| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
QSY 21 NHS targets primary amine groups (‑NH2) on lysine residues and the N‑terminus of peptides and proteins. The NHS ester group reacts efficiently at pH 7-9 to form covalent amide bonds. Once conjugated to a biomolecule, QSY 21 serves as a FRET acceptor, quenching the fluorescence of donor fluorophores such as Alexa Fluor 488, fluorescein, or other green‑emitting dyes when in close proximity (typically 1-10 nm).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外,QSY 21 NHS 可用于生成标记生物分子,用于基于 FRET 的检测。它可以与肽、抗体或寡核苷酸偶联,构建 FRET 探针。常见应用包括蛋白酶活性检测(例如,半胱天冬酶、基质金属蛋白酶)、受体二聚化研究以及用于核酸检测的分子信标检测。猝灭效率可通过供体荧光强度的降低来衡量。当与含有蛋白酶可切割序列的肽偶联时,蛋白水解切割会将 QSY 21 受体与供体荧光团分离,从而恢复供体荧光。
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| 体内研究 (In Vivo) |
由于其高分子量和疏水性,QSY 21 NHS 除非与靶向基团偶联,否则不适用于体内动物实验。当与抗体或其他靶向蛋白偶联时,它可以作为可激活探针的一部分,用于活细胞成像或小动物荧光成像。在这些应用中,探针在到达靶位点(例如肿瘤)之前保持荧光猝灭状态,到达靶位点后,蛋白水解酶的切割会激活其荧光。此类偶联物通常以 1-10 mg/kg 的典型抗体剂量进行静脉注射。
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| 酶活实验 |
NHS酯标记效率通常通过测量模型蛋白的标记度(DOL)来评估。将牛血清白蛋白(BSA,10 mg/mL,溶于0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.5)与10倍摩尔过量的QSY 21 NHS(溶于DMSO,最终浓度1-5%)在室温下轻柔振荡孵育1小时。未结合的染料通过尺寸排阻色谱(例如Sephadex G-25)或透析去除。DOL根据染料最大吸收波长(通常在600-650 nm附近,具体数值请参考制造商提供)和蛋白质浓度(通过BCA或Bradford法测定)并利用比尔-朗伯定律计算得出。
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| 细胞实验 |
将细胞置于含有 QSY 21 标记探针的培养基中,在 37°C 下孵育不同时间(0.5-24 小时),以研究其摄取、定位和激活情况。对于活细胞成像,将细胞接种于玻璃底培养皿中,并与 1-100 nM 的标记探针孵育。使用配备相应供体荧光团滤光片组(例如,488 nm 激发,520 nm 发射)的共聚焦显微镜或荧光显微镜监测荧光。可通过与内体标记物(例如,LysoTracker、Rab5)共染色来评估内吞作用。使用 MTT 法评估细胞活力,以确保所用浓度的标记探针不具有细胞毒性。
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| 动物实验 |
对于体内成像,将QSY 21标记的探针以1-10 mg/kg的剂量通过尾静脉注射给小鼠。动物麻醉后,使用荧光成像系统(例如IVIS Spectrum)在多个时间点(注射后1、4、8、24和48小时)进行成像。实验结束时,处死动物,并取出主要器官(肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺脏)进行离体成像,以评估生物分布。当蛋白水解激活荧光时,计算信号强度相对于基线的倍数增加。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
QSY 21 NHS 通常储存在 -20°C 的干燥避光环境中。NHS 酯类染料对水分敏感,在水溶液中会迅速水解。进行偶联时,应在使用前立即将染料溶解于无水 DMSO 中。储备液(DMSO 溶液,浓度为 10-20 mM)在干燥条件下可在 -20°C 保存长达 1 个月。与蛋白质偶联后,标记的偶联物应储存在含有防腐剂(例如 0.02% 叠氮化钠)的缓冲液中,并避光保存于 4°C,以防止光漂白。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
QSY 21 NHS 是一种研究用化学品,而非药物;因此,其毒性数据尚未标准化。该染料应被视为潜在刺激物。避免吸入、皮肤接触和眼睛接触;穿戴适当的个人防护装备(实验服、手套、护目镜)。处理固体染料或 DMSO 储备溶液时,请在通风橱内操作。虽然 NHS 酯可能与皮肤或呼吸道蛋白质上的胺基发生反应,但其急性毒性较低。该化合物未被国际癌症研究机构 (IARC) 或美国国家毒理学计划 (NTP) 列为致癌物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
QSY 21 NHS 并非药物,也未获准用于人体治疗。它是一种生化分析试剂,仅用于研究用途,尤其适用于基于 FRET 的生物分子相互作用、蛋白酶活性和邻近性研究等分析。本产品仅供研究使用,不得用于诊断或治疗用途。QSY 染料家族包含多种具有不同吸收光谱的猝灭剂,以匹配不同的供体荧光团。QSY 21 经过优化,可猝灭 Alexa Fluor 488 和荧光素等绿色荧光染料。该化合物可从专业的生化试剂供应商处购买,产品目录号例如 A10479(Thermo Fisher)及类似名称。
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| 分子式 |
C45H39CLN4O7S
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|---|---|
| 分子量 |
815.33
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| 精确质量 |
814.223
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| CAS号 |
304014-13-9
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| PubChem CID |
162310014
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| 外观&性状 |
Purple to purplish red solid powder
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| 熔点 |
>200℃
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
58
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| 分子复杂度/Complexity |
1790
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CN(CCC1C(=O)ON2C(=O)CCC2=O)S(=O)(=O)C3=CC=CC=C3C4=C5C=CC(=[N+]6CCC7=CC=CC=C76)C=C5OC8=C4C=CC(=C8)N9CCC1=CC=CC=C19.[Cl-]
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2265 mL | 6.1325 mL | 12.2650 mL | |
| 5 mM | 0.2453 mL | 1.2265 mL | 2.4530 mL | |
| 10 mM | 0.1226 mL | 0.6132 mL | 1.2265 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。