| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HIV-1 reverse transcriptase (RT). EFdA-TP binds to the active site of HIV‑1 RT and incorporates into the growing viral DNA chain, causing chain termination either immediately (ICT) or after the incorporation of a few additional nucleotides (DCT).
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| 体外研究 (In Vitro) |
EFdA-TP 四锂盐（0.05-10 μM；作用时间 15 分钟）作为 ICT 或 DCT 抑制剂抑制逆转录酶 (RT) 催化的 DNA 合成[1]。EFdA-TP 四锂盐可作为易位缺陷型 RT 抑制剂阻断 RT，从而显著减缓 DNA 合成，起到事实上的直接链终止剂的作用[1]。EFdA-TP 四锂盐也可作为延迟链终止剂，允许在阻断 DNA 合成之前掺入额外的 dNTP[1]。
在无细胞检测中，EFdA-TP (0.05-10 uM) 可作为有效的免疫复合物抑制剂 (ICT) 或直接复合物抑制剂 (DCT) 抑制逆转录酶 (RT) 催化的 DNA 合成。它通过多种机制抑制 HIV-1 RT。它对多种 HIV-1 分离株具有强效抗病毒活性，包括对其他核苷类逆转录酶抑制剂 (NRTI) 耐药的毒株。其 EC50 值在低纳摩尔范围内。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，EFdA-TP是前药EFdA的活性细胞内代谢产物。由于其三磷酸形式带负电荷且无法穿透细胞膜，因此通常不直接给药。然而，当作为前药给药时，活性EFdA-TP会在细胞内生成，并能有效抑制HIV-1的复制。
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| 酶活实验 |
一种用于评估逆转录酶抑制的通用无细胞方案：将重组 HIV-1 逆转录酶与合成的 RNA/DNA 引物/模板、dNTP 和不同浓度的 EFdA-TP 孵育。反应在 37℃ 下进行 15-60 分钟。通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) 分离延伸产物，并通过磷成像定量链终止程度。根据抑制曲线计算 IC50 值。
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| 细胞实验 |
评估抗病毒活性的一般细胞实验方案：将MT-4细胞（人T淋巴细胞）感染HIV-1。然后将细胞与一种可转化为EFdA-TP的前药或直接与EFdA-TP（使用转染试剂）孵育。5-7天后，通过p24抗原捕获ELISA或细胞病变效应（CPE）减少试验检测病毒复制情况，并计算EC50值。
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| 动物实验 |
生成 EFdA-TP 的前药的一般动物实验方案：将人源化小鼠（例如，hu-PBMC-NSG 小鼠）感染 HIV-1。每日一次口服给予小鼠 EFdA 前药，剂量分别为 1、5 和 25 mg/kg。定期通过 qRT-PCR 检测血浆病毒 RNA。研究结束时，采用 LC-MS/MS 检测外周血单核细胞 (PBMC) 中活性 EFdA-TP 的浓度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
EFdA前药的一般药代动力学方案：典型的大鼠药代动力学研究包括口服（PO，10 mg/kg）和静脉注射（IV，2 mg/kg）给药。在24小时内采集血样。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定血浆中前药的浓度，同时测定外周血单核细胞（PBMC）裂解液中活性代谢产物EFdA-TP的浓度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
EFdA-TP 的一般毒性试验方案：本试验将评估 EFdA 前药（而非三磷酸盐）的毒性。将在大鼠中进行为期 28 天的重复给药口服毒性研究，剂量分别为 10、30 和 100 mg/kg/天。标准评估指标包括临床症状、体重、食物消耗量、血液学指标（重点关注网织红细胞和血小板计数）、血清生化指标和组织病理学指标。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4'-乙炔基-2-氟-2'-脱氧腺苷 (EFdA) 是一种核苷类似物。与已获批准的用于治疗人类免疫缺陷病毒1型 (HIV-1) 的核苷类逆转录酶抑制剂不同，EFdA 具有3'-OH基团，并且对野生型和耐药型HIV均表现出显著的活性。EFdA三磷酸 (EFdA-TP) 在核苷类逆转录酶抑制剂中独树一帜，因为它通过多种机制抑制HIV-1逆转录酶 (RT)。(a) EFdA-TP 可以作为一种易位缺陷型RT抑制剂，阻断RT，从而显著减缓DNA合成，有效地起到即时链终止剂的作用。虽然未易位的EFdA-MP终止的引物可以被解除阻断，但它们可以有效地转化回EFdA-MP终止的形式。 (b) EFdA-TP 可作为延迟链终止剂，允许在阻断 DNA 合成之前掺入额外的 dNTP。在这种情况下，EFdA-MP 终止的引物不会被切除。(c) EFdA-MP 可被逆转录酶高效错配并掺入，使得错配引物极难延伸，并且同样不会被切除。模板序列的背景决定了每种机制的相对贡献，并影响 EFdA-MP 对潜在掺入位点的亲和力，这部分解释了 EFdA 和替诺福韦之间缺乏拮抗作用的原因。EFdA-MP 掺入前核苷酸类型的改变可使其抑制机制从延迟链终止剂转变为即时链终止剂。EFdA 通过多种机制抑制 HIV 复制的多功能性可能解释了为何对 EFdA 产生耐药性更为困难。
EFdA-TP四锂是一种强效的HIV-1逆转录酶抑制剂。它与其他核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）不同，因为它通过多种机制抑制逆转录酶，包括作为即时和延迟链终止剂。四锂盐形式提高了其溶解度和稳定性，有利于生化研究。其母体化合物EFdA是一种在研抗HIV药物。这种活性三磷酸盐是研究HIV-1复制和耐药机制的关键工具。 |
| 分子式 |
C12H14FLI4N5O12P3
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| 分子量 |
559.95
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ≥ 100 mg/mL (178.59 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7859 mL | 8.9294 mL | 17.8587 mL | |
| 5 mM | 0.3572 mL | 1.7859 mL | 3.5717 mL | |
| 10 mM | 0.1786 mL | 0.8929 mL | 1.7859 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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