| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The peptide targets the T cell receptor (TCR) of CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs) that are specific for EBV-LMP1. When presented on the cell surface by major histocompatibility complex (MHC) class I molecules (specifically HLA-B*57:01 or B*58:01), IALYLQQNW is recognized by the TCR, leading to activation of EBV-specific CTLs. These CTLs then recognize and eliminate EBV-infected cells expressing LMP1. The peptide plays an important role in immune responses against EBV-associated malignancies.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验中，IALYLQQNW 可用于刺激外周血单核细胞 (PBMC) 中 EBV 特异性 CD8+ T 细胞。在 ELISpot 实验中，将 HLA-B*57:01 阳性供体的 PBMC 与该肽（1-10 ug/mL）孵育 12-24 小时，可产生 IFN-γ 斑点形成细胞 (SFC)，其数量与 EBV-LMP1 特异性 CTL 的频率相关。在细胞内细胞因子染色 (ICS) 实验中，肽刺激（5 ug/mL，与布雷菲德菌素 A 共同孵育 6 小时）可诱导 CD8+ T 细胞产生 IFN-γ、TNF-α 和 IL-2，并通过流式细胞术进行检测。在细胞毒性试验中，肽脉冲靶细胞（例如，自体B淋巴母细胞系或负载肽的T2细胞）在⁵¹Cr释放试验中被EBV特异性CTL裂解，在效应细胞与靶细胞比例为10:1至40:1时，特异性裂解率通常为20-60%。该肽还能在体外诱导LMP1特异性T细胞增殖，可通过CFSE稀释或[3H]-胸苷掺入法进行检测。在没有特异性T细胞的情况下，该肽不显示直接细胞毒性或促有丝分裂活性。该表位严格限制于HLA-B*57:01/B*58:01；在缺乏这些等位基因的供体中未观察到任何反应。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，IALYLQQNW 并非作为治疗性肽使用；相反，它被用作研究工具，用于监测癌症患者（尤其是霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌患者）体内 EBV 特异性 T 细胞反应。在过继性 T 细胞治疗方案中，使用肽脉冲树突状细胞或负载 IALYLQQNW（通常为 1-10 ug/mL）的人工抗原呈递细胞在体外扩增自体 T 细胞，以生成 EBV-LMP1 特异性 CTL，然后将这些 CTL 回输给患者。在临床研究中，输注 LMP1 特异性 CTL 与部分 EBV 阳性霍奇金淋巴瘤和鼻咽癌患者的肿瘤消退相关，尽管 IALYLQQNW 表位的具体作用取决于患者的 HLA 分型。该肽还用于 ELISpot 检测，以监测接受免疫治疗患者的 T 细胞反应。目前尚未有关于单独使用该肽的动物疗效研究的描述。
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| 酶活实验 |
对于MHC-肽结合实验（非细胞实验），重组HLA-B*57:01分子与IALYLQQNW肽进行复性。复性后的复合物经尺寸排阻色谱纯化，并通过表面等离子共振（SPR）或与标记参考肽的竞争实验测定其结合亲和力。例如，在大肠杆菌中表达HLA-B*57:01重链和β2-微球蛋白，并用IALYLQQNW（0.1-100 uM）和标记参考肽进行体外复性。将复合物捕获在抗体包被的表面上。结合的EC₅0通常在低纳摩尔范围内（5-50 nM）。对于T细胞受体结合研究，制备特异性结合HLA-B*57:01/IALYLQQNW的可溶性TCR，并通过SPR测定其结合亲和力。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，外周血单核细胞 (PBMC) 通过 Ficoll-Paque 密度梯度离心法从 HLA 分型的健康供体或 EBV 相关恶性肿瘤患者中分离。PBMC 重悬于添加了 10% 人 AB 血清或胎牛血清 (FBS)、1% 青霉素-链霉素和 20 U/mL IL-2（用于扩增）的 RPMI-1640 培养基中。对于 ELISpot 实验，将 96 孔 PVDF 板用抗 IFN-γ 捕获抗体（10 ug/mL，4℃ 过夜）包被。将 PBMC（2-3 × 10⁵ 个细胞/孔）与 IALYLQQNW 肽（1-10 ug/mL）在 37℃、5% CO2 条件下孵育 12-24 小时。实验设置了不含肽（背景）和含植物血凝素（PHA，2 ug/mL，阳性对照）的孔。洗涤孔板后，加入生物素标记的检测抗体（2 ug/mL）（孵育2小时），随后加入链霉亲和素-碱性磷酸酶（孵育1小时）。使用BCIP/NBT底物显色，并在自动ELISpot读板仪上计数。结果以每10⁶个PBMC的斑点形成细胞数（SFC）表示。对于细胞内细胞因子染色（ICS），将PBMC（96孔圆底板，每孔1 × 10⁶个细胞）用IALYLQQNW（5-10 ug/mL）刺激2小时，随后用布雷菲德菌素A（10 ug/mL）刺激4-6小时。细胞经抗CD8、抗CD4和抗CD3抗体表面染色后，固定并进行透化处理，然后用抗IFN-γ、抗TNF-α和抗IL-2抗体进行染色。使用流式细胞仪分析细胞（10,000-50,000个事件）。记录CD8+细胞中细胞因子阳性细胞的百分比。对于细胞毒性试验（⁵¹Cr释放），靶细胞（例如，自体B-LCL或T2细胞）用IALYLQQNW（10 ug/mL）在37℃下脉冲处理1小时，洗涤后，用¹⁰⁰ uCi的⁵¹Cr标记1小时。效应细胞（用肽在体外扩增7-14天的PBMC来源的CTL，或原代PBMC）与靶细胞以不同的效应细胞与靶细胞比例（40:1、20:1、10:1、5:1、2.5:1）在U型底板中孵育4小时。收集上清液，并用γ计数器测量⁵¹Cr释放量。特异性裂解率（%）=（实验释放量-自发释放量）/（最大释放量-自发释放量）×100。对于T细胞增殖实验，PBMC用CFSE（5 uM，37℃孵育10分钟）标记，然后用IALYLQQNW（1-10 ug/mL）刺激5-7天。通过流式细胞术分析CFSE稀释情况。四聚体染色中，使用PE或APC标记的HLA-B*57:01/Ialylqqnw四聚体对PBMC（0.5-1 × 10⁶个细胞，4℃孵育30分钟）进行染色，随后进行抗CD8染色。四聚体阳性CD8⁺ T细胞通过流式细胞术进行定量。阴性对照使用无关肽（例如HIV gag肽）或HLA不匹配肽。每种条件均应进行三重复或两重复测试，且实验至少使用3名供体重复进行。结果以平均值+/-标准差表示。
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| 动物实验 |
体内人体研究：在过继性T细胞疗法中，自体T细胞在体外扩增。外周血单核细胞（PBMC）通过白细胞分离术获得，CD8+ T细胞通过磁珠分选分离。树突状细胞（DC）由单核细胞在GM-CSF和IL-4的培养下培养7天生成，然后用IALYLQQNW（10 μg/mL）脉冲刺激，并用TNF-α、IL-6、IL-1β和PGE2进行成熟。将T细胞与经肽脉冲处理的DC以10:1的比例在含10%人AB血清的RPMI培养基中，加入IL-7（10 ng/mL）和IL-15（5 ng/mL）进行共培养14天，并在第7天进行再次刺激。扩增的CTL经特异性检测后，以1 × 10⁶至1 × 10⁸个细胞/kg的剂量输注给患者。患者监测包括ELISpot检测、四聚体染色和临床反应（CT/MRI评估肿瘤大小）。通常不进行动物实验。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学性质不适用。对于四聚体或肽类库存，肽以冻干粉末形式供应，在-20℃下稳定2年，可溶于DMSO或水（1 mg/mL）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外（1-10 μg/mL）或离体实验中，IALYLQQNW 本身在所用浓度下未见毒性报道。该肽不作为药物使用，而是用作刺激物或四聚体和树突状细胞疫苗的构建单元。在过继性 T 细胞转移中，毒性与 T 细胞输注有关（细胞因子释放综合征、神经毒性、靶向脱靶效应），而非肽本身。IALYLQQNW 尚未获得 FDA 批准。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
IALYLQQNW 是一种源自 EBV-LMP1 的免疫原性肽，特异性结合 HLA-B*57:01 和 B*58:01 等位基因（约 5-10% 的白种人携带该等位基因，在某些亚洲人群中频率更高）。该肽用于免疫监测、疫苗研发以及 EBV 相关恶性肿瘤（霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌）的过继性 T 细胞治疗。它是一种研究试剂，而非治疗药物。尚未获得临床批准。仅供研究使用。
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| 分子式 |
C55H81N13O14
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|---|---|
| 分子量 |
1148.31
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| 精确质量 |
1147.603
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| CAS号 |
610268-80-9
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| PubChem CID |
172653514
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
461
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| 氢键供体(HBD)数目 |
15
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| 可旋转键数目(RBC) |
35
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| 重原子数目 |
82
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| 分子复杂度/Complexity |
2230
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| 定义原子立体中心数目 |
10
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| SMILES |
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)O)N
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| InChi Key |
AJGRAIOAMJTVQZ-CVJSAKJISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C55H81N13O14/c1-8-29(6)46(59)54(80)61-30(7)47(73)64-38(21-27(2)3)51(77)66-40(23-31-13-15-33(69)16-14-31)52(78)65-39(22-28(4)5)50(76)63-36(17-19-43(56)70)48(74)62-37(18-20-44(57)71)49(75)67-41(25-45(58)72)53(79)68-42(55(81)82)24-32-26-60-35-12-10-9-11-34(32)35/h9-16,26-30,36-42,46,60,69H,8,17-25,59H2,1-7H3,(H2,56,70)(H2,57,71)(H2,58,72)(H,61,80)(H,62,74)(H,63,76)(H,64,73)(H,65,78)(H,66,77)(H,67,75)(H,68,79)(H,81,82)/t29-,30-,36-,37-,38-,39-,40-,41-,42-,46-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-amino-3-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~3.33 mg/mL (~2.90 mM; with ultrasonication)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8708 mL | 4.3542 mL | 8.7084 mL | |
| 5 mM | 0.1742 mL | 0.8708 mL | 1.7417 mL | |
| 10 mM | 0.0871 mL | 0.4354 mL | 0.8708 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
EBNA-1 (386–405 aa)
EBV-IN-1
Valerianol
Methyl lucidenate D
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