| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SOS1 activator 1 binds to a cryptic pocket on SOS1 distinct from the catalytic site, stabilizing an open conformation that enhances nucleotide exchange. The primary target is the SOS1 catalytic domain (residues 564-1049). The compound increases the affinity of SOS1 for nucleotide-free RAS and accelerates the release of GDP, promoting GTP loading. It does not directly bind RAS but acts allosterically on SOS1. Biochemical data: Kd for SOS1 = 44 nM (by surface plasmon resonance). It does not activate SOS2 (homology 65%) significantly at 1 uM. It also does not inhibit other GEFs (e.g., RasGRP1) or effectors (PI3K, RAF).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在利用重组人SOS1和KRAS4b（G12V突变体）进行的无细胞核苷酸交换实验中，SOS1激活剂1（0.1-1000 nM）可加速mant-GDP向mant-GTP的交换速率。提高交换速率的EC50为15 nM，最大效应（Vmax）在1 uM时比基础值高5倍。在1 uM SOS1激活剂1存在下，SOS1介导的核苷酸交换速率常数kex从0.02 min-¹增加到0.12 min-¹。其对SOS2的选择性高100倍。该化合物还能增强SOS1与RAS的结合，如TR-FRET测定所示（EC50 = 8 nM）。它不影响RAS本身的固有核苷酸交换速率。在KRAS突变型癌细胞系（例如HCT116 (G13D)、A549 (G12S)、MIA PaCa-2 (G12C)）中，用SOS1激活剂1（100 nM-10 uM）处理2-4小时，可使GTP结合的RAS水平（通过RAS-GTP下拉实验测定）增加2至5倍，从而导致MAPK通路（p-ERK、p-MEK）和PI3K通路（p-AKT）的瞬时激活。该效应在1小时达到峰值，并在6小时后由于SPRY和DUSP蛋白的反馈抑制而恢复至基线水平。当浓度高于1 uM时，该激活剂1仅在与MEK抑制剂联合使用时才能诱导某些KRAS突变型细胞凋亡（合成致死性）。在 KRAS 野生型细胞（例如 HEK293T）中，它也能激活 RAS，但程度较轻（2 倍）。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，对携带HCT116异种移植瘤的雌性裸鼠给予SOS1激活剂1（20 mg/kg，口服）后，1小时内肿瘤组织中RAS-GTP水平升高3倍（通过RAS-GTP ELISA测定）。然而，当与MEK抑制剂曲美替尼（0.3 mg/kg）联合使用时，这种激活作用却导致了反常的肿瘤生长抑制。在一项为期21天的联合用药研究中，SOS1激活剂1（20 mg/kg/天，口服）+曲美替尼（0.3 mg/kg/天，口服）与对照组相比，肿瘤体积减少了85%，而单独使用任一药物的效果均不显著（抑制率分别为20%和40%）。这种协同作用被认为是由RAS过度激活引起的，导致复制应激和细胞凋亡（合成致死相互作用）。在另一项研究中，单独使用 SOS1 激活剂 1（100 mg/kg）7 天后，对健康小鼠的体重或器官组织学没有显著影响。
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| 酶活实验 |
体外SOS1介导的核苷酸交换实验（荧光法）：将重组人SOS1（全长，100 nM）和KRAS4b（1 uM，负载mant-GDP——荧光GDP类似物）在交换缓冲液（20 mM HEPES pH 7.5，50 mM NaCl，5 mM MgCl2，1 mM DTT，0.05% Tween-20）中孵育。加入浓度为0.1 nM至10 uM的SOS1激活剂1。加入1 mM GTP启动反应。mant-GDP与GTP的交换导致荧光强度降低（激发波长360 nm，发射波长440 nm），在荧光酶标仪中于25℃下每10秒测量一次，持续30分钟。绘制初始速率（斜率）与化合物浓度的关系图，计算EC50值。为了进行选择性测试，SOS2 也同时进行了测试。
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| 细胞实验 |
基于细胞的RAS激活检测：将HCT116或A549细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）的McCoy's 5A或F-12K培养基中。将细胞（10 cm培养皿中汇合度达70%）在无血清培养基中培养过夜，然后用SOS1激活剂1（0.1、0.3、1、3、10 uM）于37℃处理1小时。用冰冷的裂解缓冲液（25 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl、1% NP-40、10 mM MgCl2、5%甘油、蛋白酶/磷酸酶抑制剂）裂解细胞。离心去除细胞碎片。将结合了 RAF1 RBD（Ras 结合域）GST 融合蛋白的谷胱甘肽琼脂糖珠（4℃孵育 30 分钟）用于下拉活性 GTP 结合的 RAS。洗涤琼脂糖珠，用 Laemmli 缓冲液洗脱，并用抗 RAS 抗体进行免疫印迹分析。同时对裂解液中的总 RAS 进行印迹分析。通过密度扫描法定量活性 RAS 与总 RAS 的比值。
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| 动物实验 |
小鼠异种移植联合用药研究：将HCT116细胞（5×10⁶）皮下接种于5-6周龄的雌性无胸腺裸鼠体内，细胞悬浮于Matrigel基质胶中。当肿瘤体积达到约150 mm³时，将小鼠随机分为4组（n=10）：载体组（0.5%甲基纤维素，每日口服）、SOS1激活剂1组（20 mg/kg，溶于甲基纤维素，每日口服）、曲美替尼组（0.3 mg/kg，溶于0.5% DMSO，每日口服）以及联合用药组（两种药物均用药）。给药持续21天。每3天用游标卡尺测量肿瘤体积，并记录体重。第21天，切除肿瘤，称重，并进行组织学（H&E染色、Ki67免疫组化）和药效学（RAS-GTP ELISA、p-ERK、cleaved caspase-3）分析。采集血液样本进行血浆药物浓度测定（LC-MS/MS）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠药代动力学研究（n=4）：SOS1激活剂1（20 mg/kg，口服）的血药浓度峰值（Cmax）为2.4 μM，达峰时间（Tmax）为0.5 h，曲线下面积（AUC0-24）为6.8 μM·h，半衰期（t1/2）为2.3 h，口服生物利用度为45%。血浆蛋白结合率：小鼠为92%，人为85%。分布容积（Vss）为2.2 L/kg。清除率（CL）为1.3 L/h/kg。在人肝微粒体中的代谢稳定性：半衰期（t1/2）为38 min，中等。主要代谢产物为O-葡萄糖醛酸苷（无活性）。CYP抑制：对CYP3A4、2D6和2C9的IC50均大于20 μM。体外渗透性（Caco-2，Papp A→B = 12 × 10-⁶ cm/s）表明吸收度中等至高。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠急性毒性：单次口服剂量高达 500 mg/kg 未引起死亡或严重症状（仅轻微嗜睡 2 小时）。连续 7 天重复给药（100 mg/kg/天，口服）未导致体重、食物摄入量或临床生化指标（ALT、AST、BUN、肌酐）发生显著变化。主要器官（肝脏、肾脏、肺脏、心脏）的组织病理学检查结果正常。在为期 14 天的大鼠研究中（口服，剂量分别为 30、100 和 300 mg/kg/天），无观察到不良反应剂量 (NOAEL) 为 100 mg/kg。在 300 mg/kg 剂量下，观察到轻度腹泻和体重增加减少（8%）。未观察到 hERG 抑制（IC50 > 30 μM）。Ames 试验（含 S9 和不含 S9）未显示致突变性。SOS1 激活剂 1 被认为是一种相对安全的短期体内研究工具化合物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SOS1激活剂1（也称为化合物64或SOS1-Act）是一种研究性化学探针，而非已获批准的药物。它由勃林格殷格翰公司开发，并于2018年获得专利（WO2018075877A1）公开。该化合物目前已上市，可用于研究。该化合物已被用于验证RAS信号通路过度激活在KRAS突变型癌症中可能具有合成致死性的概念，尤其是在与MEK或ERK抑制剂联合使用时。与阻断RAS活性的RAS抑制剂（例如索托拉西布）不同，SOS1激活剂的作用机制不同，并且可能克服对MAPK通路抑制剂的耐药性。目前尚未启动临床试验。该化合物是研究RAS通路反馈调节和探索新型联合疗法的宝贵工具。
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| 分子式 |
C26H32CLFN6
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|---|---|
| 分子量 |
483.023887634277
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| 精确质量 |
482.236
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| CAS号 |
2245237-53-8
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| PubChem CID |
134814234
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4.1
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| tPSA |
39.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
710
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C=C(C2=C(C=1)N(CC1C=C(C)C(=C(C)C=1)F)C(=N2)N1CC2(CNC2)C1)N1CCN(C)CC1
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| InChi Key |
JWZAQUXBYYOGFA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H32ClFN6/c1-17-8-19(9-18(2)23(17)28)12-34-22-11-20(27)10-21(32-6-4-31(3)5-7-32)24(22)30-25(34)33-15-26(16-33)13-29-14-26/h8-11,29H,4-7,12-16H2,1-3H3
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| 化学名 |
6-chloro-2-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-yl)-1-[(4-fluoro-3,5-dimethylphenyl)methyl]-4-(4-methylpiperazin-1-yl)benzimidazole
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0703 mL | 10.3515 mL | 20.7031 mL | |
| 5 mM | 0.4141 mL | 2.0703 mL | 4.1406 mL | |
| 10 mM | 0.2070 mL | 1.0352 mL | 2.0703 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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