| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
plant growth modulator[1]
Brassinolide-d5 functions as a plant hormone through binding to its specific receptor, BRASSINOSTEROID INSENSITIVE 1 (BRI1), a leucine-rich repeat receptor-like kinase (LRR-RLK) located on the plant cell surface. Upon binding, BRI1 dimerizes with its co-receptor BAK1 (BRI1-ASSOCIATED RECEPTOR KINASE 1), triggering a phosphorylation cascade that activates the transcription factors BES1 and BZR1 (via dephosphorylation by protein phosphatase 2A). These transcription factors then translocate to the nucleus and regulate the expression of genes involved in cell elongation, division, differentiation, vascular development, stress responses, and photomorphogenesis. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
油菜素内酯是一种植物甾醇，最初是从油菜（Brassica napus L.）花粉中分离得到的。油菜素内酯能够以时间和浓度依赖的方式诱导PC-3细胞的细胞毒性。流式细胞术、荧光显微镜和透射电镜分析表明，细胞死亡方式主要为凋亡。油菜素内酯处理后，Caspase-3活性显著升高。Western blot实验表明，油菜素内酯处理可导致抗凋亡蛋白Bcl-2表达随时间推移而降低，提示油菜素内酯可通过诱导细胞凋亡发挥对PC-3细胞的细胞毒性作用。因此，油菜素内酯可能是一种有前景的前列腺癌治疗候选药物[1]。油菜素内酯是一种植物生长调节剂，本研究旨在探讨其对人T淋巴母细胞系CCRF-VCR 1000（通过逐步添加长春新碱(VCR)从敏感的CCRF-CEM细胞中获得）多药耐药(MDR)的影响，并初步探究其逆转耐药机制。结果表明，在0.001-10 μg/mL浓度下，油菜素内酯处理后，CCRF-VCR的耐药性部分逆转，逆转倍数分别为4.4-11.6。耐药细胞中罗丹明123的胞内积累显著降低。油菜素内酯处理后，罗丹明123的积累增加，荧光染料的水平介于耐药细胞和敏感细胞之间。三组细胞中拓扑异构酶II的催化活性均未发生改变。耐药细胞中p53蛋白的表达水平高于敏感细胞。油菜素内酯处理后，CCRF-VCR细胞中p53的表达恢复至敏感细胞的水平。油菜素内酯可通过抑制P-葡糖蛋白转运的药物外流，有效逆转CCRF-VCR细胞的耐药性。下调p53的异常表达可能是油菜素内酯逆转多药耐药性的机制之一[2]。氢、碳和其他元素的稳定重同位素已被引入药物分子中，主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。氘代因其可能影响药物的药代动力学和代谢特征而备受关注[3]。
体外实验表明，未标记的油菜素内酯在纳摩尔至皮摩尔浓度下即可在植物生物测定中表现出高生物活性。水稻叶片倾斜度测定（EC50 ~0.1-1 nM）和豆类第二节间伸长测定是检测油菜素甾醇活性的标准方法。油菜素内酯-d5通常不用于这些生物测定，而是用于研究油菜素甾醇的代谢和信号传导。在植物细胞培养中，油菜素内酯（1-100 nM）可诱导细胞伸长、促进细胞分裂，并激活油菜素甾醇响应基因（如SAUR-AC1、TCH4和EXPANSIN）的表达。由于动力学同位素效应极小，氘代类似物在受体水平上与未标记的油菜素内酯具有相同的活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在植物体内，未标记的油菜素内酯调控多种生长发育过程，包括茎和根的伸长、维管分化、叶片扩展、衰老、开花、胁迫耐受性和光形态建成。在拟南芥中，油菜素内酯缺陷突变体（例如 det2、dwf4、cpd、bri1）表现出矮化、叶片深绿色卷曲、开花延迟和生育力降低，这些症状可通过外源施用油菜素内酯（0.1-10 nM，喷洒或施用于培养基）来挽救。油菜素内酯-d5 用作示踪剂，用于研究油菜素内酯的生物合成、运输、代谢和信号传导，而非作为生长调节剂本身。在动物系统中，高浓度（≥1 uM）的油菜素内酯对 PC-3 人前列腺癌细胞表现出浓度和时间依赖性的细胞毒性。
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| 酶活实验 |
目前尚无标准化的油菜素内酯-d5受体结合实验方案。对于BRI1受体结合实验：在昆虫细胞或大肠杆菌中表达重组BRI1胞外结构域（BRI1-ECD）。将BRI1-ECD与[3H]-油菜素内酯（1-10 nM）在结合缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.5，100 mM NaCl，0.1% CHAPS，1 mM EDTA，1 mM DTT）中于4℃孵育1-2小时。加入浓度递增的未标记油菜素内酯（0.1 nM至10 uM）进行竞争性结合。通过凝胶过滤或聚乙二醇（PEG）沉淀分离结合的和游离的放射性配体。通过闪烁计数法测量放射性。对于油菜素内酯-d5的结合研究，它可以用作低浓度示踪剂或定量分析的内标。 BRI1激酶活性测定：将BRI1重组蛋白与ATP（10 uM）和油菜素内酯（1-100 nM）孵育。通过抗磷酸苏氨酸/酪氨酸Western blot检测自磷酸化，或通过偶联酶法测定ADP生成量。
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| 细胞实验 |
目前尚无专门使用油菜素内酯-d5的植物细胞实验方案。标准油菜素内酯生物测定方法如下：水稻（Oryza sativa L. cv. “Kasalath”）叶片倾斜度生物测定：从8-10日龄的黄化水稻幼苗中切取第二片叶鞘，切成5毫米长的片段，放入含有油菜素内酯（0.001-10 nM，溶于0.01%乙醇）的24孔板中，漂浮于水面。在30℃黑暗条件下培养2-3天。测量叶片与叶鞘之间的角度。基因表达研究：用1-100 nM的油菜素内酯处理7-10日龄的拟南芥幼苗1-6小时。提取总RNA，反转录为cDNA，并进行qPCR检测油菜素甾醇响应标记基因（SAUR-AC1、TCH4、EXP8、CPD、DWF4）。油菜素内酯-d5并非这些检测的测试化合物；它用作内标，用于定量内源性油菜素甾醇水平或用于示踪研究。
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| 动物实验 |
对于使用油菜素内酯-d5进行油菜素甾醇代谢/示踪研究：用油菜素内酯-d5（10-100 nM，溶于0.01%乙醇/吐温20溶液）处理2-4周龄的拟南芥植株或8-10日龄的水稻幼苗，可通过叶面喷施或根部施用。或者，使用微量注射器（0.5-2 μL，1-10 μM溶液）将溶液施用于叶腋或顶端分生组织。分别在0.5、1、2、6、12、24和48小时收获植物组织（叶片、叶鞘、根、花序）。用冷甲醇：氯仿：水（4:2:1）混合液匀浆。如有需要，可添加额外的油菜素内酯-d5作为内标。采用固相萃取（C18柱）和/或免疫亲和柱纯化提取物。使用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行多反应监测（MRM）分析。定量母体油菜素内酯-d5，并根据特征质量偏移检测氘代代谢物（例如，6-脱氧油菜素内酯、芸苔甾酮、3-表油菜素内酯）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无专门针对油菜素内酯-d5的药代动力学数据。植物中未标记的油菜素内酯：可通过叶片和根系快速吸收（数分钟至数小时）。其转运途径包括木质部和韧皮部。在拟南芥中，由于羟基化、糖基化、磺化和侧链裂解等快速代谢途径，油菜素内酯的半衰期约为2-8小时。主要分解代谢途径包括C-6氧化、C-23羟基化和C-2/C-3差向异构化。氘标记稳定，不会与环境发生交换。在动物中（油菜素内酯并非激素，但可能具有抗癌活性），尚未发表相关的药代动力学研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无针对油菜素内酯-d5的专门毒性数据。未标记的油菜素内酯对动物的毒性极低。大鼠急性经口LD50 > 2000 mg/kg。亚慢性研究中，剂量高达100 mg/kg/天时未见明显毒性。油菜素甾醇尚未在人体临床试验中进行评估。在某些植物中，高浓度（≥1 μM）的油菜素内酯可能产生植物毒性，导致叶片下垂、生长抑制和黄化。在动物细胞系（PC-3人前列腺癌细胞）中，浓度≥10 μM的油菜素内酯可诱导细胞凋亡和G2/M期细胞周期阻滞，但全身不太可能达到如此高的浓度。油菜素内酯-d5仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
油菜素内酯-d5 是一种仅供研究使用的稳定同位素标记化合物，未获准用于诊断、治疗或农业用途，也未作为生长调节剂。它尚未经过临床试验评估。其主要用途是作为示踪剂/内标，通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 研究油菜素甾醇的生物合成、代谢、信号传导和转运，具体包括：(1) 油菜素甾醇代谢途径的代谢通量分析；(2) 植物（如拟南芥、水稻、番茄等）内源油菜素甾醇水平的定量；(3) 新的油菜素甾醇代谢物的鉴定和表征；(4) 油菜素甾醇生物合成酶（例如 DWF4、CPD、ROT3）的酶活性测定；(5) 油菜素甾醇信号传导机制研究（BRI1-BAK1 相互作用）。油菜素甾醇是第六类植物激素。
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| 分子式 |
C28H43D5O6
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|---|---|
| 分子量 |
485.71
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 别名 |
Brassin lactone-d5
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0588 mL | 10.2942 mL | 20.5884 mL | |
| 5 mM | 0.4118 mL | 2.0588 mL | 4.1177 mL | |
| 10 mM | 0.2059 mL | 1.0294 mL | 2.0588 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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