Copper Fluor-4

别名: CF4
目录号: V91154 纯度: ≥98%
Copper Fluor-4 是一种基于对甲酚染料支架的 Cu+ 特异性荧光探针。
Copper Fluor-4 CAS号: 2365532-64-3
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
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产品描述
Copper Fluor-4 是一种基于对甲酚染料骨架的 Cu+ 特异性荧光探针。Copper Fluor-4 对铜具有很高的选择性,尤其相对于锌和铁,以及细胞内丰富的碱金属和碱土金属。Copper Fluor-4 在生理相关的 pH 值范围 6 至 8 内稳定(激发波长:488 nm)。
Copper Fluor-4 (CF4;CAS:2365532-64-3;C38H47F3N2O5S4,分子量 749.05) 是一种基于罗丹醇染料骨架的 Cu+(亚铜)特异性荧光探针。它能够可逆且选择性地结合铜(I)离子,而对锌、铁以及其他细胞内丰富的碱金属和碱土金属等其他金属的结合能力较弱。该探针具有极高的铜亲和力,Kd 值为 2.9 × 10-¹3 M。它可用于细胞和组织中活性铜池的成像研究,并已被证明在结肠癌研究中具有应用价值。
生物活性&实验参考方法
靶点
The molecular target of Copper Fluor-4 is the Cu+ (cuprous) ion. The probe is designed with a synthetic receptor that has a high selectivity and affinity for Cu+. Upon binding to Cu+, the fluorescence of the probe is quenched or turned on (typically a "turn-off" response for Cu+). The binding is reversible, allowing it to monitor dynamic changes in Cu+ concentration. This selectivity is a key feature that distinguishes it from other metal ions.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,铜荧光探针 Copper Fluor-4 与 Cu+ 结合会导致其荧光发射发生变化。该探针可用于测定溶液中的铜浓度。在比色皿中,向探针溶液中加入 Cu+ 会导致荧光强度降低。其他金属离子,例如 Zn2+ 或 Fe2+,不会引起显著变化,证实了其选择性。该特性使其可用于定量分析化学或生物样品中的 Cu+。
体内研究 (In Vivo)
在体内实验中,Copper Fluor-4 已被证明可用于结肠癌的研究。它可用于成像活细胞和组织中活性铜的分布和浓度。其高亲和力使其能够检测生理浓度的铜。这对于理解铜在包括癌症在内的各种疾病中的作用至关重要,因为癌症中铜的水平通常失调。该探针本身不具有任何治疗作用。
酶活实验
铜荧光-4对Cu⁺的特异性和亲和力可通过荧光光谱法在比色皿中测定。将探针溶解于合适的缓冲液(例如,HEPES,pH 7.2)中。在罗丹醇染料的最佳激发波长下进行荧光扫描。滴加Cu⁺源(例如,[Cu(CH3CN)4]PF₆),并记录荧光强度的降低。通过拟合结合曲线计算Kd值。通过添加不同浓度的其他金属离子(例如,ZnCl2、FeSO4、CaCl2、MgCl2)并测量荧光变化来评估选择性。
细胞实验
对于细胞成像,将细胞(例如癌细胞)接种于玻璃底培养皿中。将 Copper Fluor-4 溶解于 DMSO 中,配制成 1-10 mM 的储备液。将培养基替换为含有探针的培养基,使探针的最终浓度达到 0.5-5 uM(通常添加 Pluronic F-127 以提高溶解度)。将细胞在 37℃ 下孵育 30-60 分钟,然后洗涤。使用共聚焦显微镜进行活细胞成像,以观察探针的分布(从而确定 Cu+ 的相对浓度)。为了验证特异性,可以用铜螯合剂(例如 BCS)预处理细胞以降低荧光信号。
动物实验
对于体内成像,可将探针注射到动物模型(例如小鼠)中。通常,将探针溶解于水溶性共溶剂(例如,5% DMSO、30% PEG-400 和 65% 生理盐水)中,使其浓度达到 0.1-1 mg/mL。通过静脉(尾静脉)或腹腔注射给药,剂量为 0.5-2 mg/kg。经过一段时间(例如 30-60 分钟)后,使用配备适用于该荧光染料的滤光片组的 IVIS 系统对动物进行成像。研究结束时,处死动物,并收集组织进行离体分析。
药代性质 (ADME/PK)
目前尚无具体的药代动力学数据。铜氟-4的分子量为749.05。它具有中等亲脂性,预计可透过细胞膜。它可溶于DMSO和DMF。粉末应避光保存于4℃或-20℃。DMSO储备液应在-80℃下保存,最长可达6个月。缓冲液中的溶液可能由于水解作用而稳定性较差。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚无具体的毒理学数据。铜氟-4是一种研究用探针,尚未经过广泛的毒性测试。应将其视为潜在的健康危害物进行处理。请遵循标准的实验室安全预防措施。使用通风橱,佩戴手套、实验服和护目镜。避免吸入和皮肤接触。该化合物仅供研究使用,不得用于人类或兽医用途。
参考文献

[1]. Copper regulates rest-activity cycles through the locus coeruleus-norepinephrine system. Nat Chem Biol. 2018 Jul;14(7):655-663.

其他信息
Copper Fluor-4 (CF4) 是一种基于罗丹醇骨架的 Cu+ 特异性荧光探针。它是一种研究工具,对铜(I)具有极高的亲和力和选择性(Kd = 2.9 × 10-13 M),远高于其他金属。CF4 已被用于生物系统中铜的成像,包括结肠癌的研究。该化合物并非药物,目前尚无获批的治疗或临床用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C38H47F3N2O2S4
分子量
749.05
CAS号
2365532-64-3
外观&性状
Solid powder
密度
1.29±0.1 g/cm3(Predicted)
沸点
848.7±65.0 °C(Predicted)
LogP
0
别名
CF4
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : 125 mg/mL (166.88 mM; with sonication)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.3350 mL 6.6751 mL 13.3502 mL
5 mM 0.2670 mL 1.3350 mL 2.6700 mL
10 mM 0.1335 mL 0.6675 mL 1.3350 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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