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Mito-FerroGreen

别名: Mitochondrial iron probe 线粒体铁离子探针
目录号: V91695 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Mito-FerroGreen 是一种线粒体特异性亚铁离子检测探针，激发波长为 488nm。
Mito-FerroGreen 产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
50μg
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产品描述
Mito-FerroGreen 是一种线粒体特异性亚铁离子检测探针，激发波长为 488nm。
研究证实，铁是生物体中含量最丰富的过渡金属元素。它参与各种生理活动。近年来，细胞内游离铁离子因其高反应性和与细胞损伤和死亡的关联而受到越来越多的关注。游离铁离子以稳定的Fe2+和Fe3+的形式存在于细胞内。考虑到细胞内的还原环境、金属转运蛋白和Fe2+的水溶性，人们认为揭示Fe2+在细胞内的行为比Fe3+更重要。Mito FerroGreen是一种新型荧光探针，用于检测线粒体（铁硫簇和血红素蛋白合成的位点）中的亚铁离子Fe2+。Mito FerroGreen和Fe2+反应后荧光强度的增加是不可逆的，这与可以实时监测钙离子的Fluo-3等荧光探针不同。
生物活性&实验参考方法
靶点
Mitochondria
体外研究 (In Vitro)
作为临床心血管疾病治疗的基石之一，他汀类药物具有广泛的应用。然而，常用的他汀类药物有副作用，尤其是肌肉相关症状（SAMS），如肌肉无力、疼痛、痉挛和严重的横纹肌溶解症。这种不良的肌肉作用是他汀类药物不依从和/或停药的主要原因之一，导致不良心血管后果。此外，肌肉细胞损伤的潜在机制尚不清楚。在这里，我们发现铁下垂是一种程序性铁依赖性细胞死亡，是他汀类药物诱导的肌病的一种机制。在包括阿托伐他汀、洛伐他汀、瑞舒伐他汀和普伐他汀在内的四种候选药物中，只有阿托伐他汀会导致人心肌细胞（HCM）和小鼠骨骼肌细胞（C2C12）的铁下垂，而不是人脐静脉内皮细胞（HUVEC）。阿托伐他汀以剂量依赖的方式抑制HCM和C2C12细胞活力，同时显著增加细胞内铁离子、活性氧（ROS）和脂质过氧化。一项值得注意的研究发现，这些改变尤其发生在线粒体中，并导致线粒体功能障碍。阿托伐他汀干预期间心肌损伤的生物标志物显著增加。然而，上述所有增强都可以被铁下垂抑制剂抑制。从机制上讲，GSH耗竭和核因子红系2相关因子2（Nrf2）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPx4）和xCT胱氨酸谷氨酸逆向转运蛋白（主要成分是SLC7A11）的减少参与了阿托伐他汀诱导的肌肉细胞铁下垂和损伤。线粒体介导的铁下垂信号中GPx4的下调可能是其核心。总之，我们的研究结果探索了阿托伐他汀诱导肌病的一种创新的潜在病理生理机制，并强调靶向铁下垂是一种临床应用的保护策略[1]。
酶活实验
应用实例:
1.线粒体定位
为确认Mito-FerroGreen是否能够特异性地在线粒体内定位，将其与线粒体染色试剂（MitoBright Deep Red※）一同进行染色，实验结果证实了Mito-FerroGreen选择性地在线粒体内染色。
向HeLa细胞中添加5μmol/ l的Mito-FerroGreen和200 nmol/l的线粒体染色探针MitoBright Deep Red，并在CO2培养箱中孵育30分钟，然后添加100μmol/ l的硫酸铁铵（II），并将混合后的细胞液在CO2培养箱中培养1小时后通过观察荧光。
Mito-FerroGreen
激发波长：488 nm
发射波长：500-565 nm
MitoBright Deep Red
激发波长：640 nm
发射波长：656-700 nm
2.线粒体内的铁离子荧光成像
在含有血清的MEM培养基中接种HeLa细胞，并加入Mito-FerroGreen，通过荧光检测HeLa细胞中线粒体内的二价铁。而在添加了铁离子的HeLa细胞中，观测到了Mito-FerroGreen的荧光明显增强。在添加了铁螯合剂的细胞中，几乎未观测到Mito-FerroGreen的荧光。 以这种方式，证实了线粒体中铁含量的差异和荧光强度的差异是具有相关性的。
3.对二价铁离子的高选择性和高信号
向1ml 50mmol/l HEPES Buffer（pH7.4）中加入2μl 1mol/l Mito-FroGreen、2μl 10mmol/l各种金属以及20μl 1mg/ml酯化酶，在室温下反应1小时后测定荧光强度。
激发波长：500 nm
发射波长：535 nm
4.适用于通用滤光片
Mito-FerroGreen的激发波长为488nm，最大激发波长为505nm。
向3ml 50 mmol/l HEPES Buffer (pH7.4) 中加入 6μl 1mol/l Mito-FroGreen、6μl 10mmol/l硫酸铵铁（Ⅱ）以及20μl 1mg/ml酯化酶。在37℃下反应1小时后检测荧光强度。
激发波长：500 nm
发射波长：535 nm
细胞实验
分别采用FerroOrange和Mito-FerroGreen探针评估细胞内和线粒体铁含量。将HCM和C2C12细胞接种到24孔板中，单独暴露于浓度为40uM的阿托伐他汀或其他处理24小时。之后，用FerroOrange（1μM）或Mito-FerroGreen（5μM）探针以及Hoechst 33342（5μg/ml）对细胞进行染色。在避光剂孵育30分钟后，用Leica SP8共聚焦荧光显微镜对细胞进行评估[1]。
参考文献

[1]. Atorvastatin Induces Mitochondria-Dependent Ferroptosis via the Modulation of Nrf2-xCT/GPx4 Axis. Front Cell Dev Biol. 2022 Mar 3:10:806081.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
外观&性状
Solid powder
别名
Mitochondrial iron probe
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
This product is soluble in acetonitrile, methanol, and dimethyl alcohol.
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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