Trypsin

别名: 胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(猪胰脏);胰蛋白酶1:300(猪胰脏);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;蛋白酶类;胰蛋白酶(猪胰脏);胰蛋白酶(牛胰);胰蛋白酶(牛胰脏);胰蛋白酶 来源于牛胰腺;TPCK-胰蛋白酶;Trypsin 1:250 胰蛋白酶1:250; 牛胰蛋白酶;牛胰腺胰蛋白酶;胰蛋白酶 重组人胰蛋白酶;胰蛋白酶 测序级胰蛋白酶;胰蛋白酶 测序级胰蛋白酶溶液 序列分析纯胰蛋白酶;胰蛋白酶 来源于牛胰腺(0.22 μm,过滤);胰蛋白酶 重组胰蛋白酶;胰蛋白酶(1:300用于组织消化);胰蛋白酶(冷藏);胰蛋白酶(牛胰)1:250;胰蛋白酶(牛胰腺);胰蛋白酶,BR(1:12000);胰蛋白酶,BR(1:125);胰蛋白酶,BR(1:3000);胰蛋白酶,BR(1:3500);胰蛋白酶,TPCK-胰蛋白酶;胰蛋白酶1:25;胰蛋白酶1:250;胰蛋白酶1:2500;胰蛋白酶1:300;胰蛋白酶 ;猪胰腺胰蛋白酶;猪胰腺胰蛋白酶质谱级别 胰蛋白酶(猪胰);胰蛋白酶,结晶;胰蛋白酶1:250,Trypsin from bovine pancreas;猪胰脏
目录号: V87723 纯度: Protain content ≥90%
重组胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可水解赖氨酸或精氨酸羧基侧的蛋白质。
Trypsin CAS号: 9002-07-7
产品类别: Ser Thr Protease
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
50mg
100mg
1g
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纯度/质量控制文件

纯度: Protein Content=92.2%

产品描述
重组胰蛋白酶(细胞培养级)是一种高纯度丝氨酸蛋白酶,采用基因工程技术,利用微生物(主要是毕赤酵母)发酵生产,完全不含动物源性成分。它旨在提供一种安全、稳定、高效的解决方案,替代从猪或牛胰腺中提取的传统胰蛋白酶,广泛应用于疫苗生产、细胞治疗和基础科学研究等领域——这些领域对生物安全性和产品一致性有着极高的要求。
胰蛋白酶(CAS 9002-07-7)是一种丝氨酸蛋白酶,能够水解赖氨酸和精氨酸残基羧基侧的肽键。它在小肠中由肠激酶作用于胰腺酶原胰蛋白酶原而形成。胰蛋白酶广泛应用于生物化学研究、细胞培养和药物开发。它呈黄色至灰黄色粉末或晶体状。
生物活性&实验参考方法
靶点
Trypsin's primary targets are peptide bonds adjacent to basic amino acids (lysine and arginine) in proteins. It also activates protease-activated receptors (PARs), particularly PAR2 and PAR4, which are involved in cell proliferation, differentiation, and neurogenic inflammation. PAR2 activation promotes wound healing, while PAR4 is involved in inflammatory responses. Trypsin does not target a single receptor but rather cleaves multiple protein substrates.
体外研究 (In Vitro)
体外实验中,胰蛋白酶用于蛋白质消化和结构分析。它具有蛋白水解活性,可使用合成的显色底物进行测定,例如N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)或N-α-苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯胺(BAPNA)。该酶在pH 7-8时活性最佳。胰蛋白酶还具有抗炎活性,并且可以通过其S糖蛋白与pAPN的相互作用诱导PDCoV感染细胞的膜融合。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明,胰蛋白酶能够促进伤口愈合。临床上,它被用于治疗各种炎症、溃疡、创伤、水肿和皮肤病。此外,它也被用于治疗肺气肿和支气管炎。胰蛋白酶通过蛋白水解降解坏死组织和激活蛋白酶激活受体(PARs)发挥作用,从而促进组织修复和炎症消退。
酶活实验
体外胰蛋白酶活性测定采用合成肽底物。将酶与显色或荧光底物在合适的缓冲液(例如,Tris-HCl,pH 7.5–8.0)中于 25–37°C 下孵育。使用分光光度计或荧光计连续测量显色剂或荧光剂的释放。活性以每毫克蛋白质的单位表示。使用蛋白酶抑制剂进行抑制实验以表征其特异性。
细胞实验
利用胰蛋白酶进行的体外细胞实验包括评估PAR2和PAR4的激活情况。表达PAR2或PAR4的细胞(例如,人呼吸道上皮细胞或成纤维细胞)用不同浓度的胰蛋白酶处理。受体激活可通过荧光钙指示剂检测细胞内钙动员,或通过监测下游信号通路(例如MAPK激活)来测量。胰蛋白酶对细胞增殖和迁移的影响也可进行评估。
动物实验
胰蛋白酶的体内动物研究是在伤口愈合模型中进行的。将大鼠或小鼠置于全层皮肤创伤模型中,然后局部或全身应用胰蛋白酶。持续监测伤口愈合情况,并进行组织学分析以评估肉芽组织形成、再上皮化和胶原沉积。胰蛋白酶的抗炎作用则在急性或慢性炎症模型中进行评估。
药代性质 (ADME/PK)
胰蛋白酶不作为药物全身给药;它通常局部使用或作为试剂。用于治疗时,其活性局限于应用部位。该酶在室温下以干燥形式无限期稳定,但应防潮。它溶于水,几乎不溶于醇或甘油。胰蛋白酶可被热和蛋白酶抑制剂灭活。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
胰蛋白酶通常被认为对局部外用和研究应用安全。临床应用中,其耐受性良好,副作用极少。作为一种蛋白水解酶,如果应用于敏感组织,可能会引起刺激。由于该酶分子较大,不易被完整皮肤吸收,因此全身毒性较低。处理酶时应遵循标准安全预防措施,包括佩戴手套和护目镜。
参考文献

[1]. Trypsin promotes C6 glioma cell proliferation in serum- and growth factor-free medium. Neurosci Res. 1996 Jul;25(3):203-8.

[2]. Deng Y, Gruppen H, Wierenga PA. Comparison of Protein Hydrolysis Catalyzed by Bovine, Porcine, and Human Trypsins. J Agric Food Chem. 2018 Apr 25;66(16):4219-4232.

其他信息
胰蛋白酶是一种广泛用于生化研究的蛋白质消化和序列分析的蛋白酶。它还用于细胞培养中的细胞脱离和传代。在临床上,胰蛋白酶用于伤口清创和各种炎症状况的治疗。它还用作食品加工中的凝乳酶延伸剂和去毛皮。该酶有多种等级和活性(例如,胰蛋白酶 1:250)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C35H47N7O10
分子量
725.7886
CAS号
9002-07-7
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3778 mL 6.8890 mL 13.7781 mL
5 mM 0.2756 mL 1.3778 mL 2.7556 mL
10 mM 0.1378 mL 0.6889 mL 1.3778 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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