| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PIM1/2
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：SMI-4a 是一种新型苯亚甲基-噻唑烷-2, 4-二酮小分子，是 Pim1 的有效选择性抑制剂，IC50 为 17 nM，对 Pim-2 具有中等效力，并且不会显着抑制任何其他药物丝氨酸/苏氨酸或酪氨酸激酶。 SMI-4a 可阻止前体 T 细胞淋巴母细胞白血病/淋巴瘤的生长。 SMI-4a被发现可诱导细胞外信号相关激酶1/2 (ERK1/2)的磷酸化。丝氨酸/苏氨酸 Pim 激酶在特定血液肿瘤中上调，并在关键信号转导途径中发挥重要作用，包括受 MYC、MYCN、FLT3-ITD、BCR-ABL、HOXA9 和 EWS 融合调节的信号转导途径。 SMI-4a 可杀死多种骨髓细胞和淋巴细胞系，其中前体 T 细胞淋巴母细胞白血病/淋巴瘤 (pre-T-LBL/T-ALL) 高度敏感。将前 T-LBL 细胞与 SMI-4a 一起孵育可诱导 G1 期细胞周期停滞，继发于 p27 (Kip1) 的剂量依赖性诱导、通过线粒体途径的细胞凋亡以及雷帕霉素 C1 (mTORC1) 哺乳动物靶标的抑制该途径基于该酶的 2 个底物磷酸化 p70 S6K 和磷酸化 4E-BP1 的减少。此外，发现用 SMI-4a 处理这些细胞可诱导细胞外信号相关激酶 1/2 (ERK1/2) 的磷酸化，以及 SMI-4a 和丝裂原激活蛋白激酶激酶 1/2 (MEK1) 的组合/2)抑制剂在杀死前T-LBL细胞方面具有高度协同作用。在携带皮下前 T-LBL 肿瘤的免疫缺陷小鼠中，每天两次用 SMI-4a 治疗导致肿瘤生长显着延迟，而体重、血细胞计数或化学成分没有任何变化。这些数据表明，Pim 蛋白激酶的抑制可能被开发为治疗前 T-LBL 的治疗策略。 SMI-4a 是 Pim1 的 ATP 竞争性抑制剂，IC50 为 17 nM。 SMI-4a 对 Pim1 对一组激酶表现出高选择性。 SMI-4a 抑制已知底物（翻译阻遏物 4E-BP1）的 Pim-1 的体外磷酸化。 SMI-4a (5μM) 抑制胰腺和白血病细胞的生长。 SMI-4a 降低前列腺和造血细胞中 Pim 靶标 Bad 的磷酸化。 SMI-4a 导致细胞周期停滞并逆转 Pim-1 的抗凋亡活性。 SMI-4a 增加细胞核中 p27Kip1 的数量。 SMI-4a 治疗前 T-LBL 会抑制 mTOR 通路。 SMI-4a 降低前 T-LBL 中 MYC 蛋白的表达。 SMI-4a 治疗诱导 MAPK 通路上调 激酶测定：SMI-4a 是一种选择性 ATP 竞争性 Pim-1 激酶抑制剂，Pim-1 的 IC50 为 21 nM，而 Pim-2 的 IC50 为 100 nM，对 50 种其他测试的激酶组具有很少或没有活性。细胞测定：将6812/2细胞与SMI-4a (10μM)或二甲基亚砜(DMSO)在无血清培养基中孵育24小时，将Jurkat细胞孵育48小时。孵育后，收获细胞，用磷酸盐缓冲盐水（PBS）洗涤一次，在冷的70%乙醇中固定45分钟，用含有RNaseA的碘化丙啶溶液染色30分钟，并通过流式细胞术进行分析。
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| 体内研究 (In Vivo) |
SMI-4a（60 mg/Kg）每天两次治疗可显着缩小肿瘤大小，并且耐受性良好。最终口服 SMI-4a 后 1 小时收获的肿瘤显示，与用载体处理的小鼠的肿瘤相比，p70 S6K 的磷酸化降低，而相比之下，总 p70 S6K 表达没有变化。
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| 酶活实验 |
使用多种方法进行Pim蛋白激酶测定，以确保化合物的作用不是由于任何实验伪影。表3所示化合物的初步筛选和评估是使用atp耗尽试验进行的。简单地说，重组人Pim-1以S6激酶/Rsk-2肽2 （KKRNRTLTK）为底物，筛选文库中的100µM化合物，1µM ATP和10 mM MgCl2孵育1小时。激酶反应后，使用kinase - glo荧光素酶试剂盒测定剩余ATP水平。对于需要更高ATP浓度的实验，Pim-1激酶活性是通过一种耦合实验来监测的，其中ADP的产生与丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶催化的NADH氧化相耦合。实验在含100 mM NaCl、10 mM MgCl2、2.5 mM磷酸烯醇丙酮酸、0.2 mM NADH、30µg/mL丙酮酸激酶、10µg/mL乳酸脱氢酶、2 mM二硫苏糖醇、25 nM Pim-1、100µM S61肽和不同浓度ATP的20 mM MOPS pH 7中进行。在VersaMax微孔板阅读器中，在25°C下，通过监测NADH氧化在340 nm处的下降来测量活性。反应通过加入ATP（通常为100µM）引发。抑制剂（终值1% DMSO）在加入ATP之前加入。在这两种情况下，IC50值是用GraphPad Prism程序非线性回归确定的。在一些实验中，使用his标记的4E-BP1作为底物来测定Pim-1激酶活性。将活性Pim-1蛋白重悬于激酶反应缓冲液中（10 mM MOPS, pH 7.4, 100µM ATP, 15 mM MgCl2, 1 mM Na3VO4, 1 mM NaF， 1 mM DTT和蛋白酶抑制剂混合物）。每反应30µL，以His-4E-BP1蛋白3µg为底物，加入10 μCi的[γ-32P] ATP。在30°C下搅拌30分钟。然后将样品进行SDS-PAGE扫描，通过放射自显像显示32P标记的4E-BP1。最后，在一些实验中测量了完整细胞中Pim-1的活性。用Flag-Pim-1转染HEK-293T细胞24 h，胰蛋白酶处理后分装于小培养皿中过夜。细胞被洗一次,孵化与不含磷酸盐媒体含有10%不含磷酸盐的边后卫1 h。细胞培养介质中含有50μCi /毫升(32 p)为4 h,正磷酸盐的测试化合物添加最后1 h。免疫沉淀反应Pim-1, anti-Flag M2琼脂糖添加到细胞溶解产物和孵化3 h。部分(10%)的免疫沉淀反应是用于免疫印迹anti-Flag抗体(输入)。其余90%的样品进行SDS-PAGE， 32p标记的Pim-1通过放射自显影显示。
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| 细胞实验 |
生化分析。根据制造商的方案，使用Lipofectamine™2000用打乱的siRNA或sisim -1 （ON-TARGETplus SMARTpool）转染K562细胞，并制备转染后48小时的裂解物。采用3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四氮唑（MTT）法测定细胞生长。如前面所述，采用高效液相色谱法测定ATP、ADP和AMP，并使用ATP生物发光测定试剂盒HS II测定105个细胞的ATP。从WT和TKO MEFs裂解液中捕获m7-GTP sepharose捕获eIF4E，并通过Western blotting检测结合4EBP1和eIF4G。[1]
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
Proc Natl Acad Sci U S A.2011 Jan 11;108(2):528-33.;Mol Cancer Ther.2009 Jun;8(6):1473-83;Blood.2010 Jan 28;115(4):824-33.
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| 其他信息 |
丝氨酸/苏氨酸Pim激酶在实体瘤和血液系统恶性肿瘤中过度表达，并促进细胞生长和存活。本研究发现，一种新型Pim激酶抑制剂SMI-4a或Pim-1 siRNA可通过刺激mTORC1负调控因子AMP依赖性蛋白激酶（AMPK）的磷酸化，从而激活mTORC1，进而阻断雷帕霉素敏感的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTORC1）的活性。敲除所有三种Pim激酶的小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）（三重敲除（TKO）MEF）表现出AMPK激活，这是由于其AMPATP比值高于野生型MEF所致。与这些发现一致，TKO MEF在体外培养中生长缓慢，并且由于5'端帽依赖性翻译减少，导致蛋白质合成速率降低。在TKO MEF细胞中单独表达Pim-3足以逆转AMPK的激活，增加蛋白质合成，并促进MEF细胞生长，使其与野生型相似。研究发现，Pim-3的表达显著提高了c-Myc和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α (PGC-1α)的蛋白水平，这两种酶能够调节糖酵解和线粒体生物合成，而它们在TKO MEF细胞中的表达水平降低。在TKO MEF细胞中过表达PGC-1α可提高ATP水平并抑制AMPK的激活。这些结果表明Pim激酶介导了能量代谢的调控，从而调节了AMPK的活性。我们发现Pim-3在调节c-Myc和PGC-1α蛋白水平以及细胞生长方面发挥着重要作用。[1]
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| 分子式 |
C11H6F3NO2S
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|---|---|---|
| 分子量 |
273.23
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| 精确质量 |
273.007
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| 元素分析 |
C, 48.36; H, 2.21; F, 20.86; N, 5.13; O, 11.71; S, 11.73
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| CAS号 |
327033-36-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1361334
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.602
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| LogP |
2.3
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| tPSA |
71.47
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
406
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(NC/1=O)SC1=C\C2=CC=CC(C(F)(F)F)=C2
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| InChi Key |
NGJLOFCOEOHFKQ-VMPITWQZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H6F3NO2S/c12-11(13,14)7-3-1-2-6(4-7)5-8-9(16)15-10(17)18-8/h1-5H,(H,15,16,17)/b8-5+
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| 化学名 |
(5E)-5-[[3-(trifluoromethyl)phenyl]methylidene]-1,3-thiazolidine-2,4-dione
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6599 mL | 18.2996 mL | 36.5992 mL | |
| 5 mM | 0.7320 mL | 3.6599 mL | 7.3198 mL | |
| 10 mM | 0.3660 mL | 1.8300 mL | 3.6599 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Pim-1 kinase inhibitor 4
PIM-IN-2
FD1024
PIM1-IN-2
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COA
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