Poly-L-ornithine hydrochloride (MW 15000-30000)

别名: L-Ornithine homopolymer hydrochloride (MW 15000-30000)
目录号: V92336 纯度: ≥98%
聚-L-鸟氨酸(盐酸盐)(MW 15000-30000)(L-鸟氨酸均聚物(盐酸盐)(MW 15000-30000))是一种生化试剂,可用作生命科学研究相关的生物材料或有机化合物。
Poly-L-ornithine hydrochloride (MW 15000-30000) CAS号: 26982-21-8
产品类别: Biochemical Assay Reagents
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产品描述
聚L-鸟氨酸(盐酸盐)(分子量15000-30000)(L-鸟氨酸均聚物(盐酸盐)(分子量15000-30000))是一种生化试剂,可用作与生命科学研究相关的生物材料或有机化合物。
聚L-鸟氨酸盐酸盐(分子量15000-30000)是一种由碱性氨基酸L-鸟氨酸衍生的聚阳离子合成氨基酸聚合物,分子量范围为15000-30000 Da,CAS号为26982-21-8。它是一种广泛应用于生命科学研究的生化试剂,可用作生物材料或有机化合物。由于其具有高正电荷密度,它易于与带负电荷的分子和细胞表面形成稳定的聚电解质复合物。在组织培养中,它常被用作细胞培养基质,涂覆于塑料或玻璃表面,以增强多种细胞类型(尤其是神经细胞)的黏附、生长和分化。此外,据报道它还能促进亲水性大分子药物的鼻腔吸收。
生物活性&实验参考方法
靶点
Poly-L-ornithine hydrochloride does not target a specific pharmacological receptor. Instead, its primary mechanism of action is physicochemical, mediated by strong electrostatic interactions with negatively charged species on cell surfaces, such as heparan sulfate proteoglycans. In the context of neural cell culture, it has been shown to activate the Erk1/2 signaling pathway, which is necessary for its effects on promoting neural cell differentiation and myelin repair. As a substrate analog of acetyl-poly-L-lysine, it has been used to study substrate binding and catalysis of the NAD-dependent protein deacetylase Hst2 in non-cellular assays. It is also a potential absorption enhancer for the nasal delivery of hydrophilic macromolecular drugs.
体外研究 (In Vitro)
聚L-鸟氨酸盐酸盐的体外活性主要体现在其促进细胞黏附和分化的能力上。它被推荐用作细胞培养基质,标准操作流程为:使用0.5 mL浓度为0.1 mg/mL的溶液涂覆25 cm2的培养表面。它已成功用于神经细胞的黏附以及神经细胞分化和增殖的研究。在功能研究中,包括聚L-鸟氨酸在内的碱性聚氨基酸已被证明能引起强效的舒张反应,在相关的生物制剂中,其EC50值范围为3×10-⁹至2×10-⁷ M,且分子量与舒张效力之间存在直接相关性。
体内研究 (In Vivo)
在体内,聚左旋鸟氨酸盐酸盐已在局灶性脱髓鞘动物模型中进行了测试,以评估其髓鞘修复能力。当注射到溶血卵磷脂诱导的脱髓鞘小鼠模型中时,该化合物增强了髓鞘再生并促进了运动功能的恢复。这些神经再生作用与 Erk1/2 信号通路的激活有关。除了神经系统应用外,据报道,该化合物还能增强同时给药的大分子药物经鼻上皮的吸收,这表明其在动物模型中可能作为药物吸收促进剂发挥作用。目前尚未报道其具有其他已确立的体内治疗活性。
酶活实验
聚-L-鸟氨酸盐酸盐通常不用于传统的无细胞酶/受体结合实验。然而,它已被用作底物类似物,用于研究蛋白质脱乙酰酶。以酵母NAD依赖性蛋白质脱乙酰酶Hst2为例,其典型实验方案如下:(1)配制反应混合物,其中包含纯化的Hst2酶、合适的缓冲液(例如,50 mM Tris-HCl,pH 8.0)和辅因子NAD+。(2)加入不同浓度的乙酰化聚-L-鸟氨酸盐酸盐作为乙酰化底物。(3)将反应在37℃下孵育指定时间(例如,30-60分钟)。(4)加入三氯乙酸(TCA)至终浓度为5%以终止反应。(5)如果使用放射性标记底物,则使用液体闪烁计数法定量释放的[3H]-乙酸盐;否则,使用其他分析方法。该聚合物可作为这些酶的非特异性聚阳离子底物。
细胞实验
聚L-鸟氨酸盐酸盐的标准体外细胞实验用途是作为细胞培养基质,促进细胞黏附。典型实验步骤如下:(1)配制浓度为1 mg/mL的聚L-鸟氨酸盐酸盐储备液,溶剂为无菌硼酸盐缓冲液(pH 8.5)或去离子水。(2)将储备液用无菌磷酸盐缓冲液(PBS)或水稀释至0.1 mg/mL的工作浓度。(3)将稀释后的溶液加入培养皿中,确保完全覆盖培养皿表面。使用0.5 mL浓度为0.1 mg/mL的溶液可覆盖25 cm2的表面。(4)将涂覆后的培养皿置于37℃培养至少1小时,或在4℃培养过夜。(5)吸出涂覆液,并用无菌水或PBS冲洗培养皿表面至少两次,以去除多余的聚合物。 (6)将涂覆后的容器置于无菌操作台中风干,或立即使用。(7)将细胞(例如,原代神经元、星形胶质细胞或神经细胞系)接种于涂覆表面,并置于合适的培养基中。随后可通过显微镜观察细胞的黏附、铺展和分化情况,并采用标准方法进行检测。
动物实验
评估聚左旋鸟氨酸盐酸盐神经再生作用的标准体内动物实验方案采用溶血卵磷脂诱导的小鼠或大鼠脊髓或脑局灶性脱髓鞘模型。(1) 麻醉成年小鼠,并做一个小切口暴露脊髓。(2) 使用微量注射系统将1-2 μL 1%溶血卵磷脂(溶于无菌生理盐水)注射到白质中,以诱导局部脱髓鞘病变。(3) 脱髓鞘形成后(例如,注射后1-2天),将聚左旋鸟氨酸盐酸盐(溶于合适的载体,例如无菌PBS)直接注射到病变部位。(4) 让动物恢复一段时间(例如,1至3周)。 (5)使用行为学测试评估运动功能恢复情况,例如使用巴索小鼠量表(BMS)评估运动活性或进行转棒测试。(6)在实验终点,用固定液灌注动物,取出脊髓,并对组织切片进行组织学染色(例如,使用卢克索尔快蓝染色髓鞘)和免疫组织化学染色,以量化髓鞘再生和细胞浸润情况。
药代性质 (ADME/PK)
由于聚L-鸟氨酸盐酸盐(分子量15000-30000)是一种研究级聚合物,而非候选药物,因此目前尚无其正式的药代动力学(PK)数据。其高分子量(15000-30000 Da)和聚阳离子性质表明,口服后其在胃肠道的吸收可能较差。直接注射到组织或全身循环后,由于其分子量较大,该聚合物的半衰期可能较长,并可能在网状内皮系统(RES)中蓄积。通常将其配制成无菌水或硼酸盐缓冲液(pH 8.5)的储备液,然后用PBS或培养基稀释至工作浓度(例如0.1 mg/mL)。该粉末应储存在-20℃,防潮,可长期稳定保存。一旦溶解,在 4°C 下储存可稳定数月,但应避免反复冻融循环。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
聚L-鸟氨酸盐酸盐通常被认为是一种低毒性的生化试剂。根据该聚合物的MSDS(材料安全数据表),它不属于OSHA 29 CFR 1910.1200规定的危险物质,其NFPA健康等级为1级,表明接触该物质只会引起轻微刺激。然而,1962年一项题为“聚L-鸟氨酸在微生物和组织培养系统中的毒性作用”的研究表明,在高浓度下可观察到细胞毒性作用,这可能是由于该聚阳离子聚合物破坏了细胞膜所致。与所有研究用化学品一样,应遵循标准的实验室安全操作规程,包括佩戴手套和护目镜。该物质仅供研究使用,不得用于人体治疗或诊断。
参考文献

[1]. Biochemical reagentsM//Methods of Enzymatic Analysis. Academic Press, 1965: 967-1037.

其他信息
聚L-鸟氨酸盐酸盐是一种由氨基酸L-鸟氨酸合成的聚阳离子聚合物,其盐酸盐形式确保了其水溶性。作为一种研究级工具,它在从构建细胞培养基质到研究药物吸收和促进髓鞘修复等一系列应用中具有不可估量的价值。其聚阳离子特性使其能够有效地与带负电荷的细胞表面相互作用,使其成为一种用途广泛的工具。在涂层应用方面,它已成功用于神经细胞的黏附以及神经细胞分化和生长的研究。该聚合物还能够促进亲水性大分子药物的鼻腔吸收,凸显了其在药物递送系统中的潜在作用。它并非美国食品药品监督管理局(FDA)批准的药物,也没有临床试验历史。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
(C5H12N2O2)N.XCLH
分子量
15000-30000
CAS号
26982-21-8
外观&性状
Solid powder ; White to off-white
LogP
1.34
tPSA
89.34
别名
L-Ornithine homopolymer hydrochloride (MW 15000-30000)
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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