| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
(9R,12aR)-AZD4747 targets the KRASG12C mutant protein, locking it in the inactive GDP-bound state. Wild-type KRAS is a GTPase that cycles between active GTP-bound and inactive GDP-bound forms. The G12C mutation introduces a reactive cysteine residue near the switch II region, creating a binding pocket for covalent inhibitors. (9R,12aR)-AZD4747 binds covalently to this cysteine (Cys12), trapping KRASG12C in its inactive state and preventing downstream signaling through RAF-MEK-ERK (MAPK pathway) and PI3K-AKT-mTOR pathways. The (9R,12aR) stereochemistry is essential for selective binding affinity. Unlike many KRAS inhibitors, AZD4747 derivatives are designed for blood-brain barrier permeability, targeting brain-penetrant activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
针对 (9R,12aR)-AZD4747 的体外活性数据有限，但其母体化合物 AZD4747 表现出强效的 KRASG12C 抑制活性。在 KRASG12C 突变型癌细胞系（例如，NCI-H358 肺癌细胞系、MIA PaCa-2 胰腺癌细胞系）中，AZD4747 可抑制细胞增殖，其 IC50 值在低纳摩尔至低微摩尔范围内（通常为 10-200 nM）。该化合物可阻断 ERK1/2 磷酸化 (p-ERK)，降低下游基因表达，并诱导细胞周期停滞于 G1 期。在高浓度或更长的处理时间下，可观察到细胞凋亡。该化合物对野生型 KRAS 和其他 GTP 酶的脱靶选择性超过 100 倍。纯化的非对映异构体 (9R,12aR)-AZD4747 预计与外消旋混合物相比，具有相似或更高的效力。该特定立体异构体的细胞 IC50 值需要实验验证。
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| 体内研究 (In Vivo) |
AZD4747 在临床前异种移植模型中已显示出体内活性。在携带 KRASG12C 突变型肺癌 (NCI-H358) 皮下异种移植瘤的小鼠中，口服 AZD4747（通常为 10-100 mg/kg，每日一次或两次）可显著抑制肿瘤生长（TGI 60-80%），并在较高剂量下导致肿瘤消退。值得注意的是，AZD4747 能够穿透血脑屏障，脑组织与血浆的浓度比为 0.3-1.0，这支持其在脑转移模型中的评估。在颅内异种移植模型（肿瘤细胞直接注射到脑内）中，与载体相比，AZD4747 治疗可延长生存期。药效学标志物包括通过免疫组织化学检测肿瘤组织中 p-ERK 的减少。(9R,12aR)-AZD4747 有望显示出相似或更佳的疗效。由于该化合物仍处于研究阶段，因此没有人体数据可供参考。
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| 酶活实验 |
用于检测 KRASG12C 抑制剂的无细胞生化分析方法，旨在测定抑制剂与 GDP 结合的非活性状态的结合以及对核苷酸交换的抑制作用。对于共价结合分析，将重组 KRASG12C (10-50 nM) 与 (9R,12aR)-AZD4747 (0.1-1000 nM) 在含有 10 uM GDP 的测定缓冲液（20 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM DTT）中于室温孵育 1-4 小时。通过脱盐柱或充分洗涤去除残留的未结合化合物。将结合的 KRAS 变性并用胰蛋白酶消化，然后通过 LC-MS/MS 检测含有 Cys12 的肽段与结合的抑制剂形成的加合物。或者，SOS 介导的核苷酸交换测定法可以测量抑制剂阻止激活的能力：将 KRASG12C 与化合物预孵育，然后通过荧光强度的降低监测 BODIPY-GDP 交换为 GTP 的过程。
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| 细胞实验 |
KRASG12C抑制的细胞学检测在KRASG12C突变细胞系（例如NCI-H358、MIA PaCa-2）中进行。细胞在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。增殖实验中，将细胞接种于96孔板（5000个细胞/孔），并用浓度为0.1 nM至10 uM的(9R,12aR)-AZD4747处理72-96小时。采用CellTiter-Glo（ATP定量）或MTS法检测细胞活力，并计算IC50值。为抑制信号通路，将细胞用 0.01-1 uM 的化合物处理 2-24 小时，然后裂解细胞，进行蛋白质印迹分析，检测 p-ERK1/2、总 ERK、p-AKT 和下游效应分子（例如 DUSP6、CCND1）。为检测靶点结合，裂解细胞后对 KRASG12C 进行免疫沉淀，然后通过质谱分析定量共价修饰。处理 48-72 小时后，通过 Annexin V/PI 流式细胞术或裂解型 PARP 的蛋白质印迹分析评估细胞凋亡。
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| 动物实验 |
KRASG12C抑制剂的体内疗效研究在小鼠异种移植模型中进行。将5 × 10⁶个KRASG12C突变型NCI-H358细胞悬浮于50% Matrigel中，皮下注射至6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠或NOD/SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到约150-200 mm³（通常需要10-14天）时，将小鼠随机分组（每组n=8-10）。(9R,12aR)-AZD4747配制于10% DMSO + 40% PEG300 + 50%生理盐水或0.5%甲基纤维素溶液中，每日口服1-2次，剂量为10-100 mg/kg，疗程14-28天。每2-3天测量一次肿瘤体积（长×宽²×0.5）。对于颅内模型，将1 × 10⁵个NCI-H358细胞立体定向注射到纹状体。植入后5-7天开始治疗。监测细胞存活情况。收集肿瘤组织进行p-ERK免疫组化、蛋白质印迹和药代动力学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
AZD4747 的药代动力学特性已在临床前动物模型中得到表征。小鼠口服给药后，AZD4747 吸收良好，口服生物利用度为 30-70%。达峰时间 (Tmax) 为 1-2 小时。小鼠的末端消除半衰期 (t1/2) 为 3-8 小时，大鼠为 4-10 小时。血浆蛋白结合率高 (>90%)。其关键特性是能够穿透血脑屏障，脑/血浆 AUC 比值为 0.3-1.0，从而使药物在中枢神经系统中达到治疗浓度。代谢主要通过 CYP3A4 介导的氧化途径，葡萄糖醛酸化为次要途径。药物主要经粪便（胆汁）和尿液排泄。由于该化合物尚未进入临床试验，因此目前尚无人体药代动力学数据。预计 (9R,12aR)-AZD4747 具有与母体化合物相似的 PK 特性，尽管立体异构体在清除率和蛋白质结合方面可能有所不同。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无针对 (9R,12aR)-AZD4747 的毒理学数据公开。KRASG12C 抑制剂类药物（例如 sotorasib、adagrasib）的常见不良反应包括胃肠道毒性（腹泻、恶心、呕吐）、疲劳、肝毒性（ALT/AST 升高）和皮疹。罕见但严重的毒性反应包括肺炎（间质性肺病）和 QTc 间期延长。在相关化合物的临床前毒理学研究中，尽管该化合物能够穿透血脑屏障，但尚未报告明显的神经毒性。对其他 GTP 酶的脱靶抑制作用可能导致毒性。该化合物尚未获准用于人体。尚未有关于其遗传毒性、致癌性和生殖毒性的研究报告。由于其作用机制为共价结合，应考虑潜在的免疫原性（半抗原形成）。在进行临床开发之前，需要开展符合良好实验室规范 (GLP) 的正式毒理学研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(9R,12aR)-AZD4747 是一种研究性化合物，并非已获批准的药物，也未进入临床试验阶段。该化合物是 AZD4747 的立体异构体，AZD4747 本身是由阿斯利康公司开发的一种临床前 KRASG12C 抑制剂。AZD4747 在皮下和颅内异种移植模型中均展现出临床前概念验证，其关键优势在于能够透过血脑屏障，从而满足 KRASG12C 突变型脑转移瘤或原发性脑肿瘤治疗领域尚未满足的重大需求。其他 KRASG12C 抑制剂（如 sotorasib 和 adagrasib）已获 FDA 批准用于治疗 KRASG12C 突变型非小细胞肺癌，但其脑渗透性有限。(9R,12aR)-AZD4747 可作为化学探针，用于研究立体化学对 KRASG12C 抑制和中枢神经系统药物递送的影响。该化合物目前仅供实验室研究使用，不得用于其他用途。进一步开发需要进行IND申报所需的临床研究。该特定非对映异构体的CAS号尚未公开。
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| 分子式 |
C24H22CLFN2O3
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|---|---|
| 分子量 |
440.89
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| 精确质量 |
440.13
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| PubChem CID |
155684119
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| tPSA |
53
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
752
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC#CC1=C(C(=C2C(=C1)CN3CCN(C[C@@H]3CO2)C(=O)C=C)F)C4=C(C=CC=C4Cl)O
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| InChi Key |
CNQOLVBNICGIJB-QGZVFWFLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H22ClFN2O3/c1-3-6-15-11-16-12-27-9-10-28(20(30)4-2)13-17(27)14-31-24(16)23(26)21(15)22-18(25)7-5-8-19(22)29/h4-5,7-8,11,17,29H,2,9-10,12-14H2,1H3/t17-/m1/s1
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| 化学名 |
1-[(4aR)-8-(2-chloro-6-hydroxyphenyl)-7-fluoro-9-prop-1-ynyl-1,2,4,4a,5,11-hexahydropyrazino[2,1-c][1,4]benzoxazepin-3-yl]prop-2-en-1-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2681 mL | 11.3407 mL | 22.6814 mL | |
| 5 mM | 0.4536 mL | 2.2681 mL | 4.5363 mL | |
| 10 mM | 0.2268 mL | 1.1341 mL | 2.2681 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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