天开始腹腔注射，剂量为 80 μg/只，每周一次。QP5038 以 25 mg/kg 每日一次腹腔注射。每日测量肿瘤，24 天后处死小鼠。肿瘤体积 =（长 × 宽²）× 0.5。[1]
与 SEN177 比较实验：雄性 C57BL/6 小鼠在第 0 天皮下接种 5×10⁶ 个 B16F10 细胞（溶于 100 μL DMEM）。抗 PD-1 抗体或同型对照从第 6 天开始腹腔注射，剂量为 80 μg/只，每周一次。QP5038 或 SEN177 从第 6 天开始以 25 mg/kg 每日一次腹腔注射。每三天测量肿瘤，第 15 天处死小鼠。收集小鼠器官和血液用于血常规、血清生化和组织学评估。[1] T 细胞耗竭实验：6-8 周龄雄性 C57BL/6 小鼠在右 flank 皮下接种 B16F10 细胞（8.5×10⁵ 个/100 μL）。抗 CD3 抗体（200 μg/只）或同型对照从肿瘤接种前一天（第 -1 天）开始每 4 天注射一次。当肿瘤体积达到约 50 mm³ 时，小鼠接受腹腔注射抗 PD-1 抗体（80 μg/只，每周一次）和 QP5038（25 mg/kg，每日一次）或溶剂对照。每周测量两次体重和肿瘤体积。通过流式细胞术使用 PE 标记的抗小鼠 CD3 抗体确认 T 细胞耗竭。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠体内毒性评估显示，QP5038（25 mg/kg，每日一次，持续 15 天）未引起血常规异常（WBC、RBC、PLT、LYM、MON、NEU）或器官损伤（肝、肾、脾、心），经苏木精-伊红（HE）染色评估。血生化指标（肌酐、ALT、AST、BUN）与溶剂对照组相比无显著差异。[1]
QP5038 在体外不显著损害 Raji 细胞、B16F10 细胞或骨髓来源巨噬细胞（BMDM）的活力。[1] QP5038 不减弱巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬能力。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
QP5038 是一种基于苯甲腈结构的 QPCTL 抑制剂，通过对 SEN177 进行基于结构的优化而开发。苯甲腈核心中的腈基在结合模型中与 Glu325 残基形成氢键。QP5038 抑制 CD47 焦谷氨酸化，阻断 CD47/SIRPα 相互作用，促进巨噬细胞介导的癌细胞吞噬。[1]
QP5038 联合抗 PD-1 抗体的抗肿瘤作用依赖于 T 细胞，因为使用抗 CD3 抗体耗竭 T 细胞会阻断其增强的肿瘤抑制作用。[1] QP5038 还能阻断衰老细胞对巨噬细胞介导的凋亡细胞胞葬作用的抑制。[1] |
| 分子式 |
C21H20FN5
|
|---|---|
| 分子量 |
361.42
|
| 精确质量 |
361.170273
|
| CAS号 |
3031429-88-3
|
| PubChem CID |
169494342
|
| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid powder
|
| LogP |
3.1
|
| tPSA |
57.7 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
540
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CN1C=NC=C1C2CCN(CC2)C3=C(C=CC=C3C4=CN=C(C=C4)F)C#N
|
| InChi Key |
IUBVPNGSCDYBJU-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H20FN5/c1-26-14-24-13-19(26)15-7-9-27(10-8-15)21-16(11-23)3-2-4-18(21)17-5-6-20(22)25-12-17/h2-6,12-15H,7-10H2,1H3
|
| 化学名 |
3-(6-fluoro-3-pyridinyl)-2-[4-(3-methylimidazol-4-yl)piperidin-1-yl]benzonitrile
|
| 别名 |
QP5038; QP 5038; QP-5038; 3031429-88-3; orb3133289; SCHEMBL29195008; GTPL13401;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO：～100 mg/mL (276.7 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7669 mL | 13.8343 mL | 27.6686 mL | |
| 5 mM | 0.5534 mL | 2.7669 mL | 5.5337 mL | |
| 10 mM | 0.2767 mL | 1.3834 mL | 2.7669 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
MEDI-1814
Grape Skin Extract
mcK6A1
Donanemab (Mouse IgG2b)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
