| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在H1299和MDA-MB231细胞中，R162处理抑制GDH1活性导致细胞内富马酸水平降低、GPx活性降低、ROS水平升高以及细胞增殖减少。甲基-α-酮戊二酸（M-α-KG）处理和抗氧化剂NAC处理验证了这些效应。R162抑制人类肿瘤细胞的生长和增殖[1]。
酶抑制：R162是GDH1酶活性的强效抑制剂。它被鉴定为一种紫红素类似物，由于其烯丙基基团而具有更高的细胞渗透性。使用纯化的 GDH1 蛋白进行的体外 GDH 活性测定表明，R162 能有效抑制 GDH1，Ki 值为 1.9 ± 0.26 μM [1] 。 - 结合机制：热熔解曲线分析表明，用浓度递增的 R162 孵育 GDH1 会以剂量依赖的方式提高熔解温度 (Tm)，表明存在直接结合。 Lineweaver-Burk作图分析表明，R162作为GDH1的混合模型抑制剂发挥作用[1]。 - 细胞效应 - GDH活性：用R162处理癌细胞（H1299和MDA-MB231）后，线粒体GDH活性显著降低，ROS水平升高，与GDH1敲低后观察到的效应相似[1]。 - 细胞效应 - 代谢物：R162处理降低了癌细胞内富马酸水平，并减弱了GPx（谷胱甘肽过氧化物酶）活性[1]。 - 细胞效应 - ROS：R162处理增加了癌细胞内活性氧（ROS）水平，而用甲基-α-酮戊二酸（细胞可渗透的GDH1产物）或抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸处理可显著降低ROS水平。 （NAC）[1] . - 抗增殖作用：R162显著降低了一系列人类癌细胞系的细胞活力，包括肺癌细胞（H1299、A549）、乳腺癌细胞（MDA-MB231、SKBR3）和白血病细胞（HEL、KG1a、Molm14、K562）。相反，R162 对包括 HaCaT（角质形成细胞）、MRC-5（胎肺成纤维细胞）和 HFF（包皮成纤维细胞）在内的非恶性增殖性人类细胞的细胞活力没有影响[1]。 - 原代患者细胞：R162 处理降低了髓系白血病（AML 和 CML）患者原代白血病细胞的细胞活力，但对健康人供体外周血单核细胞的细胞活力没有影响[1]。 - 挽救实验：甲基-α-酮戊二酸 (1 mM) 或 N-乙酰半胱氨酸 (3 mM) 处理显著挽救了 R162 对富马酸水平、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 活性、活性氧 (ROS) 水平和细胞增殖的影响，证实这些影响是通过抑制谷胱甘肽脱氢酶 1 (GDH1) 介导的[1]。 |
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| 体内研究 (In Vivo) |
R162（30 mg/kg/d，腹腔注射）未改变异种移植模型中构建的血液学参数，也未导致载体组和 R162 治疗组之间出现显著的组织病理学变化。R162（20 mg/kg/d）成功抑制了异种移植裸瘤中的 GDH1 活性，与对照组小鼠相比，显著降低了小鼠的肿瘤生长和体积[1]。
毒性研究：在初步的体内毒性研究中，R162以 30 mg/kg/d 的剂量腹腔注射给小鼠，连续 30 天。与载体对照组相比，长期R162治疗未导致组织病理学发生显著改变，也未改变全血细胞计数或造血功能，表明其体内毒性极低[1] 。 - 异种移植瘤模型：将H1299肺癌细胞异种移植到裸鼠体内。注射后一天，将小鼠分为两组（每组n=8），分别腹腔注射R162（20 mg/kg/天）或对照DMSO，持续35天。与对照组小鼠相比，R162 治疗显著降低了肿瘤生长和肿瘤体积[1] 。 - 肿瘤药效学效应：R162 有效抑制了异种移植裸鼠切除肿瘤中的 GDH1 活性，证实了体内靶点结合[1] 。 |
| 酶活实验 |
GDH活性测定：通过监测NADPH的氧化（340 nm处吸光度的降低）来测定GDH酶活性。反应混合物包含50 mM三乙醇胺（pH 8.0）、100 mM乙酸铵、100 μM NADPH、2.6 mM EDTA和20 μg总细胞裂解物或100 ng纯化的GDH1。加入α-酮戊二酸[1]启动反应。
- 热变性测定：使用蛋白质热变性染料试剂盒进行热变性测定。将10 μM纯化的GDH与不同浓度的R162孵育。使用实时荧光定量PCR系统记录荧光信号，并使用Protein Thermal Shift软件v1.0 [1]分析数据。 - 酶动力学：将2 μM纯化的GDH1与不同浓度的R162在50 mM Tris-Cl缓冲液（pH 7.5）中孵育。通过结合实验测定固有色氨酸荧光（激发波长：280 nm/发射波长：350 nm）。使用Prism 6进行非线性回归分析以计算解离常数（Kd）。通过GDH活性测定，使用不同浓度的底物α-KG来确定抑制常数（Ki）[1]。 - GPx活性测定：使用Biovision公司提供的商业试剂盒，按照制造商的说明测定谷胱甘肽过氧化物酶的酶活性[1]。 |
| 细胞实验 |
细胞培养：H1299、A549、HEL、KG1a、Molm14 和 K562 细胞培养于含 10% FBS 的 RPMI 1640 培养基中。293T、MDA-MB231、SKBR3、HaCaT、HFF 和 MRC-5 细胞培养于含 10% FBS 的 DMEM 培养基中 [1]。
- 细胞增殖/活力检测：将 5×10⁴ 个贴壁细胞或 1×10⁵ 个白血病细胞接种于 6 孔板中。用不同浓度的 R162 处理细胞，并使用 TC10 自动细胞计数仪通过台盼蓝排除法测定细胞数量 [1]。 - 细胞内 ROS 测定：使用羧基-H₂DCFDA（Invitrogen）染色细胞测定细胞内总 ROS。将 2×10⁵ 个细胞与 10 μM 羧基-H₂DCFDA 在 37°C 下孵育 30 分钟，洗涤后进行流式细胞术分析 [1]。 - 线粒体 ROS 测定：使用特异性线粒体 H₂O₂ 探针 MitoPY1 测定线粒体 ROS 水平。将 2×10⁵ 个细胞与 10 μM MitoPY1 在 37°C 下孵育 30 分钟，然后进行流式细胞术分析 [1]。 - 细胞内代谢物测定：使用商业试剂盒（Biovision）测定细胞内富马酸水平。将 2×10⁶ 个细胞在 PBS 中匀浆，使用 10kD Amicon Ultra 超滤离心管去除蛋白质，并将含有代谢物的流出液用于测量 [1] 。 - 原代患者细胞检测：用 R162 处理来自髓系白血病患者的原代白血病细胞和来自健康供体的外周血单核细胞，并评估细胞活力 [1] 。 |
| 动物实验 |
毒性研究：**将R162以30 mg/kg/天的剂量腹腔注射给小鼠，连续30天。载体对照组注射50% DMSO的PBS溶液。30天后，进行组织病理学分析和全血细胞计数以评估毒性[1]
。 - **异种移植研究：**将1×10⁷个H1299细胞皮下注射到裸鼠（无胸腺nu/nu，雌性，4-6周龄）体内。注射后一天，将小鼠分为两组（每组n=8），分别腹腔注射R162（20 mg/kg/天）或对照DMSO，连续35天。通过测量两个互相垂直的直径记录肿瘤生长情况，并使用公式4π/3 × (宽度/2)² × (长度/2)计算肿瘤大小。在实验终点，收集肿瘤并称重。采用 Ki-67 免疫组化染色法测定肿瘤增殖情况 [1] 。 - **肿瘤中 GDH1 活性：**切除的肿瘤样本通过蛋白质印迹法分析 GDH1 蛋白表达，并使用 GDH 活性测定法检测 GDH 酶活性 [1] 。 毒性研究：将 R162 以 30 mg/kg/天的剂量腹腔注射给小鼠，连续 30 天。载体对照组注射 50% DMSO 的 PBS 溶液。30 天后，进行组织病理学分析和全血细胞计数以评估毒性 [1] 。 - 异种移植研究：将 1×10⁷ 个 H1299 细胞皮下注射到裸鼠（无胸腺 nu/nu，雌性，4-6 周龄）体内。注射后一天，将小鼠分为两组（每组 n=8），分别腹腔注射 R162（20 mg/kg/天）或对照 DMSO，连续 35 天。通过测量两个互相垂直的直径记录肿瘤生长情况，并使用公式 4π/3 × (宽度/2)² × (长度/2) 计算肿瘤大小。在实验终点，取出肿瘤并称重。采用 Ki-67 免疫组化染色检测肿瘤增殖情况 [1]。- 肿瘤中 GDH1 的活性：切除的肿瘤样本通过蛋白质印迹法分析 GDH1 蛋白表达，并使用 GDH 活性测定法检测 GDH 酶活性 [1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
细胞渗透性：R162 被鉴定为一种具有改善的细胞渗透性的紫红素类似物，这归功于其烯丙基基团，使其比母体化合物紫红素更适合用于细胞和体内研究[1]
。 - 提供的文本中未描述详细的药代动力学参数（半衰期、生物利用度等）[1] 。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外选择性：R162 对包括 HaCaT（角质形成细胞）、MRC-5（胎肺成纤维细胞）和 HFF（包皮成纤维细胞）在内的非恶性增殖性人细胞的细胞活力没有影响，表明其对癌细胞具有选择性[1]。
- 原代细胞毒性：R162 对健康人供体外周血单核细胞的细胞活力没有影响，但能有效降低患者原代白血病细胞的活力[1]。 - 体内毒性：长期 R162 治疗（30 mg/kg/天，持续 30 天）未导致组织出现显著的组织病理学变化，也未改变全血细胞计数或造血功能，表明其体内毒性极低[1]。 - 治疗窗口：该化合物在抑制肿瘤生长方面显示出良好的疗效。每日剂量为 20 mg/kg，每日剂量为 30 mg/kg，未见明显毒性，表明治疗窗口良好[1] 。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-烯丙基-1-羟基-9,10-蒽醌是一种单羟基蒽醌化合物，其中9,10-蒽醌1位和2位的氢原子分别被羟基和烯丙基取代。它是一种EC 1.4.1.3 {谷氨酸脱氢酶[NAD(P)(+)]}抑制剂。
化学名称和来源：R162是紫红素类似物，是从包含2000种FDA批准的小分子化合物的化合物库中筛选出来的。它是通过添加烯丙基基团而开发的，是一种细胞渗透性更强的紫红素衍生物[1]。 - 发现策略：R162是通过一系列旨在筛选GDH1选择性抑制剂的筛选实验发现的。最初的先导化合物紫红素在体外对GDH1酶活性表现出显著的抑制作用，但细胞渗透性差。结构-活性关系研究鉴定出紫红素类似物R162是一种强效的GDH1抑制剂，且具有更高的细胞渗透性[1] 。 - 作用机制：R162直接与GDH1结合并抑制其酶活性。这导致细胞内α-酮戊二酸和富马酸水平降低，进而降低谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性，提高活性氧（ROS）水平，最终抑制癌细胞增殖和肿瘤生长。这些效应与在 GDH1 敲低细胞中观察到的效应一致 [1] 。 - 选择性：与先前报道的 GDH1 抑制剂 EGCG（表没食子儿茶素没食子酸酯）不同，R162 特异性抑制 GDH1，而不影响这些其他酶，因此选择性更高 [1] 。EGCG 同时抑制其他 NADPH 依赖性酶，例如 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (6PGD) 和富马酸水合酶 (FH)。 - 临床应用潜力：R162 在体外和体内均显示出抑制癌细胞增殖和肿瘤生长的良好疗效，且毒性极低。它还能有效降低患者原代白血病细胞的活力。这些发现初步证实了 GDH1 是一个有前景的治疗靶点，而 R162 是一种潜在的先导化合物，可用于治疗高度依赖谷氨酰胺代谢的人类癌症[1]。 - 动物研究给药方案：毒性研究：腹腔注射 30 mg/kg/天，持续 30 天。疗效研究：腹腔注射 20 mg/kg/天，持续 35 天[1]。 |
| 分子式 |
C17H12O3
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|---|---|
| 分子量 |
264.28
|
| 精确质量 |
264.078
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| CAS号 |
64302-87-0
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| PubChem CID |
4412951
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
459.0±34.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
245.5±22.2 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.659
|
| LogP |
4.99
|
| tPSA |
54.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
428
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C=CCC1=C(C2=C(C=C1)C(=O)C3=CC=CC=C3C2=O)O
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| InChi Key |
IMUBGIOLZQTIGI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H12O3/c1-2-5-10-8-9-13-14(15(10)18)17(20)12-7-4-3-6-11(12)16(13)19/h2-4,6-9,18H,1,5H2
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| 化学名 |
1-hydroxy-2-prop-2-enylanthracene-9,10-dione
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| 别名 |
R162 R-162 R 162
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~37.84 mM)
Ethanol : ~1 mg/mL (~3.78 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7839 mL | 18.9193 mL | 37.8387 mL | |
| 5 mM | 0.7568 mL | 3.7839 mL | 7.5677 mL | |
| 10 mM | 0.3784 mL | 1.8919 mL | 3.7839 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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