QL9

目录号: V32541 纯度: ≥98%
QL9 是一种针对 2C T 细胞受体 (TCR) 的高亲和力同种抗原。
QL9 CAS号: 159646-83-0
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
100mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
QL9 是一种高亲和力同种异体抗原,靶向 2C T 细胞受体 (TCR)。
QL9(CAS 159646-83-0)是一种合成的9肽,序列为Gln-Leu-Ser-Pro-Phe-Pro-Phe-Asp-Leu (QLSPFPFDL)。QL9来源于2-酮戊二酸脱氢酶,属于所有H-2d抗原呈递细胞(APC)的内源性肽库,并且是2C T细胞受体(TCR)的高亲和力同种异体抗原。该肽的分子式为C52H74N10O14,分子量为1063.21,由于其序列明确且作为模型抗原肽发挥着关键作用,因此在免疫学和生物化学研究中备受关注。
生物活性&实验参考方法
靶点
MHC class I Ld molecules and the 2C T-cell receptor (TCR). QL9 is a high-affinity alloantigen for the 2C T-cell receptor. The peptide binds to MHC class I Ld molecules and is presented to 2C TCR transgenic T cells. QL9 binding to MHC Ld is influenced by the majority of peptide side chains, distributed across the entire length of the peptide. It acts as a strong and specific agonist when bound to Kb and Ld, respectively.
体外研究 (In Vitro)
小鼠T细胞克隆2C识别两种不同的主要组织相容性复合体(MHC)配体:自身MHC Kb和同种异体MHC Ld。两种不同的肽段SIY(SIYRYYGL)和QL9(QLSPFPFDL)分别与Kb和Ld结合时,均能发挥强效且选择性激动剂的作用。QL9与MHC Ld的结合受肽段上大部分侧链的影响,这些侧链分散在整个肽段上。对这两个系统(尤其是QL9-Ld)的研究结果表明,肽段中引入了多个单氨基酸残基取代,以增强其与MHC的结合,从而提高其疫苗接种潜力。但由于这些取代同时影响T细胞受体(TCR)的结合,可能会降低T细胞的反应性。我们进行了AT细胞活化实验,以确定肽段SIY和QL9残基对T细胞活性的影响[2]。
在体外,QL9 用于刺激 T 细胞活化实验中的 2C TCR 转基因 T 细胞。该肽与 MHC I 类 Ld 分子结合,并被 2C TCR 识别,从而激活 T 细胞,促进其增殖和细胞因子产生。它常用于 ELISPOT 实验、细胞内细胞因子染色 (ICS) 和四聚体染色,以定量分析抗原特异性 T 细胞反应。QL9 源自 2-酮戊二酸脱氢酶,属于所有 H-2d 抗原呈递细胞 (APC) 的内源性肽库。
体内研究 (In Vivo)
在体内,QL9 被用于小鼠模型中研究 T 细胞对同种异体抗原的反应,以及用于移植和自身免疫模型。给予该肽(通常与佐剂联合使用)可诱导 H-2d 小鼠产生抗原特异性 CD8+ T 细胞反应。该肽还用于过继转移实验,即将 2C TCR 转基因 T 细胞转移至受体小鼠体内,随后进行肽免疫,以研究 T 细胞的扩增、分化和记忆形成。它也被用于同种异体移植排斥模型。
酶活实验
体外肽-MHC结合试验用于检测QL9肽与H-2Ld MHC I类分子的亲和力。该试验使用纯化的H-2Ld分子(或表达H-2Ld的细胞系)和荧光标记的参考肽。将不同浓度的QL9与H-2Ld分子和β2-微球蛋白孵育。平衡后,通过ELISA或荧光偏振法检测结合的肽。根据竞争曲线计算肽的结合亲和力(IC50或Kd)。或者,也可以使用T2细胞系,通过流式细胞术检测肽-MHC复合物的稳定性。
细胞实验
使用 QL9 进行体外 T 细胞活化实验,所用细胞为脾细胞或来自 2C TCR 转基因小鼠的纯化 CD8+ T 细胞。将细胞与不同浓度的肽(通常为 0.001-10 μg/mL)在含有布雷菲德菌素 A 或莫能菌素的培养基中培养 2-6 小时,用于检测细胞因子。通过细胞内细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-2)染色结合流式细胞术来检测 T 细胞活化。或者,使用 ELISPOT 实验来计数肽特异性 IFN-γ 产生细胞。CFSE 稀释实验用于检测培养 3-5 天后肽诱导的 T 细胞增殖。
动物实验
QL9 的体内小鼠研究在 H-2d 小鼠(例如 BALB/c 小鼠)中进行。免疫时,将肽(通常为 10-100 μg)乳化于佐剂(例如 CFA、IFA 或 CpG)中,通过皮下或腹腔注射给药。为了追踪 T 细胞,将 2C TCR 转基因 T 细胞用 CFSE 或细胞示踪剂标记,然后过继转移到受体小鼠体内。之后,用肽免疫小鼠或用同种异体抗原攻击小鼠。收集脾脏和淋巴结,进行流式细胞术分析,以检测 T 细胞的扩增、活化和分化。
药代性质 (ADME/PK)
QL9 的药代动力学特性具有肽抗原的典型特征。该肽的分子量为 1063.21,可溶于水和二甲基亚砜 (DMSO)。通常情况下,QL9 以粉末形式储存于 -20℃,可保存长达 3 年;或以溶液形式储存于 -80℃,可保存长达 1 年。由于 QL9 是一种研究用肽,通常不进行药代动力学研究,因为它被用作抗原而非治疗剂。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
QL9仅供研究用途,不可用于人体治疗。作为一种短肽抗原,在小鼠研究中,其在免疫原性剂量下通常耐受性良好。处理肽类时应遵循标准安全预防措施。文献中尚未报道该研究用肽具有显著毒性。
参考文献
[1]. Speir JA, et al. Structural basis of 2C TCR allorecognition of H-2Ld peptide complexes. Immunity. 1998 May;8(5):553-62.
[2]. Bowerman NA, et al. Different strategies adopted by K(b) and L(d) to generate T cell specificity directed against their respective bound peptides. J Biol Chem. 2009 Nov 20;284(47):32551-61
其他信息
QL9是一种用于免疫学研究的研究级合成肽。它是由2-酮戊二酸脱氢酶衍生的9个氨基酸肽,序列为QLSPFPFDL。QL9是2C T细胞受体的高亲和力同种异体抗原,属于所有H-2d抗原呈递细胞(APC)的内源性肽库。它用于研究T细胞识别、TCR信号传导和同种异体反应性。尚未获准用于临床。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C52H74N10O14
分子量
1063.20257329941
CAS号
159646-83-0
相关CAS号
QL9 TFA
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9406 mL 4.7028 mL 9.4056 mL
5 mM 0.1881 mL 0.9406 mL 1.8811 mL
10 mM 0.0941 mL 0.4703 mL 0.9406 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们