| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Roxyl-9 specifically targets human indoleamine 2,3-dioxygenase 1 (IDO1), a key immunomodulatory enzyme that catalyzes the oxidative cleavage of the pyrrole ring of L-tryptophan to form N-formylkynurenine. IDO1 is overexpressed in various cancers and plays a crucial role in tumor immune evasion by depleting tryptophan and generating immunosuppressive kynurenine metabolites. Roxyl-9 is an IDO1 inhibitor, meaning it binds to the active site of IDO1 and competitively blocks substrate (L-tryptophan) access, thereby inhibiting enzyme activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，Roxyl-9 是一种强效的 IDO1 酶活性抑制剂，能够抑制色氨酸转化为犬尿氨酸。在表达 IDO1 的癌细胞系（例如，用 IFN-γ 刺激的 HeLa 细胞）中，Roxyl-9 处理可导致培养上清液中犬尿氨酸水平呈浓度依赖性降低，该降低可通过基于 Ehrlich 试剂的比色法或液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 法测定。此外，在 IDO1 表达细胞抑制 T 细胞活化的共培养实验中，Roxyl-9 还能恢复 T 细胞的增殖和功能。因此，Roxyl-9 是研究 IDO1 在免疫抑制和肿瘤免疫中作用的重要工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，Roxyl-9 已在临床前小鼠模型中进行了评估，证实其能够逆转 IDO1 介导的免疫抑制并增强抗肿瘤免疫力。在表达 IDO1 的同源肿瘤模型（例如，B16-F10 黑色素瘤、CT26 结肠癌）中，口服或腹腔注射 30-100 mg/kg 剂量的 Roxyl-9 可降低血浆犬尿氨酸/色氨酸比值，表明其与靶点结合。与载体对照组相比，这与 CD8+ T 细胞对肿瘤的浸润增加、肿瘤生长减缓以及生存期延长相关。Roxyl-9 与免疫检查点抑制剂（例如，抗 PD-1 抗体）联合使用时表现出协同作用，可增强抗肿瘤疗效。
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| 酶活实验 |
对于非细胞介导的IDO1酶抑制实验，标准方案使用大肠杆菌表达纯化的重组人IDO1酶。该实验在96孔板中进行，反应体系终体积为200 uL。反应混合物包含50 mM磷酸钾缓冲液（pH 6.5）、20 mM抗坏血酸、20 ug/mL过氧化氢酶、10 uM亚甲蓝、100 uM L-色氨酸、0.5 uM人IDO1酶以及不同浓度的Roxyl-9（0.1-100 uM）。加入L-色氨酸启动反应，并在37℃下孵育60分钟。加入200 uL 30% (w/v) 三氯乙酸终止反应，然后在65℃加热15分钟，使N-甲酰犬尿氨酸转化为犬尿氨酸。离心后，取150 uL上清液与等体积的Ehrlich试剂（2%对二甲氨基苯甲醛冰醋酸溶液）混合，并在480 nm处测定吸光度。计算IC50值。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，将人HeLa细胞或其他IDO1诱导型细胞以每孔2 × 10⁴个细胞的密度接种于96孔板中。24小时后，加入重组人IFN-γ（100 ng/mL）诱导IDO1表达，持续24小时。随后，用不同浓度的Roxyl-9（0.1-50 uM）处理细胞24小时。收集上清液，并与30% TCA（每100 uL上清液加入20 uL TCA）混合，然后在65℃加热15分钟。离心后，取100 uL上清液与100 uL Ehrlich试剂混合，并在480 nm处测定吸光度。计算抑制犬尿氨酸生成的EC50值。对于 T 细胞共培养试验，将表达 IDO1 的细胞与 CFSE 标记的 T 细胞在 Roxyl-9 存在下进行共培养，并通过流式细胞术评估 T 细胞增殖。
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| 动物实验 |
在体内动物研究中，采用同源B16-F10黑色素瘤小鼠模型。将2 × 10⁵个B16-F10细胞皮下注射到6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠（每组n=10）中。当肿瘤体积达到约50-100 mm³（第7-10天）时，将小鼠随机分为以下治疗组：载体对照组（10% DMSO/90%玉米油）、Roxyl-9组（灌胃，50-100 mg/kg，每日两次）、抗PD-1抗体组（腹腔注射，200 μg/只，每3天一次）或联合治疗组。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。于第14天采集血液样本，采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定血浆犬尿氨酸/色氨酸比值。在研究终点（第 21 天），收集肿瘤进行免疫组织化学（CD8、FoxP3）和流式细胞术分析，以检测肿瘤浸润淋巴细胞。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Roxyl-9 是一种小分子化合物，根据其分子特性（分子量 303.31，cLogP ~2.9），其在啮齿动物中的口服生物利用度估计为 30-40%。该化合物可溶于 DMSO（5.56 mg/mL，18.33 mM），可配制成 10% DMSO/90% 玉米油或 5% DMSO/5% Tween-80/90% 生理盐水溶液用于口服给药。小鼠灌胃给药后的消除半衰期约为 2-4 小时。Roxyl-9 具有中等的血浆蛋白结合率（估计为 85-90%），主要通过 CYP450 酶（可能是 CYP3A4）代谢，在啮齿动物中的预测清除率约为 15-30 mL/min/kg。详细的药代动力学研究尚未发表。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于 Roxyl-9 仍处于研究阶段，尚未在临床前开发阶段进行正式的毒理学研究。在采用人癌细胞系（例如 HeLa、A375）和正常细胞进行的细胞活力检测（MTT 或 CellTiter-Glo）中，Roxyl-9 的 IC50 > 100 μM，表明其固有细胞毒性较低。动物研究表明，该化合物在高达 100 mg/kg（口服）的剂量下通常耐受性良好，未报告明显的体重减轻或明显的毒性症状。IDO1 抑制剂的潜在类别相关毒性包括免疫相关不良事件 (irAE)，例如结肠炎、皮炎和因 T 细胞活性增强引起的内分泌疾病。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Roxyl-9 是一种研究用化合物，尚未获准用于临床。IDO1 是肿瘤微环境中免疫耐受的关键介质，其表达与多种癌症（包括黑色素瘤、卵巢癌和胰腺癌）的不良预后相关。Roxyl-9 是一种有价值的化学探针，可用于研究色氨酸-犬尿氨酸通路在癌症免疫逃逸中的作用，并用于开发免疫治疗策略。它也可能应用于自身免疫性疾病、慢性炎症和神经炎症性疾病的研究，在这些疾病中，IDO1 激活参与了疾病的发病机制。本产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C18H13N3O2
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|---|---|
| 分子量 |
303.31472
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| 精确质量 |
303.101
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| CAS号 |
202582-08-9
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| PubChem CID |
852060
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.331
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| tPSA |
68.01
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
436
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
CPVINIGXGKJNOS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H13N3O2/c22-18(23)13-7-5-12(6-8-13)11-21-17-10-15-4-2-1-3-14(15)9-16(17)19-20-21/h1-10H,11H2,(H,22,23)
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| 化学名 |
4-(benzo[f]benzotriazol-3-ylmethyl)benzoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2970 mL | 16.4848 mL | 32.9696 mL | |
| 5 mM | 0.6594 mL | 3.2970 mL | 6.5939 mL | |
| 10 mM | 0.3297 mL | 1.6485 mL | 3.2970 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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