Carnosine conjugated hyalyronate

目录号: V87779 纯度: ≥98%
肌肽结合透明质酸是二肽肌肽(Car)功能化的透明质酸衍生物,具有抗Aβ淀粉样蛋白聚集的能力。
Carnosine conjugated hyalyronate 产品类别: Beta Amyloid
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
肌肽缀合透明质酸是一种以二肽肌肽(Car)功能化的透明质酸衍生物,具有抑制Aβ淀粉样蛋白聚集的能力。肌肽缀合透明质酸可在体外溶解淀粉样蛋白原纤维并降低Aβ诱导的毒性。肌肽缀合透明质酸的抗淀粉样蛋白聚集作用与其肌肽负载量成正比。
肌肽结合透明质酸是一种由L-肌肽(beta-丙氨酰-L-组氨酸,一种具有抗氧化特性的天然二肽)和透明质酸(一种糖胺聚糖聚合物)共价结合而成的生物缀合物。这种缀合增强了两种成分的抗氧化能力和抗酶降解能力,使其可用于生物医学应用,例如伤口愈合、组织工程以及治疗类风湿性关节炎和骨关节炎等炎症性疾病。
生物活性&实验参考方法
靶点
Carnosine conjugated hyaluronate targets reactive oxygen species (ROS) and reactive carbonyl species (RCS) due to carnosine's antioxidant activity. It also interacts with CD44 receptors (the primary receptor for hyaluronic acid) on cell surfaces, facilitating targeted delivery to sites of inflammation and tissue injury. The copper(II) complexes of this conjugate behave as superoxide dismutase (SOD) mimics, further enhancing antioxidant defense.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,肌肽-透明质酸复合物的抗氧化性能显著优于其单一组分。它能保护细胞免受氧化应激损伤,降低炎症标志物水平,并刺激炎症细胞模型中Nrf2的转位和抗氧化反应。该复合物还具有抗聚集和金属结合能力,这些特性也有助于其发挥细胞保护作用。在正常生理条件下,该复合物不具有细胞毒性。
体内研究 (In Vivo)
本研究采用肌肽-透明质酸复合纱布敷料,在创伤性皮肤损伤模型中对肌肽-透明质酸复合体进行了体内评估。结果表明,该复合体具有保湿、免疫调节、抗炎和抗氧化活性,能够增强上皮化和促进伤口愈合。其愈合机制包括促进角质形成细胞迁移和减少伤口部位的氧化损伤。
酶活实验
不直接对缀合物本身进行酶/受体结合试验。而是通过DPPH自由基清除、ABTS脱色和FRAP试验来测定抗氧化活性。SOD模拟活性通过在黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶存在下抑制硝基蓝四唑(NBT)还原来评估。透明质酸-肌肽缀合物的铜(II)配合物则使用焦棓酚自氧化试验来检测其SOD样活性。
细胞实验
细胞实验采用炎症细胞模型,例如 RAW 264.7 巨噬细胞或人软骨细胞。将细胞用缀合物(0.1-100 ug/mL)处理 12-48 小时,然后用脂多糖 (LPS) 刺激以诱导炎症。活性氧 (ROS) 水平通过 DCFH-DA 荧光法测定。Nrf2 转位通过免疫荧光显微镜检测。培养上清液中 TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的水平通过 ELISA 法测定。细胞活力通过 MTT 法评估。
动物实验
在啮齿动物皮肤伤口愈合模型中进行体内评估。将具有全层切除伤口的大鼠或小鼠每日局部敷用浸有肌肽-透明质酸偶联物(通常为0.1-1% w/w)的纱布。每2-3天测量一次伤口面积,并在第7、14和21天采集组织进行组织学分析(苏木精-伊红染色、马松三色染色)以及CD31(血管生成)和α-SMA(肌成纤维细胞分化)的免疫组织化学染色。
药代性质 (ADME/PK)
由于含有透明质酸成分,肌肽偶联透明质酸钠具有水溶性。用于偶联的透明质酸分子量通常为10-200 kDa,肌肽负载量为10-30% (w/w)。该偶联物在4℃的PBS缓冲液(pH 7.4)中可稳定保存长达1个月。对于局部用药制剂,可将其加入水凝胶或薄纱敷料中。目前尚无详细的药代动力学参数;预计该偶联物主要分布于用药部位,全身吸收极少。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
基于其在临床前伤口愈合模型中的应用以及两种母体化合物的生物相容性,肌肽-透明质酸偶联物被认为具有低毒性。在局部应用浓度下,未见明显的细胞毒性或不良反应报道。该化合物的研究级产品不适用于人体。处理粉末或溶液时,应遵循标准的实验室安全预防措施。
参考文献

[1]. Hyaluronan-carnosine conjugates inhibit Aβ aggregation and toxicity. Sci Rep. 2020 Sep 29;10(1):15998.

其他信息
肌肽-透明质酸偶联物是一种仅供研究使用的生物偶联物,专为生物医学应用而开发。肌肽(β-丙氨酰-L-组氨酸)是一种天然存在的二肽,在肌肉和脑组织中含量丰富,以其抗氧化、抗糖化和金属螯合特性而闻名。透明质酸是细胞外基质的主要成分。二者的共价偶联旨在提高两种分子的稳定性和功效。该生物偶联物尚未进入临床试验或获得任何适应症的监管批准,但目前正在探索其在伤口愈合和骨关节炎治疗方面的应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子量
600000(Average)
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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