| 规格 | 价格 | |
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| 1mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Negative analog of SB203580
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| 体外研究 (In Vitro) |
黑色素的合成或黑色素生成受多种信号转导途径的平衡调节。在这些途径中，p38 MAPK信号传导被发现参与应激诱导的黑素生成，并被α-黑素细胞刺激激素（α-MSH）和紫外线照射激活。先前的研究表明，α-MSH刺激的黑色素生成可以通过用吡啶基咪唑化合物SB203580阻断p38 MAPK活性来抑制。与此一致，我们观察到吡啶基咪唑（SB203580和SB202190）抑制B16黑色素瘤细胞中基础和α-MSH诱导的黑色素生成。然而，SB202474也抑制了黑色素合成诱导，其不具有抑制p38 MAPK活性的能力，并且在p38 MAPK研究中通常用作阴性对照化合物。此外，小干扰RNA实验也证实了p38激酶途径不受吡啶基咪唑化合物抑制黑色素生成的影响。干扰p38 MAPK的表达出人意料地刺激黑色素生成和酪氨酸酶家族蛋白的表达。尽管p38促进黑色素生成酶降解的分子机制仍有待确定，但在用p38特异性小干扰RNA转染的细胞中，与蛋白酶体特异性抑制剂MG132共同处理和酪氨酸酶泛素化的相对降低证明了泛素-蛋白酶体途径的参与[1]。
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| 酶活实验 |
酪氨酸酶测定[1]
酪氨酸酶活性是通过测量左旋多巴氧化率来估计的，如前所述，有轻微的修改。简单地说，用p38特异性siRNA或对照siRNA在含有2% （v/v）胎牛血清±α-MSH的Dulbecco改良Eagle培养基中处理细胞72 h。最后，用含有1% Triton X-100的磷酸盐缓冲液（pH 6.8）溶解细胞。冻融破坏细胞，裂解液10000 × g离心澄清10 min。蛋白定量后，用裂解缓冲液调整蛋白浓度，每个裂解液80 μl（每个裂解液含有相同量的蛋白）加入96孔板孔中，每孔加入20 μl 5 mm l-DOPA。37℃下20分钟孵育，在475 nm处分光光度测定吸光度。测量重复了5次。 |
| 细胞实验 |
细胞培养和试剂[1]
B16-F0小鼠黑色素瘤细胞购自美国类型培养库，保存在Dulbecco改良Eagle培养基中，加入4mm l-谷氨酰胺+ 7%热灭活胎牛血清和抗生素， 37°C， 5% CO2气氛中。在诱导研究中，将细胞涂膜，24 h后取出培养基，在不含酚红的情况下，将细胞培养于Dulbecco's modified Eagle's培养基中，加入2%热灭活胎牛血清和抗生素（含或不含药物处理）。从几个独立的高加索人包皮中分离的正常人类黑素细胞（NHM）在含有人类黑素细胞生长补充剂的M-254培养基中维持，并用于2-6代。NHM在分析前用化合物处理5天，因为这些细胞的黑色素形成过程比B16黑色素瘤细胞要长得多。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MAPK是一类进化上高度保守的酶，连接细胞表面受体和细胞内的关键调控靶点。p38 MAPK是一种应激调节蛋白激酶，与c-Jun N端激酶和细胞外信号调节激酶同属MAPK超家族。研究表明，p38 MAPK在调控细胞对外部应激信号的反应中发挥着关键作用。它可被多种刺激激活，包括紫外线、辐射、热休克、渗透压应激和促炎细胞因子。药理抑制剂的出现加速了对p38 MAPK在多种细胞过程中作用的研究，这些过程包括增殖、分化、凋亡、细胞衰老、转录调控和细胞骨架重组。两种吡啶基咪唑化合物SB202190和SB203580已被证实能够抑制p38 MAPK，但它们对细胞外信号调节激酶和c-Jun N端激酶等相关激酶没有影响。相反，对p38没有影响的SB-202474通常作为阴性对照，用于在使用SB203580和SB202190研究p38 MAPK的作用时。这些研究零星地表明，吡啶基咪唑化合物除了p38之外，还具有其他意想不到的靶点，因此，它们被认为特异性太低，无法用于评估p38 MAPK的生理功能。
许多研究报道了p38 MAPK参与黑色素生成分化。然而，p38 MAPK在调控黑色素生成中的作用尚未完全阐明。我们观察到吡啶基咪唑类化合物抑制了基础黑色素生成和α-MSH诱导的黑色素生成。起初，我们怀疑p38 MAPK通路可能参与了黑色素生成的抑制。然而，SB-202474（一种不抑制p38 MAPK活性的化合物，常被用作p38 MAPK研究的阴性对照化合物）也抑制了黑色素合成的诱导。此外，siRNA实验也证实了吡啶基咪唑类化合物对黑色素生成的抑制作用与p38激酶通路无关。事实上，p38 MAPK siRNA反而刺激了黑色素生成。基于这些结果，我们得出结论：p38 MAPK通路不参与SB202190和SB203580的抑制作用，并且吡啶基咪唑类化合物除了p38 MAPK之外，还可能存在其他对色素沉着至关重要的靶分子。先前的研究描述了使用 p38 抑制剂 SB203580 抑制 p38 活性可抑制黑色素生成。我们担心的是，没有一项关于黑色素生成的研究将 SB-202474 作为阴性对照或将 siRNA 作为阳性对照。[1] |
| 分子式 |
C17H17N3O
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|---|---|
| 分子量 |
279.34
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| 精确质量 |
279.137
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| 元素分析 |
C, 73.10; H, 6.13; N, 15.04; O, 5.73
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| CAS号 |
172747-50-1
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| PubChem CID |
5162
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
520.7±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
183.9±20.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.597
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| LogP |
4.35
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| tPSA |
50.8Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
311
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCC1=C(C2=CC=NC=C2)NC(=N1)C3=CC=C(C=C3)OC
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| InChi Key |
MYKGURNPAUBQLJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17N3O/c1-3-15-16(12-8-10-18-11-9-12)20-17(19-15)13-4-6-14(21-2)7-5-13/h4-11H,3H2,1-2H3,(H,19,20)
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| 化学名 |
4-[5-ethyl-2-(4-methoxyphenyl)-1H-imidazol-4-yl]pyridine
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| 别名 |
SB-202474; SB202474; sb 202,474; 172747-50-1; 4-[5-ethyl-2-(4-methoxyphenyl)-1H-imidazol-4-yl]pyridine; SB-202474; CHEMBL278724; 4-(5-ethyl-2-(4-methoxyphenyl)-1H-imidazol-4-yl)pyridine; SB 202474
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5799 mL | 17.8993 mL | 35.7987 mL | |
| 5 mM | 0.7160 mL | 3.5799 mL | 7.1597 mL | |
| 10 mM | 0.3580 mL | 1.7899 mL | 3.5799 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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