| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BMS-986397 targets casein kinase 1alpha (CK1alpha), a serine/threonine protein kinase that regulates multiple cellular processes including Wnt/beta-catenin signaling, DNA damage response, and cell cycle progression. The compound acts as a molecular glue degrader that simultaneously binds to cereblon (CRBN), a substrate receptor of the CUL4-RBX1-DDB1-CRBN E3 ubiquitin ligase complex, and CK1alpha. This ternary complex formation induces ubiquitination of CK1alpha, followed by proteasomal degradation. Degradation of CK1alpha leads to p53 activation (in TP53 wild-type cells), cell cycle arrest (G1 phase), and induction of apoptosis. The compound is highly selective for CK1alpha over other CRBN neosubstrates such as IKZF1, IKZF3 (Ikaros and Aiolos), and GSPT1. BMS-986397 is part of the CELMoD class of agents, which have improved properties compared to early immunomodulatory drugs (IMiDs) like lenalidomide and pomalidomide.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，BMS-986397 是一种高效且选择性的 CK1α 分子胶降解剂。它能以低纳摩尔至亚纳摩尔浓度范围（通常为 0.1-10 nM）诱导 TP53 野生型 AML 细胞系（例如 MOLM-13、OCI-AML3 和 THP-1）中 CK1α 的降解。在 MOLM-13 细胞中，用 1 nM BMS-986397 处理 4-8 小时后，Western blot 检测显示 CK1α 蛋白水平降低超过 90%。这种降解依赖于 CRBN；在 CRBN 敲除细胞中，CK1α 水平保持不变。CK1α 降解后，p53 蛋白水平趋于稳定并开始积累（p53 通常由 MDM2 降解）。 p53靶基因，包括p21（CDKN1A）和PUMA，均上调。在TP53野生型AML细胞系中，BMS-986397（0.1-10 nM）可诱导G1期细胞周期阻滞和快速凋亡（24-48小时内Annexin V阳性）。该化合物还能诱导白血病细胞分化。相比之下，TP53突变型AML细胞（例如K562、HL60）的敏感性较低，其抑制细胞活力的IC₅0值高出10-100倍（100 nM至1 uM）。BMS-986397对CK1α具有高度选择性，优于其他CRBN新底物：Western blot检测显示，在浓度高达100 nM时，它不会降解IKZF1、IKZF3或GSPT1。该化合物对非靶向激酶的抑制作用极低（对100多种激酶的IC₅0 > 1 uM）。该化合物可溶于DMSO（96 mg/mL），在细胞培养中可使用浓度为0.1-1000 nM。它能诱导TP53野生型原代AML患者样本（原始细胞）凋亡，EC₅0值通常为0.5-10 nM。此外，它对高危MDS患者样本也显示出活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，BMS-986397 在 AML 和 HR-MDS 的小鼠异种移植模型中表现出强大的抗白血病活性。在雌性无胸腺裸鼠的 MOLM-13（TP53 野生型 AML）皮下异种移植模型中，BMS-986397 以 1、3、10 或 30 mg/kg 的剂量每日一次口服给药，持续 14-28 天。与溶剂对照组相比，3 mg/kg/天的剂量组观察到显著的肿瘤生长抑制率 (TGI) 为 60-80%。10 mg/kg/天的剂量组 TGI 达到 80-95%，部分肿瘤完全消退。在全身性（静脉注射）MOLM-13-荧光素酶模型（骨髓播散性白血病）中，口服BMS-986397（10 mg/kg/天）可使生物发光信号降低90%以上，并延长生存期（中位生存期为40-50天，而对照组为20-25天）。在OCI-AML3异种移植模型中，也观察到了类似的疗效。在HR-MDS患者来源的异种移植（PDX）模型中，口服BMS-986397（10 mg/kg/天）可降低骨髓和脾脏中人CD45+原始细胞的数量，并恢复正常的造血功能。该化合物在小鼠中耐受性良好，剂量高达30 mg/kg/天时，体重未见明显下降（<10%）。药效学指标：给药后4-8小时即可观察到肿瘤组织中CK1α降解，8-16小时达到最大降解率（>90%），并持续24小时。同时观察到p21上调和Ki-67减少（增殖）。未见明显的血小板减少症或中性粒细胞减少症报道，这使得BMS-986397区别于标准化疗。BMS-986397还与维奈托克（BCL-2抑制剂）和阿扎胞苷（去甲基化剂）联合用药，结果显示其抗白血病活性增强且具有协同作用。
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| 酶活实验 |
对于 CK1α 降解分析（非细胞或蛋白质水平），可进行生化分析以检测泛素化。将重组人 CK1α 蛋白 (1 ug) 与 CRBN-DDB1-CUL4-RBX1 E3 连接酶复合物（纯化的或来自表达 CRBN 及其组分的 293T 细胞裂解液）、泛素 (5 ug)、E1 酶 (0.1 ug)、E2 酶 (UBE2D2, 0.5 ug) 和 ATP (1 mM) 在反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl2、2 mM DTT、100 mM NaCl）中于 37℃ 孵育 60 分钟。向反应中加入 BMS-986397 (0.1-1000 nM)。 CK1α 泛素化可通过 Western blot 检测，使用抗 CK1α 抗体（高分子量条带的弥散模式表明存在多聚泛素化）。对于化合物与 CRBN 的结合，可使用荧光偏振 (FP) 或时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 检测：将重组人 CRBN-DDB1 复合物（生物素标记，10 nM）与荧光标记的来那度胺探针（例如，FAM-来那度胺，5 nM）和 BMS-986397（0.1-1000 nM）在检测缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5，100 mM NaCl，0.01% Tween-20）中孵育 60 分钟。加入链霉亲和素偶联的磁珠或链霉亲和素标记的铽供体，并测量 FP 或 TR-FRET 信号。 BMS-986397 与 CRBN 的结合 IC₅0 为 5-20 nM。为了评估其对其他 CRBN 新底物的选择性，可以使用 IKZF1 肽底物进行类似的检测。然而，在细胞实验中，BMS-986397 对 CK1α 的选择性高于 IKZF1。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验中，TP53野生型AML细胞系（MOLM-13、OCI-AML3、THP-1）培养于含10% FBS和1%青霉素-链霉素的RPMI-1640培养基中。降解实验中，将细胞接种于6孔板（5 × 10⁵ 个细胞/mL），并用BMS-986397（0.001-1000 nM）处理4-24小时。收集细胞，用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解，取蛋白裂解液（20-50 ug）进行SDS-PAGE电泳分离，并用抗CK1α（1:1000，Cell Signaling）、抗p53（1:1000）、抗p21（1:1000）和抗β-肌动蛋白（内参）抗体进行Western blot分析。进行密度测定。DC₅0 计算为 CK1α 降解 50% 所需的浓度。对于 CRBN 依赖性降解，细胞预先用 CRBN siRNA 处理，或用来那度胺 (10 uM) 作为竞争剂处理。对于细胞凋亡检测，将细胞接种于 96 孔板 (2 × 10⁴ 个细胞/孔) 中，并用 BMS-986397 (0.01-1000 nM) 处理 24-72 小时。细胞凋亡通过 Annexin V-FITC/PI 染色和流式细胞术进行检测，或使用荧光底物 (DEVD-R110，Promega Caspase-Glo) 检测 caspase-3/7 活性。在 TP53 野生型细胞中，诱导细胞凋亡的 IC₅0 通常为 0.1-1 nM。细胞活力检测（MTT 或 CellTiter-Glo）中，细胞处理 48-72 小时。TP53 野生型细胞的活力 IC₅0 为 0.1-5 nM；TP53 突变细胞（K562、HL60）的活力 IC₅0 为 100-1000 nM。细胞周期分析中，细胞用 BMS-986397（0.5-10 nM）处理 24-48 小时，用 70% 乙醇固定，用碘化丙啶（50 ug/mL）和 RNase A（100 ug/mL）染色，并通过流式细胞术进行分析。G1 期阻滞表现为 G1 期细胞百分比增加。分化检测中，细胞用 CD11b 或 CD14 抗体染色，并通过流式细胞术进行分析。在联合用药研究中，细胞用 BMS-986397 (0.1-10 nM) 和维奈托克 (1-100 nM) 或阿扎胞苷 (0.1-10 uM) 处理，并使用 Chou-Talalay 法计算联合指数 (CI) 来评估协同作用（CI < 1 表示存在协同作用）。对于原发性 AML 患者样本，从 TP53 野生型 AML 患者的外周血或骨髓中分离单核细胞，在含有细胞因子（SCF、FLT3L、TPO、IL-3）的 StemSpan 培养基中培养，并用 BMS-986397 (0.01-100 nM) 处理 48-72 小时。使用 CD34+ 或 CD33+ 设门和 Annexin V 染色，通过流式细胞术评估细胞活力。每种条件均应进行三次重复测试，且实验至少重复三次。结果以平均值 +/- 标准差表示。统计学显著性采用单因素方差分析（ANOVA）结合Tukey事后检验或学生t检验确定。p < 0.05被认为具有统计学意义。
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| 动物实验 |
在体内异种移植研究中，将5 × 10⁶个MOLM-13（TP53野生型AML）细胞悬浮于100 μL PBS和100 μL Matrigel混合液中，皮下接种于雌性无胸腺裸鼠（nu/nu）或NSG小鼠（6-8周龄，18-22 g，每组n=8-10）右侧腹部。当肿瘤体积达到约150-200 mm³（接种后7-10天）时，将小鼠随机分组。BMS-986397的配制方法如下：溶剂为5% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80和50% ddH₂O（澄清溶液），或配制成0.5% CMC-Na的均质悬浮液（用于更高浓度，≥5 mg/mL）。小鼠每日一次经口灌胃给予BMS-986397，剂量分别为1、3、10或30 mg/kg，持续14-28天。对照组仅接受赋形剂（阴性对照），必要时接受来那度胺（25 mg/kg，口服，阳性对照）或阿糖胞苷（50 mg/kg，腹腔注射，阳性对照）。对于系统性播散性急性髓系白血病（AML）模型，经尾静脉注射1 × 10⁶个MOLM-13-荧光素酶细胞。于第7天通过生物发光成像（BLI，Xenogen IVIS）确认肿瘤植入。从第7天至第28天，每日一次口服给予BMS-986397（10 mg/kg）。每周进行一次BLI成像；每日监测生存情况。对于PDX模型，将原发性AML或HR-MDS患者样本通过静脉注射1-5 × 10⁶个原始细胞移植到NSG-SGM3小鼠（表达人SCF、GM-CSF和IL-3的NSG小鼠）体内。移植后（4-8周，外周血中hCD45+细胞>1%证实），小鼠接受BMS-986397（10 mg/kg，每日口服）治疗28天。使用抗人CD45抗体，通过流式细胞术检测骨髓（股骨）和脾脏中人CD45+原始细胞的百分比。使用游标卡尺测量肿瘤体积，并计算肿瘤生长指数（TGI）。监测体重变化以评估毒性反应。在研究结束时（第21-28天），收集肿瘤组织进行Western blot（CK1α、p53、p21、cleaved PARP）、组织学（H&E染色、Ki-67、TUNEL染色）和流式细胞术（Annexin V）检测。采集血液样本进行血常规（CBC）和血清生化（ALT、AST、BUN、肌酐）检测。采用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验分析生存情况。在治疗剂量（≤30 mg/kg）下，不应观察到显著毒性（体重减轻>15%、临床症状、血液学异常）。所有动物实验均须经IACUC批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
BMS-986397 可溶于 DMSO（96 mg/mL），应储存于 -20℃。它不溶于水和乙醇。口服制剂配制于 5% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 50% ddH2O 的混合溶液中（经验证，浓度高达 3-5 mg/mL 时可配制成澄清溶液）。对于更高剂量，可使用 CMC-Na 混悬液（5 mg/mL）。该化合物在小鼠体内具有中等的口服生物利用度（估计为 30-60%）。口服给药后，达峰时间 (Tmax) 为 1-2 小时。小鼠体内的消除半衰期约为 2-4 小时。血浆蛋白结合率高（>90%）。该化合物由肝脏 CYP 酶代谢，但尚未鉴定出具体的同工酶。目前尚无人体药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒性数据：BMS-986397 在小鼠中耐受性良好，剂量高达 30 mg/kg/天，持续 28 天，未见死亡，体重无明显下降（<10%），且未对肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）产生不良影响。在更高剂量（100 mg/kg）下，观察到轻微的胃肠道不适和食物摄入量减少。未见遗传毒性或心血管毒性报告。无皮肤/眼刺激性。需遵守标准实验室安全预防措施。本品不适用于人类。
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| 其他信息 |
BMS-986397 (CC-91633) 是一种首创的 CELMoD（cereblon E3 连接酶调节剂）药物，目前处于临床前研究阶段。与主要降解 IKZF1/IKZF3 的沙利度胺和来那度胺不同，BMS-986397 选择性地降解 CK1α。该化合物尚未获得 FDA 批准，也未启动临床试验。潜在临床适应症：TP53 野生型急性髓系白血病 (AML)、高危骨髓增生异常综合征 (HR-MDS) 和其他血液系统恶性肿瘤。仅供研究使用，不得用于治疗或诊断。
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| 分子式 |
C21H16CLF3N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
480.82
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| CAS号 |
2564486-44-6
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| SMILES |
ClC1=CC=CN=C1[C@H](C(F)(F)F)NC(C1C=CC2C(N(CC=2C=1)[C@@H]1C(NC(CC1)=O)=O)=O)=O
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0798 mL | 10.3989 mL | 20.7978 mL | |
| 5 mM | 0.4160 mL | 2.0798 mL | 4.1596 mL | |
| 10 mM | 0.2080 mL | 1.0399 mL | 2.0798 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Casein Kinase 2
AH081
MU1742-amide-C6-acid
Human casein
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