规格 | 价格 | |
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500mg | ||
1g | ||
Other Sizes |
体外研究 (In Vitro) |
Protocol I. 蛋白制备 1) 为了达到最佳标记效果,请将蛋白(抗体)制备成2 mg/mL的浓度。 2) 蛋白溶液的pH值为8.5±0.5,若pH低于8.0需用1M碳酸氢钠进行调节。 3) 如果蛋白浓度低于2 mg/mL,标记效率会大大降低。 为了达到最佳标记效率,建议的最终蛋白浓度范围为2-10 mg/mL。 4) 蛋白必须处于不含一级胺(如Tris或甘氨酸)和铵离子的缓冲液中,否则会影响标记效率。 2. 染料制备(以CY3-NHS酯为例) 将无水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,配制成10 mM原液。通过移液或涡旋混合均匀。 3. 染料用量的计算 反应所需CY3-NHS酯的量取决于需标记蛋白的量,最佳CY3-NHS酯与蛋白的摩尔比约为10。 例如:假设需标记蛋白为500 μL 2 mg/mL IgG(MW=150,000),用100 μL DMSO溶解1 mg CY3-NHS酯,则所需CY3-NHS酯的体积为5.05 μL。具体计算过程如下: 1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol 2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol 3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯) 4.进行偶联反应 1)慢慢加入适量新鲜配制的10 mg/mL CY3-NHS 酯加入到溶液中的0.5 mL蛋白样品中,轻轻振摇混匀,然后短暂离心,将样品收集到反应管底部。请勿混合,以免蛋白样品变性。 2) 将反应管放在暗处,室温下轻轻孵育60分钟。10-15分钟后,轻轻逆转反应 5. 纯化结合物 以下方案是使用SepHadex G-25柱纯化染料-蛋白结合物的示例。br/> 1) 根据制造商的说明准备SepHadex G-25柱。 2) 将反应混合物(来自“运行结合反应”)上样到SepHadex G-25柱的顶部。 3) 一旦样品运行到顶部树脂表面以下,立即添加PBS(pH 7.2-7.4)。 4) 向所需样品中添加更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成柱纯化。汇集含有所需染料 - 蛋白质结合物的级分。
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参考文献 |
分子式 |
C34H40BF4N3O4
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分子量 |
641.50
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精确质量 |
641.304
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CAS号 |
2632339-91-2
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PubChem CID |
164577367
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外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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tPSA |
69.9
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氢键供体(HBD)数目 |
0
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氢键受体(HBA)数目 |
9
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可旋转键数目(RBC) |
10
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重原子数目 |
46
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分子复杂度/Complexity |
1120
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定义原子立体中心数目 |
0
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InChi Key |
STPLGCDKSHGEBA-UHFFFAOYSA-M
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InChi Code |
InChI=1S/C34H40N3O4.BF3.FH/c1-33(2)24-14-8-10-16-26(24)35(5)28(33)18-13-19-29-34(3,4)25-15-9-11-17-27(25)36(29)23-12-6-7-20-32(40)41-37-30(38)21-22-31(37)39;2-1(3)4;/h8-11,13-19H,6-7,12,20-23H2,1-5H3;;1H/q+1;;/p-1
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化学名 |
(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3,3-dimethyl-2-[3-(1,3,3-trimethylindol-1-ium-2-yl)prop-2-enylidene]indol-1-yl]hexanoate;trifluoroborane;fluoride
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.5588 mL | 7.7942 mL | 15.5885 mL | |
5 mM | 0.3118 mL | 1.5588 mL | 3.1177 mL | |
10 mM | 0.1559 mL | 0.7794 mL | 1.5588 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。