| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10g |
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| 50g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Integrins (cell surface receptors that mediate cell-extracellular matrix adhesion). Type III collagen interacts with integrins to regulate cellular functions such as adhesion, migration, proliferation, and differentiation. The specific integrin subtypes that bind to rhCOLIII include alpha1beta1, alpha2beta1, alpha10beta1, and alpha11beta1.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明,重组人源化III型胶原蛋白(rhCOLIII)可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。该蛋白能够促进皮肤细胞外基质(ECM)再生,并通过提供支持细胞生长和迁移的天然支架来改善细胞微环境。现有数据中未提供其抑制癌细胞增殖的特异性IC₅0值。
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| 体内研究 (In Vivo) |
重组人源化III型胶原蛋白(rhCOLIII)在体内的主要活性是促进伤口愈合和皮肤再生。在动物皮肤伤口模型中,rhCOLIII的应用可加速伤口闭合,增加肉芽组织形成,并促进上皮再生。该蛋白在乳腺癌异种移植模型中也具有抗肿瘤作用,可抑制肿瘤生长、迁移和侵袭。
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| 酶活实验 |
一种用于评估整合素结合的通用无细胞方案:采用固相结合试验。将重组整合素蛋白(例如,α1β1 或 α2β1,10 ug/mL,溶于 50 mM Tris-HCl,pH 7.4,150 mM NaCl,1 mM MnCl2)包被于 96 孔微孔板,4℃ 过夜。用 3% BSA 的 PBS 溶液封闭孔板 2 小时。向孔中加入不同浓度(0.1、0.5、1、5、10、20、50、100 ug/mL)的重组人源化 III 型胶原蛋白 (rhCOLIII),室温孵育 2 小时。使用辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的抗 III 型胶原蛋白抗体检测结合的胶原蛋白,随后加入 TMB 底物。在 450 nm 波长处测量吸光度。整合素-胶原蛋白相互作用的解离常数 (Kd) 由饱和结合曲线计算得出。在竞争性实验中,将固定浓度的 rhCOLIII (10 ug/mL) 与不同浓度的可溶性整合素 (0.1-100 ug/mL) 或抗整合素阻断抗体一起孵育。
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| 细胞实验 |
评估rhCOLIII对乳腺癌细胞影响的一般细胞实验方案:将人乳腺癌细胞系(例如MDA-MB-231、MCF-7或4T1细胞)以5000个细胞/孔的密度接种于96孔板中,培养基为含10% FBS的DMEM。24小时后,用不同浓度的rhCOLIII(10、25、50、100、200 ug/mL)处理细胞24、48和72小时。采用MTT法检测细胞活力。增殖实验中,将细胞与BrdU孵育2小时,并通过ELISA法检测BrdU掺入量。迁移和侵袭实验采用孔径为8 um的Transwell小室。迁移实验中,将1×10⁵个细胞悬浮于无血清DMEM培养基中置于上室。下室含有含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基作为趋化因子。在上下室中均加入重组人胶原蛋白III(rhCOLIII)(50、100、200 ug/mL)。对于侵袭实验,上室涂覆Matrigel基质胶(50 uL,1 mg/mL)。24小时后,去除膜上表面的细胞,并将膜下表面的细胞固定、结晶紫染色后计数。
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| 动物实验 |
评估伤口愈合效果的通用动物实验方案:使用雌性Sprague-Dawley大鼠(200-250 g)。将动物麻醉后,剃除背部毛发。使用无菌剪刀和镊子在背部制作一个全层切除伤口(1.5 cm × 1.5 cm)。将重组人源化III型胶原蛋白配制成无菌PBS溶液(浓度分别为1、5和10 mg/mL)或水凝胶。将受试物(100 μL溶液或水凝胶贴片)每日一次局部涂抹于伤口部位,持续14天。实验设置溶剂对照组(PBS)和阳性对照组(例如,市售伤口敷料)。分别于第0、3、5、7、10和14天通过描绘伤口边缘测量伤口面积,并计算伤口闭合百分比。第14天,将大鼠安乐死,并切除伤口组织。一部分组织用10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片,并进行苏木精-伊红染色和马松三色染色,用于组织病理学检查,以评估再上皮化、肉芽组织形成和胶原沉积情况。另一部分组织用于羟脯氨酸测定(胶原含量的标志物)。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
通用的药代动力学方案不适用于蛋白质。重组人源化III型胶原蛋白是一种大分子蛋白(80-100 kDa),不适用于全身吸收。局部应用时,预计该蛋白会停留在应用部位并局部降解。如果静脉给药,则会被肝脏和肾脏迅速清除。评估降解的通用方案:将该蛋白在模拟伤口渗出液或含有蛋白酶(例如胶原酶、MMP-1、MMP-8、MMP-13)的溶液中于37℃孵育。在不同时间点,通过SDS-PAGE和Western blot分析降解产物。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
局部用药的一般毒性试验方案:根据OECD 404号指南,对兔子进行皮肤刺激/腐蚀试验。将约0.5克重组人源化III型胶原蛋白(凝胶或溶液)涂抹于三只兔子背部完整和擦伤皮肤的一小块区域(约1平方厘米)。用纱布覆盖涂抹部位,并用无刺激性胶带固定。暴露4小时后,移除纱布并清洁皮肤。分别在移除纱布后1、24、48和72小时检查皮肤红斑和水肿情况。静脉给药的一般全身毒性试验方案:对小鼠进行单剂量毒性研究。重组人源化III型胶原蛋白以50、150和500 mg/kg的剂量通过静脉注射给药。观察动物14天,记录其临床症状。观察期结束后,对动物实施安乐死,并进行尸检。采集主要器官进行组织病理学检查。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
重组人源化III型胶原蛋白(80-100kDa)是一种在微生物表达系统中生产的重组人源化III型胶原蛋白。经SDS-PAGE测定,其表观分子量为80-100 kDa。该蛋白可溶于水,形成澄清溶液。等电点为6.59。本产品以无菌冻干粉末形式供应。重组人源化III型胶原蛋白具有多种生物学功能,包括促进皮肤细胞外基质再生、改善细胞微环境、抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,以及通过与整合素相互作用参与细胞黏附、迁移、增殖和分化。它是一种研究级蛋白,适用于细胞培养、组织工程和癌症研究。
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。