| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary molecular target of 5-Fluoroorotic acid is orotidine-5'-monophosphate decarboxylase (OMP decarboxylase), the enzyme encoded by the URA3 gene in yeast and the pyrF gene in bacteria. 5-FOA itself is nontoxic to cells; however, when taken up by cells expressing functional OMP decarboxylase, it is converted to 5-fluorouracil (5-FU). The resulting 5-FU is then further metabolized to 5-fluorouridine monophosphate (5-FUMP) which incorporates into RNA, and to 5-fluoro-2'-deoxyuridine monophosphate (5-FdUMP) which acts as a potent inhibitor of thymidylate synthase, ultimately causing cessation of DNA synthesis and cell death.
5-FOA inhibits thymidylate synthase (TS), an enzyme essential for DNA synthesis. In parasitic systems such as Plasmodium falciparum, its primary mechanism of action is through the inhibition of thymidylate synthase-dihydrofolate reductase (TS-DHFR). In yeast genetics, it targets the URA3 gene product. This dual activity makes it a versatile tool in both molecular biology and anti-infective research. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，5-氟乳清酸对某些真菌具有抗菌活性。它具有与5-氟胞嘧啶相近的显著抗念珠菌作用，以及中等的抗皮肤癣菌作用。在培养的酵母细胞中，浓度为1 mg/mL的5-氟乳清酸可在30℃培养4-7天内有效筛选出Ura⁺细胞（表达功能性URA3的细胞），而Ura⁻细胞（携带URA3突变）则具有抗性并正常生长。较低浓度（500 μg/mL）也可使用，但会导致Ura⁺细胞的背景生长增加。
5-氟尿嘧啶（5-FOA）是一种胸苷酸合成酶抑制剂。在酵母中，表达URA3基因的细胞会将5-FOA转化为5-氟尿嘧啶，后者随后代谢为5-氟脱氧尿苷单磷酸（FDMP），后者是胸苷酸合成酶的强效抑制剂，最终导致细胞死亡。5-FOA具有显著的抗念珠菌活性和中等的抗皮肤癣菌活性。此外，它还具有抗疟活性，其在疟原虫中的主要靶点是胸苷酸合成酶。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
大鼠体内研究表明，5-氟乳清酸（5-FOA）会影响肝细胞中核糖体RNA（rRNA）的成熟。单独给予5-FOA或与γ射线联合给予5-FOA后，由于rRNA成熟受阻，放射性乳清酸掺入45S rRNA前体的量增加，同时28S和18S亚基的出现也延迟。在肾上腺切除的大鼠中，单独给予5-FOA可在0.5小时内阻断rRNA成熟。这些结果表明，5-FOA选择性地抑制肝细胞中rRNA的成熟，并且这种抑制作用受肾上腺的影响。
5-FOA 具有口服活性，但未提供具体的药代动力学数据。在小鼠模型中，它已显示出抗疟活性。它作为酵母遗传学中的选择剂的应用已得到广泛认可。当添加到培养基中时，它不会影响缺乏功能性 URA3 基因的细胞。该化合物性质稳定，以粉末形式储存于 -20℃。 |
| 酶活实验 |
文献中尚未报道针对 5-FOA 的特异性非细胞酶结合测定方法，因为该化合物是一种前药，需要酶促转化才能发挥作用。然而，主要酶靶点 OMP 脱羧酶的活性可以通过无细胞提取物进行评估。一种标准的抗性测定方案是将酵母细胞在液体 YPD 培养基中培养，然后在 5-FOA 平板上进行筛选。酶活性测定时，将无细胞提取物与乳清酸-5'-单磷酸 (OMP) 作为底物进行孵育，并通过高效液相色谱 (HPLC) 或分光光度法定量尿苷-5'-单磷酸 (UMP) 的生成量。在这些测定中，可以监测 5-FOA 作为竞争底物或替代底物的存在。
5-FOA 对胸苷酸合成酶的抑制活性可通过无细胞酶活性测定法进行评估。实验步骤：将重组胸苷酸合成酶（10 ng）与不同浓度的 5-FOA（0.1-1000 nM）在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM MgCl2，1 mM EDTA）中孵育。加入底物 dUMP（50 uM）和辅因子 CH2THF（50 uM）启动反应。在 37℃ 下孵育 30 分钟后终止反应，并在 340 nm 波长处用分光光度计测定产物的生成量。IC₅0 值由剂量-反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
5-FOA 的标准细胞检测方案以酵母细胞为模型系统。在 5-FOA 培养基上进行筛选之前，先将细胞在液体 YPD 培养基或 YPD 平板上预培养。筛选时，将多达 10⁷ 个细胞接种到含有 5-FOA 培养基（通常为 1 mg/mL 5-FOA 的合成最小培养基，并添加适当的补充剂）的单个 50 mm 培养皿中。抗性菌落（Ura⁻ 细胞）在 30°C 下培养 4-7 天即可生长。5-FOA 培养基的制备方法是将 5-FOA 粉末添加到标准酵母合成培养基（例如，SC-尿嘧啶培养基）中，使其最终浓度达到 1 mg/mL。由于 5-FOA 粉末在水中的溶解度很低，因此必须加热或搅拌混合物以使其溶解。或者，也可以通过将 100 mg 5-FOA 溶解在 1 mL 无水 DMSO 中来制备 100 倍浓缩的储备液。
5-氟西汀（5-FOA）的细胞毒活性可在酵母细胞培养中进行评估。实验步骤：将具有功能性URA3基因的酵母细胞（例如酿酒酵母）接种于96孔板（1×10⁵个细胞/孔），培养基为不含尿嘧啶的合成培养基。加入不同浓度的5-FOA（0.1-1000 ug/mL），并在30℃下培养24-48小时。通过测定OD600值来评估细胞生长情况，并确定最小抑菌浓度（MIC）。对于抗疟活性测定，使用恶性疟原虫培养物，并在处理48-72小时后通过[3H]-次黄嘌呤掺入法来评估寄生虫生长情况。 |
| 动物实验 |
本文描述了一种利用大鼠模型研究5-氟乳清酸（5-FOA）体内效应的实验方案。成年大鼠（包括完整大鼠和肾上腺切除大鼠）通过注射或口服途径给予5-氟乳清酸。在一项代表性研究中，大鼠接受γ射线（1800 rad）照射和/或5-FOA治疗。治疗后，在不同时间点（例如，给药后0.5、6、12小时）收集肝组织。制备核组分和胞质组分，并提取核糖体RNA（rRNA）。通过凝胶电泳分析rRNA的成熟状态，检测45S前体积累以及28S和18S成熟亚基的出现。放射性标记的[¹⁴C]-乳清酸（与治疗同时给药）掺入rRNA的量可作为另一终点指标进行测量。
5-氟西汀（5-FOA）的体内疗效可在疟疾小鼠模型中进行评估。实验方法：将6-8周龄的雌性BALB/c小鼠腹腔注射1×10⁷个伯氏疟原虫感染的红细胞。小鼠随机分组（n=10）。将5-FOA溶解于合适的溶剂（例如0.5%甲基纤维素）中，并以10、30和100 mg/kg的剂量，每日一次口服给药，连续4天。每日通过吉姆萨染色血涂片检查监测寄生虫血症。记录30天的存活率。阳性对照组接受氯喹（10 mg/kg）治疗。寄生虫血症的降低和存活率的提高表明5-FOA有效。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
文献中尚未报道5-氟乳清酸的具体药代动力学参数，因为该化合物主要用作微生物遗传学研究工具而非治疗药物。然而，基于其与5-氟尿嘧啶的结构相似性，预计该化合物在表达OMP脱羧酶的细胞中转化为5-氟尿嘧啶时，其代谢过程与5-氟尿嘧啶类似。5-氟乳清酸在溶液中高度稳定，粉末形式可在-20°C下保存长达3年，DMSO溶液形式可在-20°C下保存长达6个月，或在4°C下短期保存。该化合物在121°C高压灭菌下稳定，因此可在灭菌前制备含5-氟乳清酸的培养基。
5-FOA 的具体药代动力学数据有限。作为一种小分子化合物，它具有口服活性，在动物研究中通常采用灌胃给药。在-80℃下储存6个月或在-20℃下储存1个月时，其溶液状态稳定。该化合物是纯度为99.39%的参考标准品，应以粉末形式储存在-20℃。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
5-氟乳清酸被归类为刺激性物质，其安全数据表建议在通风橱内操作，以避免吸入粉尘颗粒。二甲基亚砜（DMSO）溶液会带来额外的风险，因为DMSO能够增强皮肤对其他分子的吸收。该化合物本身对缺乏URA3或pyrF表达的细胞毒性不大；其毒性取决于OMP脱羧酶将其酶促转化为5-氟尿嘧啶。在酵母筛选方案中，5-FOA的使用浓度高达1 mg/mL，对耐药的Ura⁻细胞无不良影响。标准文献中没有关于急性毒性（LD50）、慢性毒性、遗传毒性或生殖毒性的具体数据。该化合物仅供研究使用，不得用于人体诊断或治疗。
5-氟辛酸（5-FOA）对表达URA3基因的酵母细胞有毒性，但对URA3缺陷型酵母菌株无毒性。在哺乳动物系统中，它表现出中等毒性。它对动物有致畸性，可导致发育异常。应采取安全预防措施，避免摄入或吸入。该化合物仅供研究使用，并非获批药物。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
5-氟乳清酸一水合物 (5-FOA) 是一种广泛用于酵母分子遗传学中 ura3 突变体阳性筛选的参考化合物。它是胸苷酸合成酶的抑制剂，可用作选择剂。此外，它还具有抗疟疾和抗念珠菌活性。该化合物以粉末形式储存于 -20℃，纯度≥98%。仅供研究使用，并非已获批准的药物。
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| 分子式 |
C5H5FN2O5
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|---|---|
| 分子量 |
192.10
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| 精确质量 |
192.018
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| CAS号 |
220141-70-8
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| PubChem CID |
16212749
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.81g/cm3
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| 熔点 |
278ºC (dec.)(lit.)
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| LogP |
0
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| tPSA |
112.25
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
13
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| 分子复杂度/Complexity |
309
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1C(N([H])C(N([H])C=1C(=O)O[H])=O)=O.O([H])[H]
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| InChi Key |
LODRRYMGPWQCTR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H3FN2O4.H2O/c6-1-2(4(10)11)7-5(12)8-3(1)9;/h(H,10,11)(H2,7,8,9,12);1H2
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| 化学名 |
5-fluoro-2,4-dioxo-1H-pyrimidine-6-carboxylic acid;hydrate
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| 别名 |
5-Fluorouracil-6-carboxylic acid Mono(hydrate); 5-FOA; 5-Fluoroorotic acid monohydrate; RefChem:535986; 678-852-3; 5-Fluoroorotic acid hydrate; 5-fluoro OA
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气下），避免暴露在潮湿环境中。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.2056 mL | 26.0281 mL | 52.0562 mL | |
| 5 mM | 1.0411 mL | 5.2056 mL | 10.4112 mL | |
| 10 mM | 0.5206 mL | 2.6028 mL | 5.2056 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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