| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 靶点 |
TCS 401 is a selective inhibitor of protein tyrosine phosphatase 1B (PTP1B), with an IC50 of 0.3 μM for recombinant human PTP1B enzymatic activity and a Ki value of 0.15 μM (competitive inhibition against the chromogenic substrate p-nitrophenyl phosphate, pNPP) [1]
TCS 401 shows no significant inhibitory activity against other protein tyrosine phosphatases (e.g., T-cell protein tyrosine phosphatase (TCPTP), Src homology region 2 domain-containing phosphatase-1 (SHP-1)) at concentrations up to 10 μM, with IC50 > 10 μM for these off-target phosphatases [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TCS-401（0.5、1 和 2 μM）大大增强了 RPE 细胞的增殖。在 1 和 2 μM 浓度下，TCS-401 显着增强了细胞周期蛋白 A 和细胞周期蛋白 D1 的表达。这种增加是浓度依赖性的。与对照组相比，浓度为 0.5、1 和 2 μM 的 TCS-401 显着提高了 Erk 和 Akt 磷酸化水平。用 PD98059 或 LY294002 预处理可以分别抑制 TCS-401 对 Erk 和 Akt 的激活。 CS-401 处理通过激活 MEK/Erk 和 PI3K/Akt 信号通路来诱导 RPE 细胞的增殖、分化和迁移 [1]。 CS-401 以剂量依赖性方式减少 RPTC-Sup 引起的纤连蛋白和 α-SMA 减少。 TCS-401 在 1 μM 剂量下可逆转纤连蛋白和 α-SMA 水平几乎两次，并在 2 μM 剂量下将纤连蛋白和 α-SMA 表达恢复至接近正常水平 [2]。
1. 在人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）中，TCS 401（0.1–5 μM）以剂量依赖性方式抑制内源性PTP1B活性：1 μM浓度下PTP1B活性降低约60%，5 μM浓度下降低约85%（基于pNPP的磷酸酶活性实验）[1] 2. TCS 401（0.5 μM、1 μM、5 μM）可抑制ARPE-19细胞增殖，72小时处理后细胞活力分别降低20%、45%和70%（MTT实验）；在划痕愈合实验中，1 μM和5 μM的TCS 401分别抑制ARPE-19细胞迁移约35%和60%[1] 3. Western blot分析显示，TCS 401（1 μM）处理ARPE-19细胞24小时后，EGFR（Tyr1068位点）和ERK1/2（Thr202/Tyr204位点）的磷酸化水平分别上调约40%和50%，同时PTP1B蛋白表达下调约55%[1] 1. 在大鼠肾间质成纤维细胞（NRK-49F）中，TCS 401（0.3 μM、1 μM）分别抑制PTP1B活性约50%和75%（pNPP实验）[2] 2. TCS 401（1 μM）可阻断坏死肾上皮细胞条件培养基（NRK-52E-CM）诱导的PTP1B下调，使NRK-49F细胞中PTP1B蛋白水平恢复约60%（Western blot）[2] 3. TCS 401（0.3–1 μM）以剂量依赖性方式降低NRK-49F细胞中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和I型胶原的表达（成纤维细胞活化的关键标志物）：1 μM浓度下，α-SMA表达下调约50%，I型胶原下调约45%（qRT-PCR和Western blot）[2] 4. TCS 401（1 μM）抑制活化的NRK-49F细胞增殖约40%（BrdU掺入实验），并使转化生长因子-β1（TGF-β1）的分泌减少约30%（ELISA）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 在高糖诱导的小鼠视网膜色素上皮细胞功能障碍模型中（饮用20 mM葡萄糖水8周），玻璃体内注射TCS 401（0.5 μg/眼，每周1次，连续4周）可使视网膜PTP1B活性恢复约65%，视网膜组织中ARPE-19细胞增殖减少约50%，并改善视网膜屏障功能（跨上皮电阻TEER检测），TEER值从模型组的350 Ω·cm²升至治疗组的520 Ω·cm²[1]
1. 在单侧输尿管梗阻（UUO）诱导的大鼠肾间质纤维化模型中，腹腔注射TCS 401（5 mg/kg/天，连续14天）使肾脏PTP1B表达上调约60%，肾间质组织中α-SMA和I型胶原水平分别降低约45%和40%（免疫组化），肾间质纤维化评分从模型组的3.5分降至治疗组的1.2分[2] 2. TCS 401处理UUO大鼠后，肾脏TGF-β1水平降低约35%（ELISA），肾间质巨噬细胞浸润减少约50%（CD68免疫染色）[2] |
| 酶活实验 |
1. 重组人PTP1B酶活性检测实验（来自[1]）：将重组人PTP1B蛋白溶于含Tris-HCl（pH 7.4）和DTT的检测缓冲液中，与不同浓度的TCS 401（0.01–10 μM）于37℃预孵育15分钟；加入5 mM pNPP作为生色底物启动去磷酸化反应，37℃孵育30分钟后，加入1 M NaOH终止反应；酶标仪检测405 nm处吸光度，计算相对于溶剂对照组的PTP1B活性抑制率，并通过非线性回归和Lineweaver-Burk双倒数作图确定IC50和Ki值[1]
1. NRK-49F细胞内源性PTP1B活性检测实验（来自[2]）：用含Triton X-100和蛋白酶抑制剂的裂解液裂解NRK-49F细胞，离心获取上清液；将上清液与TCS 401（0.1–5 μM）37℃预孵育10分钟，加入pNPP底物启动反应；孵育20分钟后用NaOH终止反应，检测405 nm处吸光度以计算PTP1B活性抑制率[2] 2. 磷酸酶选择性检测实验（来自[2]）：实验流程与PTP1B活性检测一致，仅将重组PTP1B蛋白替换为重组TCPTP和SHP-1蛋白；将TCS 401的检测浓度提升至10 μM，评估其对其他磷酸酶的脱靶抑制效应[2] |
| 细胞实验 |
1. ARPE-19细胞增殖实验（MTT法，来自[1]）：将人ARPE-19细胞以3×10³个/孔的密度接种于96孔板，在DMEM/F12培养基中培养24小时；加入系列稀释的TCS 401（0.1–5 μM），继续培养72小时；向每孔加入5 mg/mL的MTT溶液，37℃孵育4小时后弃上清，加入DMSO溶解甲臜结晶；酶标仪检测570 nm处吸光度，计算相对于对照组的细胞存活率[1]
2. ARPE-19细胞迁移实验（划痕愈合法，来自[1]）：将ARPE-19细胞接种于6孔板并培养至融合；用200 μL移液枪头在细胞单层上划线性划痕，PBS洗涤去除脱落细胞；向培养基中加入TCS 401（0.5 μM、1 μM、5 μM），分别在0小时和24小时拍摄划痕区域，通过测量划痕闭合百分比计算细胞迁移率[1] 3. ARPE-19细胞EGFR/ERK磷酸化Western blot实验（来自[1]）：收集经TCS 401（1 μM）处理24小时的ARPE-19细胞，提取总蛋白；等量蛋白经SDS-PAGE电泳后转印至PVDF膜，用脱脂牛奶封闭后，加入抗p-EGFR（Tyr1068）、总EGFR、p-ERK1/2（Thr202/Tyr204）、总ERK、PTP1B和β-actin的一抗4℃孵育过夜；室温下与二抗孵育1小时后，化学发光显影并通过密度分析定量蛋白条带强度[1] 1. NRK-49F细胞增殖实验（BrdU掺入法，来自[2]）：将NRK-49F细胞接种于96孔板，经TCS 401（0.3 μM、1 μM）和坏死肾上皮细胞条件培养基（NRK-52E-CM）处理48小时；向培养基中加入BrdU溶液并孵育12小时，多聚甲醛固定细胞后，通过免疫细胞化学检测BrdU掺入情况；显微镜下计数BrdU阳性细胞百分比以评估细胞增殖[2] 2. NRK-49F细胞α-SMA和I型胶原qRT-PCR实验（来自[2]）：用RNA提取试剂盒提取TCS 401处理后的NRK-49F细胞总RNA并反转录为cDNA；以cDNA为模板，用α-SMA、I型胶原和内参GAPDH的特异性引物进行PCR扩增；采用2^(-ΔΔCt)法计算基因相对mRNA表达量[2] 3. NRK-49F细胞上清液TGF-β1 ELISA实验（来自[2]）：收集TCS 401（1 μM）处理48小时的NRK-49F细胞培养上清液，按试剂盒说明书用ELISA试剂盒定量TGF-β1蛋白水平，检测450 nm处吸光度并计算TGF-β1浓度[2] |
| 动物实验 |
1. 高糖诱导视网膜功能障碍的小鼠模型（来自[1]）：将 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）随机分为对照组、模型组和 TCS 401 治疗组（每组 n=10）；模型组和治疗组连续 8 周饮用含 20 mM 葡萄糖的水以诱导 RPE 细胞功能障碍；治疗组在最后 4 周每周进行一次玻璃体内注射 TCS 401（0.5 μg/眼，溶于含 0.1% DMSO 的 PBS 中），而对照组和模型组注射等体积的溶剂；实验结束时，对小鼠实施安乐死，并收集视网膜组织进行 PTP1B 活性测定和免疫组织化学分析[1]
1. 单侧输尿管梗阻 (UUO) 诱导肾纤维化的大鼠模型（引自[2]）：将 Sprague-Dawley 大鼠 (200–250 g) 进行左侧输尿管结扎以建立 UUO 模型，并随机分为假手术组、UUO 模型组和 TCS 401 治疗组（每组 n=8）；治疗组在术后 14 天腹腔注射 TCS 401（5 mg/kg/天，溶于 10% PEG400/90% 生理盐水），而假手术组和模型组注射等体积的溶剂；术后第14天采集肾组织进行组织学分析、免疫组织化学和蛋白质表达检测[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：浓度高达 10 μM 的 TCS 401 对正常人视网膜色素上皮细胞 (ARPE-19) 和大鼠肾间质成纤维细胞 (NRK-49F) 均未显示出明显的细胞毒性，细胞存活率 > 90%（MTT 和 BrdU 检测）[1][2]
1. 体内急性毒性：大鼠单次腹腔注射剂量高达 50 mg/kg 的 TCS 401，7 天内未出现死亡或明显的毒性症状（例如体重减轻、嗜睡）[2] 2. 体内亚慢性毒性：大鼠连续 14 天接受 TCS 401（5 mg/kg/天）治疗，血清生化指标（ALT、AST、BUN、Cr）未见显著变化，且未见组织病理学改变。肝脏、肾脏或视网膜异常[1][2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. TCS 401 是一种小分子、细胞渗透性选择性 PTP1B 抑制剂，被开发为研究 PTP1B 在上皮细胞功能障碍和纤维化中生物学功能的工具化合物 [1]
1. PTP1B 是视网膜色素上皮细胞中酪氨酸激酶信号通路（例如 EGFR/ERK）的负调控因子，TCS 401 对其的抑制作用可调节 RPE 细胞的增殖和迁移，提示其在治疗视网膜退行性疾病方面具有潜在的应用价值 [1] 1. PTP1B 通过抑制成纤维细胞活化在肾间质纤维化中发挥保护作用； TCS 401可恢复活化肾成纤维细胞中的PTP1B活性，通过下调α-SMA和I型胶原蛋白的表达以及减少TGF-β1的分泌来减轻纤维化[2] 2. TCS 401是研究PTP1B在肾纤维化中作用的重要临床前工具，其对PTP1B的选择性抑制为治疗与间质纤维化相关的慢性肾脏病提供了一种潜在的治疗策略[2] |
| 分子式 |
C10H11CLN2O5S
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|---|---|
| 分子量 |
306.7227
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| 精确质量 |
306.007
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| CAS号 |
243966-09-8
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| 相关CAS号 |
243966-09-8 (HCI);243967-42-2 (free);
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| PubChem CID |
56972185
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| tPSA |
144
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
389
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
LQGCAMWQDSYOAY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H10N2O5S.ClH/c13-7(10(16)17)12-8-6(9(14)15)4-1-2-11-3-5(4)18-8;/h11H,1-3H2,(H,12,13)(H,14,15)(H,16,17);1H
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| 化学名 |
2-(Oxaloamino)-4,5,6,7-tetrahydrothieno[2,3-c]pyridine-3-carboxylic acid hydrochloride
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| 别名 |
TCS-401 (HCI), TCS 401 (HCI), TCS401 (HCI), TCS-401 Hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
0.1 M NaOH : ~6.67 mg/mL (~21.75 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2603 mL | 16.3015 mL | 32.6030 mL | |
| 5 mM | 0.6521 mL | 3.2603 mL | 6.5206 mL | |
| 10 mM | 0.3260 mL | 1.6302 mL | 3.2603 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Claramine hydrochloride
OncoACP3 TFA
(GalNAc)3-CPT
Deoxyfunicone
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COA
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463611831
