| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fazirsiran targets the alpha-1 antitrypsin (AAT) and Z-AAT messenger RNA (mRNA) transcripts. Upon administration, the N-acetylgalactosamine (GalNAc) moiety of fazirsiran binds with high affinity and specificity to asialoglycoprotein receptors (ASGPRs) that are abundantly expressed on the surface of hepatocytes. Following receptor-mediated endocytosis, the siRNA component is released into the cytoplasm where it incorporates into the RNA-induced silencing complex (RISC). The siRNA then binds to complementary sequences on AAT and Z-AAT mRNA through RNA interference (RNAi) mechanisms, leading to sequence-specific degradation of the target mRNA and inhibition of translation. This reduces synthesis of the misfolded Z-AAT protein, allowing the liver to clear previously accumulated Z-AAT protein aggregates. The ultimate biological targets are the SERPINA1 gene transcripts, and the reduction of Z-AAT is believed to decrease hepatic inflammation and fibrosis, thereby addressing the underlying cause of AATD-associated liver disease.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外研究表明，法齐西兰能有效降低肝细胞系中AAT和Z-AAT的mRNA和蛋白水平。该siRNA组分对其靶序列具有高度特异性，脱靶效应极小。使用Huh7等人肝癌细胞系或原代人肝细胞，法齐西兰处理可导致AAT mRNA水平呈剂量依赖性降低（通过定量PCR (qPCR) 检测）和AAT蛋白分泌减少（通过ELISA检测）。GalNAc偶联增强了肝细胞特异性摄取，细胞摄取研究表明，在表达ASGPR的细胞中，GalNAc偶联的siRNA的内化率显著高于未偶联的siRNA。体外效力测定表明，法齐西兰在纳摩尔浓度下即可实现70-90%的靶mRNA敲低。该化合物在治疗相关浓度下对肝细胞无细胞毒性，MTT 或 ATP 检测显示细胞活力维持在 90% 以上。细胞表型的功能恢复包括细胞内 Z-AAT 聚集体减少和内质网 (ER) 应激标志物降低。
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| 体内研究 (In Vivo) |
动物模型体内研究和临床试验表明，法齐西兰能有效降低血清和肝脏中Z-AAT的浓度。在利用表达人Z-AAT的转基因小鼠模型进行的临床前研究中，皮下注射法齐西兰可显著降低肝脏中Z-AAT mRNA和蛋白水平，且呈剂量依赖性。在II期SEQUOIA临床试验（AROAAT2001）中，患有纯合子ZZ AATD相关肝病的患者接受了多次皮下注射法齐西兰。一年后的结果显示，Z-AAT血清浓度持续呈剂量依赖性降低，组织学检查结果也显著改善，包括PAS+D染色球状物负荷降低，而PAS+D染色球状物负荷是AATD相关肝病的标志性特征。随访研究表明，肝纤维化评分有所改善，肝细胞损伤标志物也减少。 RNAi介导的基因敲低效果持久，单次给药后可持续数周。在II期开放标签扩展研究中，持续治疗维持了Z-AAT水平的降低和组织学改善。这些发现支持法齐西兰作为AATD相关肝病疾病修饰疗法的潜力。
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| 酶活实验 |
对于体外酶/受体结合研究，进行ASGPR结合亲和力测定以确认靶向特异性。将人ASGPR (hASGPR)蛋白固定在传感器芯片上。将不同浓度的法齐尔西兰（或其GalNAc部分）流过芯片，并通过表面等离子共振(SPR)测量结合动力学（结合速率常数ka，解离速率常数kd）。计算平衡解离常数(Kd)。或者，使用放射性标记的GalNAc或去唾液酸糖蛋白(ASOR)作为示踪剂进行竞争性结合测定。对于RNAi机制研究，进行RNA诱导沉默复合物(RISC)加载测定。将肝细胞胞质裂解液与模拟法齐尔西兰siRNA的生物素标记双链RNA孵育。采用链霉亲和素下拉法，并通过蛋白质印迹法检测相关的AGO2蛋白（RISC的核心组分）。对于核酸酶稳定性测定，将法齐尔西兰与人血清或肝匀浆在37℃下孵育。在不同时间点（0、1、2、4、8、24、48小时）取样，并通过高效液相色谱（HPLC）或液相色谱-质谱联用（LC-MS）定量完整的siRNA，以确定该化合物在生物基质中的半衰期。
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| 细胞实验 |
在体外细胞实验中，将人肝癌细胞系（例如 Huh7、HepG2）或原代人肝细胞以每孔 100,000-200,000 个细胞的密度接种于 6 孔板或 96 孔板中，培养基为添加了 10% FBS 的适宜培养基。细胞培养 24-48 小时，直至汇合度达到 60-80%。向培养基中加入浓度范围为 0.1 nM 至 1000 nM 的法齐西兰。在摄取研究中，将细胞与荧光标记的法齐西兰（例如 Cy3 标记）孵育 1-24 小时，并通过共聚焦显微镜观察细胞荧光，并通过流式细胞术进行定量分析。使用过量的游离 GalNAc 或 ASOR 进行竞争性实验，以验证 ASGPR 介导的摄取。为评估基因敲低效果，将细胞用法齐西兰处理48-72小时。提取总RNA，进行逆转录，并使用TaqMan或SYBR Green法通过qPCR检测AAT mRNA水平。收集培养上清液，通过ELISA检测分泌的AAT蛋白。为评估毒性，在处理72小时后，使用CellTiter-Glo或MTT法检测细胞活力。为检测内质网应激标志物，通过Western blotting分析细胞裂解液中的BiP (GRP78)、CHOP和剪接型XBP1。通过caspase-3/7活性或Annexin V-PI染色评估细胞凋亡。
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| 动物实验 |
在体内动物实验中，使用Z-AAT转基因小鼠模型（例如，表达人Z-AAT的PiZ小鼠）。小鼠（8-12周龄，20-30克）饲养于标准条件下，可自由摄取食物和水。Fazirsiran溶于PBS或生理盐水中，通过皮下注射给药，剂量范围为1至30 mg/kg。在剂量反应研究中，小鼠接受单次注射，并在不同时间点（第1、3、7、14、21、28、56天）处死。在多剂量研究中，每周或每月注射一次，持续4-12周。研究结束时，处死动物，并通过心脏穿刺采集血液以分离血清。采集肝组织，称重后分成若干份，分别用于RNA提取（液氮速冻）、蛋白质分析（RIPA缓冲液匀浆）和组织学检查（10%福尔马林固定）。采用qPCR法检测AAT mRNA水平。采用ELISA法定量血清和肝匀浆中的Z-AAT蛋白水平。肝组织切片经PAS+D染色以观察球状物负荷，并经H&E染色进行炎症和纤维化的组织学评分。纤维化程度采用天狼星红染色评估，并通过图像分析进行定量。在药代动力学研究中，分别于给药后0、2、4、8、24、48、72、168、336和672小时采集血样，并采用杂交ELISA或LC-MS法测定血浆siRNA浓度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
法齐西兰的药代动力学研究已在临床前动物模型中完成，目前正在进行临床试验。在啮齿动物和非人灵长类动物皮下注射后，法齐西兰被迅速吸收，血浆峰浓度（Cmax）在1-4小时内达到（Tmax）。GalNAc 缀合物增强了药物在肝脏的特异性分布，大部分给药剂量通过 ASGPR 介导的摄取在肝细胞中蓄积。该化合物在动物和人体内均表现出较长的消除半衰期（t½），为数天至数周，这是稳定寡核苷酸的典型特征。动物研究表明，其在肝组织中的半衰期为7至21天，支持较低的给药间隔（例如，每月或每季度）。血浆暴露量与剂量呈正比增加。血浆蛋白结合率高，通常>90%。法齐西兰的代谢主要通过核酸酶从末端依次缩短siRNA链来实现；不涉及细胞色素P450介导的代谢。其主要排泄途径是经尿液以降解的寡核苷酸片段形式排出，少量经粪便排出。该化合物并非CYP450同工酶的底物、抑制剂或诱导剂，提示其药物相互作用的可能性较低。目前正在进行一项针对肝功能受损患者的I期临床研究，以评估肝功能是否会影响法齐西兰的药代动力学。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
法齐西兰的毒理学特征已在临床前动物模型中进行了评估，目前正在进行的临床试验中监测。在啮齿动物和非人灵长类动物的重复给药毒性研究中，皮下注射剂量高达 30 mg/kg/周的法齐西兰总体耐受性良好。主要发现是，在高剂量下，肝酶（ALT、AST）呈剂量依赖性可逆性升高，这反映了药物靶点的结合，而非肝毒性。未观察到对肾功能、血液学或主要器官组织病理学的显著不良反应。在 I 期和 II 期临床试验（包括 SEQUOIA 研究）中，法齐西兰显示出可接受的安全性和耐受性。报告的最常见不良事件为轻度至中度注射部位反应（红斑、疼痛、肿胀）、疲劳和头痛。已发表的临床数据中未报告与法齐西兰相关的严重不良事件。未观察到脱靶RNAi效应或免疫介导反应（例如补体激活）的证据。良好的安全性归因于ASGPR介导的肝细胞特异性靶向作用，该作用可将药物集中于目标器官，同时最大限度地减少全身暴露。目前正在进行3期开放标签扩展研究，以评估其长期安全性。与所有寡核苷酸疗法一样，治疗期间会监测肾功能，但迄今为止尚未报告肾毒性。已知对任何成分过敏的患者禁用该化合物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Fazirsiran 是一种正在研发中的 RNA 干扰 (RNAi) 疗法，用于治疗 α-1 抗胰蛋白酶缺乏症 (AATD) 相关肝病。AATD 是一种罕见的遗传性疾病，由 SERPINA1 基因突变引起，最常见的是 Z 突变，导致错误折叠的 Z-AAT 蛋白产生，并在肝细胞中积聚，引起炎症、纤维化、肝硬化，并增加肝细胞癌的风险。Fazirsiran 旨在降解野生型 AAT 和 Z-AAT mRNA，从而减少 Z-AAT 蛋白的合成，并使肝脏能够清除已有的蛋白聚集体。该化合物由胆固醇偶联的 RNAi 触发剂和蜂毒肽衍生的肽组成，后者与 N-乙酰半乳糖胺 (NAG) 偶联，NAG 作为赋形剂以促进内体逃逸。 GalNAc部分靶向肝细胞上的去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR），实现肝脏特异性递送。Fazirsiran由Arrowhead Pharmaceuticals与武田制药合作开发。该化合物已获得FDA快速通道资格，用于治疗AATD相关肝病。II期临床试验（SEQUOIA，NCT03945292）显示，Z-AAT水平呈剂量依赖性降低，肝脏组织学得到改善。目前正在进行III期临床试验（包括一项长期开放标签扩展试验），以验证其安全性和有效性。Fazirsiran尚未在任何国家获准上市。一项I期研究（NCT06165341）正在比较肝功能正常患者与轻度、中度或重度肝功能损害患者的Fazirsiran药代动力学。如果获得批准，Fazirsiran将成为首个专门用于治疗AATD相关肝病的RNAi疗法。
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| 分子式 |
C493H610F11N163NA43O312P43S6
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| 分子量 |
16532.90
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| CAS号 |
2175009-09-1
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 别名 |
ARO-AAT sodium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.0605 mL | 0.3024 mL | 0.6049 mL | |
| 5 mM | 0.0121 mL | 0.0605 mL | 0.1210 mL | |
| 10 mM | 0.0060 mL | 0.0302 mL | 0.0605 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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