| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
WRN (Werner syndrome RecQ helicase). WRN inhibitor 8 targets the helicase domain of WRN, inhibiting its ATP‑dependent 3′→5′ DNA unwinding activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞酶活性测定中，WRN抑制剂8能有效抑制WRN的解旋酶活性。在细胞活性测定中，它能选择性地诱导MSI-H癌细胞系（如HCT116、LoVo和DLD-1 MSI）的DNA损伤（γH2AX灶）和细胞死亡，而对MSS细胞（如HT-29和SW480）或正常细胞的影响极小。现有数据中未提供具体的IC₅0值。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，WRN抑制剂8在MSI-H异种移植小鼠模型（包括结直肠癌和子宫内膜癌PDX模型）中表现出选择性抗肿瘤活性。WRN抑制可导致复制叉崩溃和双链断裂，证实WRN是MSI-H肿瘤的一个有前景的治疗靶点。已观察到剂量依赖性的肿瘤生长抑制和消退。
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| 酶活实验 |
一种用于评估 WRN 解旋酶抑制的通用无细胞方案：采用基于荧光的 DNA 解旋测定法，具体方法参见 VVD-214 的描述（参见 V88650 的第 5 项）。将重组 WRN 蛋白 (10-50 nM) 与荧光标记的叉状 DNA 底物 (50 nM) 在解旋酶缓冲液（25 mM Tris-HCl，pH 7.5，2 mM MgCl2，2 mM ATP，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mg/mL BSA）中孵育，并加入不同浓度的 WRN 抑制剂 8 (0.1 nM 至 10 uM)。加入 ATP 启动反应，并在 37℃ 下孵育 30-60 分钟。最后加入 20 mM EDTA 和 0.5% SDS 终止反应。测量荧光强度的增加（激发波长 485 nm，发射波长 528 nm）。计算解旋酶抑制的 IC₅0 值。为了进行选择性分析，测试了 WRN 抑制剂 8 对其他 RecQ 解旋酶（BLM、RecQ1、RecQ5）和其他 ATP 酶的抑制活性。
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| 细胞实验 |
WRN抑制剂8的一般细胞实验方案：将MSI高表达的结直肠癌细胞（例如HCT116、LoVo）和MSS正常对照细胞（例如HT-29、SW480）以5,000-10,000个细胞/孔的密度接种于96孔板中。用WRN抑制剂8的系列稀释液（0.01 nM至10 uM）处理细胞72-120小时。使用CellTiter-Glo试剂盒检测细胞活力。计算选择性指数（IC₅0 MSS / IC₅0 MSI）。为评估DNA损伤，将细胞处理24-48小时后固定，并用抗γH2AX（Ser139）抗体染色。通过免疫荧光显微镜或高内涵成像定量每个细胞核内的γH2AX灶数。细胞周期分析采用碘化丙啶染色和流式细胞术进行。细胞凋亡评估采用Annexin V/PI染色和流式细胞术进行。
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| 动物实验 |
WRN抑制剂8的一般动物实验方案：将5×10⁶个HCT116 MSI-高表达结直肠癌细胞或其他MSI-H PDX模型（例如子宫内膜癌PDX）皮下植入雌性NOD/SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到约150-200 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。将WRN抑制剂8配制成合适的溶剂（例如10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45%生理盐水），通过灌胃或腹腔注射给药，剂量分别为10、30和100 mg/kg，每日一次或两次，持续21-28天。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积。研究结束时，对小鼠实施安乐死，并收集肿瘤进行 IHC（γH2AX、Ki-67、裂解 caspase-3）、Western blot（γH2AX、裂解 PARP）和 TUNEL 染色。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
WRN抑制剂8的通用药代动力学方案：雄性Sprague-Dawley大鼠分别经口灌胃（PO，10 mg/kg）和静脉注射（IV，2 mg/kg）给药。分别于0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、12和24小时采集血样。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量分析血浆药物浓度。计算药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t½、清除率、分布容积和口服生物利用度）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
WRN抑制剂8的一般毒性试验方案：在ICR小鼠中进行为期14天的重复给药口服毒性研究。WRN抑制剂8通过灌胃给药，剂量分别为10、30和100 mg/kg/天，连续14天。试验参数包括临床症状、体重、食物消耗量、血液学指标（全血细胞计数、血小板计数、分类计数）、血清生化指标（ALT、AST、BUN、肌酐）以及主要器官（骨髓、胃肠道、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、心脏）的组织病理学检查。特别关注骨髓（评估潜在的骨髓抑制）和胃肠道（评估复制应激相关毒性）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
WRN抑制剂8的CAS号为3026502-95-1。该化合物属于一类新型合成致死剂，靶向MSI-H肿瘤中的WRN解旋酶。这种合成致死策略基于以下原理：两个基因同时失活会导致细胞死亡，而单个基因的缺失则允许细胞存活。在DNA错配修复（dMMR）缺陷的MSI-H肿瘤中，WRN具有合成致死性。WRN抑制剂的治疗潜力正被积极探索，有望成为治疗对免疫检查点阻断或其他疗法耐药的MSI-H癌症的一种新型精准肿瘤学策略。WRN抑制剂8是一种用于临床前研究的化学探针。现有数据中未提供其具体分子结构。
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| 分子式 |
C22H23F2N3O4S
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|---|---|
| 分子量 |
463.50
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| 精确质量 |
463.138
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| CAS号 |
3026502-95-1
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| PubChem CID |
170718255
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
107
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
802
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CS(=O)(=O)/C=C/[C@H](C1CC1)NC(=O)C2=CN=C(N=C2OC3=CC=CC=C3)C(C4CC4)(F)F
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| InChi Key |
SGERSEZXZIVUEY-IENJSVCTSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H23F2N3O4S/c1-32(29,30)12-11-18(14-7-8-14)26-19(28)17-13-25-21(22(23,24)15-9-10-15)27-20(17)31-16-5-3-2-4-6-16/h2-6,11-15,18H,7-10H2,1H3,(H,26,28)/b12-11+/t18-/m1/s1
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| 化学名 |
2-[cyclopropyl(difluoro)methyl]-N-[(E,1S)-1-cyclopropyl-3-methylsulfonylprop-2-enyl]-4-phenoxypyrimidine-5-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1575 mL | 10.7875 mL | 21.5750 mL | |
| 5 mM | 0.4315 mL | 2.1575 mL | 4.3150 mL | |
| 10 mM | 0.2157 mL | 1.0787 mL | 2.1575 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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