| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Schisandrone targets α-hemolysin (Hla) expression in Staphylococcus aureus. It down-regulates the transcription of hla, agrA, and RNAIII genes [2].
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
五味子酮对金黄色葡萄球菌 USA300 的生长没有影响；其最低抑菌浓度 (MIC) 为 512 µg/mL。生长曲线显示，浓度高达 32 µg/mL 时，五味子酮对细菌生长没有影响 [2]。五味子酮以剂量依赖的方式显著降低了金黄色葡萄球菌 USA300 的溶血活性。在 4 µg/mL 时，溶血活性降至 89.11±1.31%；在 32 µg/mL 时，溶血活性降至 1.79±0.51%。对金黄色葡萄球菌Newman株（溶血活性在32 µg/mL时降至40.52±1.03%）和SA1B3G株（溶血活性在32 µg/mL时降至11.50±0.62%）也观察到了类似的抑制作用[2]。
五味子酮在中和试验中并未直接中和Hla诱导的溶血（无显著影响）[2]。 五味子酮不影响Hla七聚体的形成（寡聚化试验显示，浓度增加至64 µg/mL时，七聚体条带无变化）[2]。 细胞热位移试验（CETSA）显示，随着温度升高，五味子酮处理组和DMSO组之间Hla蛋白含量无显著差异，表明五味子酮不与Hla直接结合[2]。 蛋白质印迹分析显示：五味子酮以剂量依赖的方式（4-32 µg/mL）降低了金黄色葡萄球菌 USA300 上清液中 Hla 蛋白的表达[2]。RT-qPCR 显示，五味子酮以剂量依赖的方式显著下调了 hla、RNAIII 和 agrA 的转录水平（P<0.001）[2]。五味子酮（0-32 µg/mL）对 A549 细胞没有明显的细胞毒性；细胞活力与 DMSO 处理的细胞接近（MTT 法）[2]。五味子酮保护 A549 细胞免受金黄色葡萄球菌引起的损伤。荧光显微镜（活/死细胞染色）显示，五味子酮浓度（4-32 µg/mL）增加可降低红色荧光（死细胞）。LDH释放试验证实了剂量依赖性保护作用（未提供具体数值）[2]。棋盘式协同试验表明，五味子酮与头孢噻呋联用可将头孢噻呋的MIC从32 µg/mL降低至2 µg/mL；FICI值为0.125，表明存在协同作用。与头孢曲松、头孢西丁、头孢噻肟酸或苯唑西林联用未观察到显著的协同作用[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠肺炎模型（C57BL/6J小鼠经鼻内感染金黄色葡萄球菌USA300）中，五味子酮治疗（40 mg/kg，每12小时皮下注射一次）提高了存活率。感染后72小时（2×10^8 CFU），感染组的存活率为10%，五味子酮治疗组为30%，五味子酮+头孢噻呋联合治疗组为60%（比单独使用五味子酮高30%）[2]。肺部细菌负荷：未经治疗的感染小鼠为8.59±0.77 log10 CFU/g；五味子酮（40 mg/kg）治疗后降至6.46±0.65 log10 CFU/g；与头孢噻呋联合用药后，菌落形成单位 (CFU) 减少至 2.98±0.60 log10 CFU/g [2]。
组织病理学检查（H&E 染色）显示，与未治疗的感染小鼠相比，五味子酮治疗可减少炎症细胞浸润和肺泡损伤；联合用药组的炎症细胞显著减少，肺泡结构相对完整 [2]。 |
| 酶活实验 |
寡聚化分析：将纯化的Hla蛋白（20 µg）与5 mM脱氧胆酸钠在PBS缓冲液中孵育，分别加入或不加入五味子酮（0-64 µg/mL），于22°C孵育25分钟。孵育后，将样品与不含β-巯基乙醇的5×蛋白上样缓冲液混合，于55°C孵育10分钟。采用8% SDS-PAGE凝胶观察五味子酮对Hla寡聚化的影响。七聚体的形成并未随五味子酮浓度的增加而发生显著变化[2]。
细胞热位移分析（CETSA）：在含有pET28a-hla质粒的大肠杆菌BL21中表达Hla蛋白。超声裂解和离心后，向蛋白上清液中加入五味子酮（32 µg/mL）或DMSO，并在37°C避光孵育1小时。样品在低温下以18,000 ×g离心20分钟。将上清液置于PCR仪中，在指定温度（25.0、48.0、52.0、53.7、56.2和58.0°C）下加热5分钟，然后立即置于冰上冷却4分钟。与5×上样缓冲液混合并煮沸5分钟后，进行12% SDS-PAGE电泳分析。五味子酮处理组和DMSO处理组的Hla含量无显著差异[2]。 中和试验：将金黄色葡萄球菌USA300上清液与不同浓度的五味子酮于37℃孵育20分钟，然后与去纤维蛋白的兔红细胞混合，继续于37℃孵育1小时。测定溶血活性。五味子酮不能直接中和Hla诱导的溶血[2]。 |
| 细胞实验 |
溶血试验：将金黄色葡萄球菌 USA300 或 Newman 的过夜培养物以 1:100 的比例接种到 TSB 培养基中，并在 37°C 下培养至 OD600=0.3。加入不同浓度的五味子酮（4-32 µg/mL），继续培养至 OD600=2.5。收集细菌上清液，并与 PBS 和脱纤维兔血混合（100 µL 上清液 + 875 µL PBS + 25 µL 血）。在 37°C 下孵育 1 小时后，离心（5000 rpm，4°C，3 分钟），在 543 nm 处测定血红蛋白释放量。五味子酮以剂量依赖的方式降低溶血活性[2]。
蛋白质印迹：将金黄色葡萄球菌USA300与不同浓度的五味子酮（4-32 µg/mL）培养至OD600=2.5。取等量的细菌培养上清液进行12% SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜，用5%脱脂奶粉封闭，与抗Hla兔多克隆抗体（1:2000）孵育2小时，再与HRP标记的羊抗兔IgG（1:8000）孵育1小时。采用ECL法显色。 Hla蛋白表达呈剂量依赖性降低[2]。 RT-qPCR：将金黄色葡萄球菌USA300培养至OD600=0.3，用五味子酮（0-32 µg/mL）处理，于37°C摇床（220 rpm）培养12小时。使用Trizol试剂提取总RNA，反转录为cDNA。以16S rRNA作为内参。采用实时荧光定量PCR分析hla、agrA和RNAIII基因的表达，循环参数为：95°C 30秒，95°C 5秒、60°C 30秒、72°C 30秒，共40个循环。采用2−ΔΔCt法计算相对倍数变化。 hla、RNAIII 和 agrA 的转录水平显著下调 (P<0.001) [2]。 MTT 细胞毒性试验：将 A549 细胞以 5×10^3 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，培养 24 小时。加入五味子酮 (4-32 µg/mL)，并在 37°C、5% CO2 条件下继续培养 24 小时。然后加入 10 µL MTT 溶液 (5 mg/mL)，孵育 4 小时。用 100 µL DMSO 溶解结晶，并在 490 nm 处测定吸光度。细胞活力与 DMSO 处理的对照组接近，表明无明显的细胞毒性 [2]。 活/死细胞和 LDH 细胞毒性试验：将 A549 细胞 (5×10^4 个细胞/孔) 接种于 24 孔板中，培养 24 小时。将金黄色葡萄球菌 USA300 (10^6 CFU/mL) 离心，弃上清，重悬于不含胎牛血清和抗生素的 1640 培养基中。然后向细胞中加入 100 µL 菌液和 400 µL 含有不同浓度五味子酮 (0-32 µg/mL) 的 1640 培养基。37°C 孵育 5 小时后，收集上清液。采用荧光显微镜（钙黄绿素/碘化丙啶）观察活/死细胞染色。在 490 nm 波长处测定乳酸脱氢酶 (LDH) 的释放量。五味子酮以剂量依赖的方式保护A549细胞免受金黄色葡萄球菌引起的损伤[2]。棋盘式协同作用试验：将不同浓度的五味子酮与不同倍比稀释的抗生素（头孢曲松、头孢噻呋、头孢西丁、头孢噻肟酸、苯唑西林）混合于96孔板中。加入金黄色葡萄球菌USA300（1×10⁵ CFU/mL），于35℃孵育16小时。测定600 nm处的吸光度。计算部分抑制浓度指数（FICI）：FICI = FIC_A + FIC_B = C_A/MIC_A + C_B/MIC_B。观察到五味子酮与头孢噻呋具有协同作用（FICI=0.125）[2]。 |
| 动物实验 |
小鼠肺部感染模型（肺炎）：将C57BL/6J小鼠（约22 g）随机分为五组（每组n=10）：金黄色葡萄球菌USA300感染组、五味子酮治疗组、头孢噻呋组、抗生素联合治疗组和未感染组。为进行生存研究，小鼠经鼻内感染金黄色葡萄球菌USA300（2×10⁸ CFU）。感染两小时后，治疗组小鼠皮下注射40 mg/kg五味子酮或等体积的PBS（含0.5% DMSO），每12小时给药一次。分别在 12 小时、24 小时、36 小时、48 小时和 72 小时监测小鼠存活率，并绘制存活曲线 (n=10) [2]。
细菌载量和组织病理学：每组小鼠（n=8）经鼻内感染金黄色葡萄球菌 USA300 (1×10^8 CFU)。24 小时后处死小鼠。取左肺并称重，在无菌生理盐水中匀浆，并通过系列稀释法在脑心浸液 (BHI) 平板上计数细菌菌落形成单位 (CFU)。右肺用 10% 福尔马林固定，石蜡包埋，切片（6 µm 厚），并用苏木精-伊红 (H&E) 染色，在光学显微镜下进行组织病理学观察 [2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
浓度高达 32 µg/mL 的五味子酮对 A549 细胞未显示出明显的细胞毒性（MTT 检测，细胞活力接近 DMSO 处理的细胞）[2]。
用 40 mg/kg 五味子酮（每 12 小时皮下注射一次）治疗小鼠未报告急性毒性或不良反应[2]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
据报道，五味子素存在于五味子（Schisandra sphenanthera）和阿里山五味子（Schisandra arisanensis）中，相关数据可供参考。
五味子酮 (C21H24O5) 分子量为 356，熔点 176-177°C，[α]D17 -32.5° (c 0.12, CHCl3)。其结构被确定为 (2S,3S,4R)-4-芳基四氢萘酮木脂素。五味子酮是从五味子（Schisandra sphenanthera）的干燥果实中分离得到的（10.5 kg 果实可提取 6.6 g 五味子酮）[1]。据报道，五味子酮具有抗氧化活性，对阿尔茨海默病有治疗作用，并且对氯胺酮诱导的大鼠皮层神经元损伤具有保护作用[2]。五味子酮的抗毒力机制涉及下调 agrA 转录，导致 RNAIII 和 hla 表达降低，从而抑制 Hla 的产生和溶血活性，而不影响细菌生长或直接与 Hla 结合[2]。五味子酮不含泛检测干扰结构（PAINS），表明其具有很强的活性和开发潜力[2]。 |
| 分子式 |
C21H24O5
|
|---|---|
| 分子量 |
356.4123
|
| 精确质量 |
356.162
|
| CAS号 |
98619-25-1
|
| PubChem CID |
14078177
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
508.2±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
180-181℃
|
| 闪点 |
176.1±23.6 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.557
|
| LogP |
4.23
|
| tPSA |
64.99
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
495
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
O=C1C2=C([H])C(=C(C([H])=C2[C@@]([H])(C2C([H])=C([H])C(=C(C=2[H])OC([H])([H])[H])OC([H])([H])[H])[C@]([H])(C([H])([H])[H])[C@]1([H])C([H])([H])[H])OC([H])([H])[H])O[H]
|
| InChi Key |
DRKPZVVNEGETTG-XAAFQQQXSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H24O5/c1-11-12(2)21(23)15-9-16(22)18(25-4)10-14(15)20(11)13-6-7-17(24-3)19(8-13)26-5/h6-12,20,22H,1-5H3/t11-,12+,20-/m1/s1
|
| 化学名 |
(2S,3S,4R)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-7-hydroxy-6-methoxy-2,3-dimethyl-3,4-dihydro-2H-naphthalen-1-one
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8058 mL | 14.0288 mL | 28.0576 mL | |
| 5 mM | 0.5612 mL | 2.8058 mL | 5.6115 mL | |
| 10 mM | 0.2806 mL | 1.4029 mL | 2.8058 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
鲑鱼精DNA
绞股蓝皂苷LI
伪金丝桃素
Trans-4-Cotininecarboxylic acid
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
