Phenolphthalein β-D-glucuronide

别名: Phenolphthalein β-D-glucuronide
目录号: V97603
酚酞β-D-葡萄糖醛酸苷是一种生化药剂。
Phenolphthalein β-D-glucuronide CAS号: 15265-26-6
产品类别: Biochemical Assay Reagents
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
Other Sizes

Other Forms of Phenolphthalein β-D-glucuronide:

  • 苯酚-Beta-D-葡萄糖醛酸钠
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产品描述
酚酞β-D-葡糖醛酸苷是一种生化试剂。
酚酞beta-D-葡糖醛酸苷(PHP-Gluc,CAS 15265-26-6,分子量496.47,分子式C2₆H22O10)是beta-葡糖醛酸酶(GUS)的显色底物。它用于生化分析,特别是用于GUS报告基因分析,以研究转基因植物中的基因表达,以及用于环境微生物学中检测大肠菌群。
生物活性&实验参考方法
靶点
Phenolphthalein beta-D-glucuronide targets beta-glucuronidase (GUS, EC 3.2.1.31), a lysosomal enzyme that cleaves beta-D-glucuronic acid moieties from various substrates. Upon enzymatic hydrolysis, the substrate releases phenolphthalein, which is colorless at acidic to neutral pH but becomes purple (λmax 550-555 nm) under alkaline conditions. The GUS gene from E. coli is commonly used as a reporter in plant and yeast transformation. The color change is specific for measuring GUS activity.
体外研究 (In Vitro)
在体外,酚酞β-D-葡糖醛酸苷(1-20 mM)可用作比色法测定中β-葡糖醛酸酶的底物。GUS酶可裂解葡糖醛酸键,释放酚酞。加入碱性终止缓冲液(例如2 M NaOH或2 M甘氨酸-NaOH,pH 10.4)后,酚酞阴离子显色呈品红色(A₅₅0)。该反应与酶浓度和时间呈线性关系。对于纯化的E. coli GUS,该底物的Km值为0.2-0.5 mM;比活性为1-10 umol酚酞释放/min/mg蛋白。
体内研究 (In Vivo)
不适用;该化合物是生化分析中使用的底物,不用于体内治疗。它可用于检测植物组织(离体)或细菌培养物中的GUS活性。它不用于动物治疗。
酶活实验
对于 GUS 酶活性测定,将大肠杆菌 GUS 酶(0.1-1 U)与酚酞 β-D-葡糖醛酸苷(0.2-10 mM)在 1× GUS 酶活性测定缓冲液(50 mM NaH2PO4,pH 7.0,10 mM β-巯基乙醇,1 mM EDTA,0.1% Triton X-100)中于 37℃ 孵育 15-60 分钟。加入终止缓冲液(2 M NaOH 或 2 M 甘氨酸-NaOH,pH 10.4)终止反应。在 550 nm 处测定吸光度。制备酚酞(0.1-100 uM)标准曲线。对于动力学分析,改变底物浓度(0.2-10 mM),并测定初始反应速率以确定 Km 和 Vmax。对于抑制剂研究(例如,葡糖醛酸-1,4-内酯),在加入底物之前,先将抑制剂与酶预孵育 5 分钟。
细胞实验
对于基于细胞的GUS检测(植物细胞或组织),将样品在GUS提取缓冲液(50 mM NaH2PO4,pH 7.0,10 mM β-巯基乙醇,1 mM EDTA,0.1% Triton X-100)中匀浆。提取物经离心(12,000 g,10分钟,4℃)后,取上清液与底物(终浓度2-5 mM)于37℃孵育1-24小时,具体时间取决于GUS的表达水平。反应用终止缓冲液终止,并测定吸光度(A₅₅0)。对于组织化学GUS染色,植物组织用5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖醛酸苷(X-Gluc)而非酚酞类底物进行孵育。对于哺乳动物细胞,可以使用相同的方案在细胞裂解液中测量内源性 GUS 活性。
动物实验
不适用;该化合物用于体外生化分析,不用于动物。
药代性质 (ADME/PK)
该底物溶于水(在水中浓度为 10 mg/mL),在 4℃ 下可稳定保存数周。粉末需避光储存于 -20℃。释放的产物(酚酞)是一种对光和 pH 值敏感的染料;反应结束后应立即加入终止缓冲液。不可用于静脉注射。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
毒性低。酚酞是一种已知的泻药(高剂量时),并且可能对大鼠具有致癌性(肠道肿瘤)。然而,检测中使用的剂量极低(微摩尔级)。葡萄糖醛酸苷底物本身无毒。使用标准个人防护装备(手套、护目镜、实验服)。避免皮肤接触。本品并非药物。
参考文献

[1]. Bergmeyer, et al. "Biochemical reagents." Methods of Enzymatic Analysis. Academic Press, 1965. 967-1037.

其他信息
酚酞葡萄糖醛酸苷是母体化合物
酚酞β-D-葡糖醛酸苷是一种用于β-葡糖醛酸酶(GUS)活性测定的研究级底物。它并非美国食品药品监督管理局(FDA)批准的药物。它用于植物分子生物学中的GUS报告基因检测以及大肠菌群检测试剂盒(例如,用于水质检测)。仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C26H22O10
分子量
494.45
精确质量
494.121
CAS号
15265-26-6
相关CAS号
6820-54-8 (hydrochloride salt)
PubChem CID
3032634
外观&性状
Typically exists as solids at room temperature
密度
1.584g/cm3
沸点
804.5ºC at 760mmHg
闪点
276.5ºC
蒸汽压
2.53E-27mmHg at 25°C
LogP
1.126
tPSA
162.98
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
10
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
36
分子复杂度/Complexity
805
定义原子立体中心数目
5
SMILES
OC1C=CC(C2(OC(=O)C3=CC=CC=C23)C2C=CC(O[C@@H]3O[C@H](C(=O)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)=CC=2)=CC=1
InChi Key
FXJYOZKDDSONLX-XADSOVDISA-N
InChi Code
InChI=1S/C26H22O10/c27-15-9-5-13(6-10-15)26(18-4-2-1-3-17(18)24(33)36-26)14-7-11-16(12-8-14)34-25-21(30)19(28)20(29)22(35-25)23(31)32/h1-12,19-22,25,27-30H,(H,31,32)/t19-,20-,21+,22-,25+,26?/m0/s1
化学名
(2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-[4-[1-(4-hydroxyphenyl)-3-oxo-2-benzofuran-1-yl]phenoxy]oxane-2-carboxylic acid
别名
Phenolphthalein β-D-glucuronide
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0224 mL 10.1122 mL 20.2245 mL
5 mM 0.4045 mL 2.0224 mL 4.0449 mL
10 mM 0.2022 mL 1.0112 mL 2.0224 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们