| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TCL-053 is a lipid-based delivery vehicle rather than a conventional enzyme inhibitor or receptor-targeting drug. Its primary biological target is the cellular membrane and the endosomal trafficking pathway. Following cellular uptake via endocytosis, the ionizable nature of TCL-053 (pKa = 6.8) facilitates endosomal escape through the proton sponge effect, releasing the nucleic acid payload into the cytosol. The lipid nanoparticles function by encapsulating therapeutic nucleic acids and mediating their intracellular delivery. TCL-053 does not bind to a specific protein target in the traditional sense; instead, it interacts with lipid bilayers and endosomal membranes to enable payload delivery. The targeting specificity is conferred by the LNP formulation and administration route rather than by TCL-053 itself. For muscle targeting, intramuscular injection or limb perfusion allows the LNPs to accumulate in skeletal muscle tissue. The lipid's ionizable property is crucial for its function—at physiological pH (7.4), it is relatively neutral, reducing nonspecific interactions and toxicity, while in the acidic endosomal environment (pH ~5-6), it becomes positively charged, promoting membrane destabilization and payload release into the cytoplasm.
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| 体外研究 (In Vitro) |
TCL053 的解离常数 pKa = 6.8[1]。其粒径为 79.1 nM，包封率为 96%，TCL053:DPPC:胆固醇:DMG-PEG 的比例为 60:10.6:27.3:2.1 [1]。
基于 TCL-053 的脂质纳米颗粒的体外表征表明，其具有优异的理化性质，适用于核酸递送。优化后的配方中，TCL053:DPPC:胆固醇:DMG-PEG 的摩尔比为 60:10.6:27.3:2.1，对 mRNA 有效载荷的包封率达到 96%，动态光散射法测得的平均粒径为 79.1 nm。该脂质的解离常数 pKa = 6.8，有利于内吞体逃逸，同时保持循环稳定性。脂质纳米颗粒（LNP）能够高效包裹Cas9 mRNA和sgRNA，保护核酸免受降解并促进细胞摄取。细胞培养研究表明，TCL053-LNP能够有效地将CRISPR组分递送至靶细胞，从而实现成功的基因编辑。96%的包封率表明几乎所有核酸有效载荷都被包裹在LNP核心内。其小粒径（<100 nm）有利于通过内吞作用被细胞摄取，并能渗入组织。制剂的多分散指数和zeta电位均表明其为稳定的LNP制剂，适用于体内应用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
与其他体内mRNA递送试剂（体内喷射RNA）相比，基于TCL053的脂质纳米颗粒（LNP）包裹的Cas9 mRNA（TCL053-LNP-CRISPR）（20 µg总RNA；肌注）在基因外显子跳跃和基因组编辑方面具有更高的效率[1]。基于TCL053的LNP可通过肢体灌注靶向不同的肌肉群。它还具有低免疫原性，并且可以重复给药[1]。骨骼肌疾病研究可以利用基于TCL053的LNP，它是一种CRISPR-Cas9递送载体[1]。在具有人源化外显子序列的DMD小鼠模型中，基于TCL053的脂质纳米颗粒（LNP）可诱导稳定的基因组外显子跳跃并恢复肌营养不良蛋白的表达[1]。体内研究表明，通过肌肉注射给药，以20 µg总RNA剂量包裹Cas9 mRNA的基于TCL-053的LNP（TCL053-LNP-CRISPR）对基因组编辑和外显子跳跃具有高效性。在携带人源化外显子序列的杜氏肌营养不良症（DMD）小鼠模型中，TCL053-LNP可诱导稳定的基因组外显子跳跃并恢复骨骼肌中肌营养不良蛋白的表达。其编辑效率优于其他体内mRNA递送试剂，例如in vivo-jetRNA。重要的是，基于TCL053的LNP可通过肢体灌注靶向多个肌肉群，这对于治疗全身性肌肉疾病具有显著优势。脂质纳米颗粒（LNP）具有低免疫原性，可重复给药而不会引发降低疗效的中和性免疫反应。这对于需要持续治疗的慢性疾病（如杜氏肌营养不良症，DMD）而言至关重要。脂质纳米颗粒能够有效地将CRISPR-Cas9组分递送至肌肉组织，从而达到治疗水平的基因编辑。在DMD小鼠模型中，肌营养不良蛋白的恢复证实了该基因编辑方法的功能相关性。高编辑效率、低免疫原性和可重复给药的特性，使TCL053-LNP成为一种极具前景的体内基因治疗平台。
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| 酶活实验 |
由于TCL-053是一种脂质赋形剂，而非靶向酶或受体的药物，因此传统的酶/受体结合试验并不适用。取而代之的是，采用理化表征方法来评估脂质的性质。解离常数（pKa = 6.8）通过标准电位滴定法测定，该方法测量脂质的质子化行为随pH值的变化。这对于预测内吞体逃逸能力至关重要。脂质纳米颗粒（LNP）制剂的优化包括使用动态光散射（DLS）进行粒径分析，以确保纳米颗粒的均匀形成（通常<100 nm）。包封率通过荧光染料排除法或凝胶电泳法测定，其中游离（未包封）核酸与包封的核酸分离，并计算包封有效载荷的百分比。据报道，优化后的TCL-053制剂的包封率为96%，粒径为79.1 nm。脂质与有效载荷的比例经过优化，可在保持纳米颗粒稳定性的同时实现最大程度的包封。TCL053:DPPC:胆固醇:DMG-PEG 的摩尔比为 60:10.6:27.3:2.1，代表了骨骼肌递送的最佳配方。
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| 细胞实验 |
基于TCL-053的脂质纳米颗粒（LNP）的体外细胞培养研究包括将细胞与包裹核酸有效载荷（例如Cas9 mRNA和sgRNA）的LNP制剂进行孵育。通常使用不同浓度和孵育时间的LNP处理细胞，以确定最佳递送条件。基因编辑效率通过靶基因组位点测序或功能性检测（例如报告基因激活或蛋白质表达分析）进行评估。对于CRISPR-Cas9递送，使用包裹靶向特定基因位点的Cas9 mRNA和sgRNA的TCL053-LNP处理细胞。孵育后（通常为24-72小时），收集细胞，使用T7内切酶I检测、Sanger测序或下一代测序分析编辑效率。蛋白质表达变化（例如，肌营养不良蛋白的恢复）通过Western blot或免疫荧光进行评估。采用MTT或CellTiter-Glo等标准检测方法评估LNP制剂的细胞毒性，以确保其生物相容性。优化后的TCL053制剂的包封率为96%，粒径为79.1 nm，证实了细胞处理前LNP制剂的质量。
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| 动物实验 |
利用基于TCL-053的脂质纳米颗粒（LNP）在小鼠模型中进行体内动物实验。对于杜氏肌营养不良症（DMD）的研究，采用具有人源化外显子序列的DMD小鼠模型。将TCL-053-LNP-CRISPR（20 µg总RNA，包含Cas9 mRNA和sgRNA）通过肌肉注射给药至腓肠肌或其他目标肌群。为了更广泛地靶向肌肉，可采用肢体灌注法，将LNP溶液通过肢体血管系统灌注，使其分布至多个肌群。给药后，在不同时间点（通常为注射后1-4周）采集组织进行分析。从肌肉组织中提取基因组DNA并进行测序，以量化外显子跳跃和基因组编辑效率。通过蛋白质印迹法和肌肉切片的免疫荧光染色评估蛋白质表达，以检测肌营养不良蛋白的恢复情况。通过重复给药后测量细胞因子水平和抗体反应来评估TCL053-LNP的低免疫原性。进行组织学分析以评估肌肉形态和任何组织损伤迹象。DMD小鼠模型研究表明，该方法能够稳定地实现基因组外显子跳跃和肌营养不良蛋白的恢复，从而证实了该方法的治疗潜力。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种脂质纳米颗粒组分，TCL-053 无需进行常规的小分子药代动力学分析。相反，LNP 制剂的药代动力学行为主要通过纳米颗粒的循环时间、生物分布和清除率来表征。基于 TCL-053 的 LNP 在血液中循环时间较长，使其能够在骨骼肌等靶组织中积累。TCL-053 的可电离特性（pKa = 6.8）有助于其获得良好的药代动力学特性，因为它能减少非特异性蛋白吸附和调理作用，否则这些因素会导致其被网状内皮系统快速清除。肌内注射或肢体灌注后，LNP 定位于肌肉组织，并通过内吞作用被细胞摄取。TCL-053-LNP 的低免疫原性使其可以重复给药，而不会因抗 PEG 或抗脂质抗体反应而加速清除。 96%的包封率确保核酸有效载荷在循环过程中免受核酸酶降解。小粒径（79.1 nm）有利于药物渗出和组织穿透。脂质体通过天然脂质降解途径代谢，主要经肝脏和肾脏清除。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
基于TCL-053的脂质纳米颗粒（LNP）具有低免疫原性，这对于需要重复给药的治疗应用而言是一项关键的安全特性。小鼠模型研究表明，重复给药不会引发针对LNP成分的显著中和免疫反应，从而确保基因编辑疗效在多个治疗周期内持续有效。这与许多其他脂质递送系统形成鲜明对比，后者在重复给药后会触发抗PEG抗体或炎症反应。已发表的研究中未报告明显的脱靶毒性或器官损伤。在测试剂量（每次注射20 µg总RNA）下，小鼠模型对LNP的耐受性通常良好。与所有脂质纳米颗粒制剂一样，潜在的毒性与脂质成分本身有关，包括补体激活相关假性过敏反应（CARPA）和高剂量下的肝毒性，但尚未有关于TCL-053在治疗剂量下出现这些毒性的报道。本产品仅供研究使用，尚未获准用于人体治疗。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施。良好的安全性以及较高的编辑效率，支持TCL053-LNPs在基因治疗应用中的持续开发。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TCL-053 是一种新一代可电离脂质，代表了用于核酸递送的脂质纳米颗粒 (LNP) 技术的重大进步。描述其应用的关键文献是 Kenjo E 等人发表的题为“LNP 的低免疫原性使其能够重复向小鼠骨骼肌中递送 CRISPR-Cas9 mRNA”的文章，发表于《自然通讯》(Nature Communications)，2021 年 12 月 8 日；12(1):7101。该研究表明，TCL053-LNP 能够在杜氏肌营养不良症 (DMD) 小鼠模型中实现稳定的基因组外显子跳跃和肌营养不良蛋白的恢复。该脂质的低免疫原性是其显著特征，使其能够重复给药，从而克服了许多现有 LNP 平台的主要局限性。TCL053 尚未获准用于临床，仅供研究用途，特别是用于针对骨骼肌疾病的基因治疗和基因组编辑应用。该化合物以液体形式供应，应在 -20°C 下以溶液形式保存长达 2 年。同义词包括(9Z,9'Z)-2-(((4-(二甲氨基)丁酰)氧基)甲基)-2-(((Z)-十四碳-9-烯酰氧基)甲基)丙烷-1,3-二基双(十四碳-9-烯酸酯)。该脂质通常与DPPC、胆固醇和DMG-PEG组合使用，形成脂质纳米颗粒(LNP)。TCL053:DPPC:胆固醇:DMG-PEG的最佳摩尔比为60:10.6:27.3:2.1，可制备粒径为79.1 nm、包封率为96%的颗粒。研究人员正在继续探索TCL053在杜氏肌营养不良症(DMD)以外的各种基因编辑应用中的潜力，包括其他神经肌肉疾病。
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| 分子式 |
C53H95NO8
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|---|---|
| 分子量 |
874.32
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| 精确质量 |
873.705
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| CAS号 |
2361162-70-9
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| PubChem CID |
154641272
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
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| LogP |
16.2
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| tPSA |
108
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
49
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| 重原子数目 |
62
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| 分子复杂度/Complexity |
1050
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCC/C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COC(=O)CCCN(C)C)(COC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCC)COC(=O)CCCCCCC/C=C\CCCC
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| InChi Key |
MJPUTLHISFHJJZ-QMJZYSMNSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C53H95NO8/c1-6-9-12-15-18-21-24-27-30-33-36-40-49(55)59-45-53(48-62-52(58)43-39-44-54(4)5,46-60-50(56)41-37-34-31-28-25-22-19-16-13-10-7-2)47-61-51(57)42-38-35-32-29-26-23-20-17-14-11-8-3/h15-20H,6-14,21-48H2,1-5H3/b18-15-,19-16-,20-17-
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| 化学名 |
[2-[4-(dimethylamino)butanoyloxymethyl]-3-[(Z)-tetradec-9-enoyl]oxy-2-[[(Z)-tetradec-9-enoyl]oxymethyl]propyl] (Z)-tetradec-9-enoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1437 mL | 5.7187 mL | 11.4375 mL | |
| 5 mM | 0.2287 mL | 1.1437 mL | 2.2875 mL | |
| 10 mM | 0.1144 mL | 0.5719 mL | 1.1437 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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