| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TAT-CN21 targets CaMKII (calcium/calmodulin-dependent protein kinase II). CaMKII is highly expressed in the brain, where it regulates processes such as neurotransmitter synthesis/release, neuronal plasticity, excitability, and calcium homeostasis. TAT-CN21 acts as a CaMKII inhibitor. It specifically blocks the catalytic activity and the binding of CaMKII to the NMDA receptor subunit GluN2B, thereby modulating excitotoxic processes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，TAT-CN21 是一种高效且选择性的 CaMKII 抑制肽（IC₅0 77 nM）。它能阻断细胞裂解液和活细胞中的 CaMKII 活性。TAT-CN21 对 CaMKII 具有高度选择性，在 1-10 uM 浓度下不抑制其他激酶（例如 PKA、PKC、CaMKK、PKB、SAPK、MAPK）。它能有效阻断 CaMKII 与 NMDA 受体 GluN2B 亚基的结合，从而阻止 CaMKII 转位至突触。在 1-10 uM 浓度下，TAT-CN21 能保护培养的神经元免受兴奋性毒性损伤（例如 NMDA 诱导的细胞死亡，可通过 LDH 释放或 PI 摄取来检测）。在乳腺癌细胞迁移实验中，TatCN21 (1 uM) 通过抑制 CaMKII-STAT3 通路显著降低转移。打乱的对照肽（TAT-CN21 打乱）没有效果，证实了靶标特异性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，TAT-CN21 (TatCN21) 已在脑缺血（卒中）和神经退行性疾病模型中进行了研究。在大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO，闭塞60分钟，再灌注24小时）模型中，再灌注后4-6小时内静脉注射TatCN21（1-10 nmol/g）可使梗死体积减少30-50%，并改善神经功能评分（贝德森评分、转棒试验）。在小鼠创伤性脑损伤（TBI）模型中，腹腔注射TatCN21（2 mg/kg）可减少病灶体积并改善认知功能（莫里斯水迷宫试验）。TatCN21还能减轻癫痫发作引起的脑损伤，并已在阿尔茨海默病模型中进行过研究（例如，减少Aβ诱导的神经元丢失）。
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| 酶活实验 |
对于 CaMKII 酶活性测定（非细胞法），将重组人 CaMKIIα (1-10 nM) 与 TAT-CN21 (0.1-1000 nM) 在测定缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、0.1 mM CaCl2、1 mM DTT、0.01% Brij-35）中孵育 15 分钟。加入钙调蛋白 (10-100 nM) 和肽底物（例如，syntide-2，10-50 uM）。通过加入 ATP (10-100 uM，含 0.5 uCi [γ-32P]ATP) 启动反应。在 30℃ 下反应 10-30 分钟后，将反应液点样至 P81 磷酸纤维素滤纸上，用 0.75% 磷酸洗涤，并在闪烁计数器中计数。或者，也可以采用非放射性检测方法，使用荧光标记的肽底物和检测抗体（例如，CaMKII 检测试剂盒）。IC₅0 为 77 nM。为评估选择性，该化合物在 1-10 uM 浓度下分别针对 PKA、PKC、CaMKK、PKB、SAPK 和 MAPK 进行测试；未观察到明显的抑制作用。对于 GluN2B 结合，采用 GST-GluN2B（胞质尾）下拉实验。HEK293 细胞用 CaMKIIα 进行转染。将细胞裂解液与 TAT-CN21 (0.1-10 uM) 和 GST-GluN2B 孵育，用谷胱甘肽-琼脂糖进行沉淀，并通过蛋白质印迹检测 CaMKII 结合。
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| 细胞实验 |
细胞实验中，从E17-E18大鼠胚胎中分离出原代皮层神经元，并在添加了B27补充剂的Neurobasal培养基中培养7-10天。兴奋性毒性实验中，神经元先用TAT-CN21（1-10 uM）预处理30分钟，然后用NMDA（10-100 uM）和甘氨酸（10 uM）处理10-30分钟。24小时后，通过检测乳酸脱氢酶（LDH）释放或碘化丙啶（PI）摄取来评估细胞死亡。迁移/侵袭实验中，将MDA-MB-231乳腺癌细胞接种于Transwell小室中，并用TAT-CN21（1 uM）处理。24小时后，用结晶紫染色侵袭细胞。在蛋白质印迹分析中，细胞裂解液用抗磷酸化CaMKII（Thr286）、抗CaMKII、抗磷酸化STAT3和抗STAT3抗体进行检测。在免疫荧光分析中，神经元用CaMKIIα和磷酸化CaMKII抗体进行染色。
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| 动物实验 |
对于MCAO模型（大脑中动脉闭塞），雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g，每组n=10-12）经异氟烷麻醉后，将4-0尼龙单丝插入颈内动脉，闭塞大脑中动脉60分钟。拔出单丝后开始再灌注。将TAT-CN21溶于PBS，并在再灌注后立即经尾静脉注射，剂量为1-10 nmol/g（约0.1-1 mg/kg）。对照组注射载体（PBS）或经处理的TAT-CN21。MCAO后24小时评估神经功能缺损（0-4分制）。处死大鼠，取出脑组织。采用TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）染色法测量梗死体积。脑组织样本还需进行免疫组织化学染色（神经元用 NeuN 标记，小胶质细胞用 Iba1 标记，星形胶质细胞用 GFAP 标记）。对于 TBI 模型，小鼠接受可控皮层冲击 (CCI) 损伤。损伤后 30 分钟腹腔注射 TatCN21 (2 mg/kg)。在第 14-21 天进行 Morris 水迷宫（空间学习）测试。所有 IACUC 指南均适用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TAT-CN21 是一种由 20-25 个氨基酸残基组成的肽（分子量约为 3-4 kDa）。TAT 序列（YGRKKRRQRRR）赋予其细胞渗透性，但并不提高口服生物利用度。静脉注射后，由于快速的蛋白水解和肾脏清除，该肽的半衰期较短（t½ 为 15-30 分钟）。为了延长药物暴露时间，可以使用渗透泵（Alzet）进行持续输注。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该肽在治疗剂量（0.1-1 mg/kg，静脉注射）下无毒。啮齿动物未出现明显的体重减轻或不良反应。无遗传毒性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TAT-CN21 (TatCN21) 是一种用于抑制 CaMKII 的研究级肽。它并非 FDA 批准的药物。该肽用于研究中风、创伤性脑损伤 (TBI)、阿尔茨海默病和乳腺癌转移。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C169H303N69O43
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|---|---|
| 分子量 |
3989.65
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ≥ 50 mg/mL (~12.53 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2506 mL | 1.2532 mL | 2.5065 mL | |
| 5 mM | 0.0501 mL | 0.2506 mL | 0.5013 mL | |
| 10 mM | 0.0251 mL | 0.1253 mL | 0.2506 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PTCA
TAT-CN21 (scrambled)
MCB-22-174
CaMKII-IN-4
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