Tempone-H

别名: 化学和生物系统中的自旋陷阱, 量化过亚硝酸根和超氧自由基的形成。
目录号: V46002 纯度: ≥98%
Tempone-H 可用作化学和生物系统中的自旋陷阱,以量化过氧亚硝酸盐和超氧自由基的形成。
Tempone-H CAS号: 3637-11-4
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
Tempone-H 可用作化学和生物系统中的自旋捕获剂,用于定量分析过氧亚硝酸根和超氧自由基的生成。铁离子和铜离子是 Tempone-H 的有效氧化剂。
Tempone-H(CAS 3637-11-4),又名 1-羟基-2,2,6,6-四甲基-4-氧代哌啶,是一种稳定的以氮为中心的自由基化合物。其分子式为 C9H17NO2,分子量为 171.24 g/mol。Tempone-H 可用作化学和生物系统中的自旋捕获剂,用于定量分析过氧亚硝酸根和超氧自由基的生成。它还可用于磁共振成像 (MRI) 和电子顺磁共振 (EPR) 光谱分析。该化合物是一种细胞渗透性自旋捕获剂,可用于检测超氧自由基和过氧亚硝酸根。
生物活性&实验参考方法
靶点
Tempone-H is a spin trap that targets reactive oxygen species (ROS), specifically superoxide radicals and peroxynitrite. Its mechanism of action involves the reaction of the stable nitroxide radical with these highly reactive species. The reaction results in a change in the EPR spectrum of the nitroxide, which can be detected and quantified. This property allows researchers to measure the formation of these radicals in biological systems, providing insights into oxidative stress, aging, and neurodegeneration.
体外研究 (In Vitro)
TEMPONE-H 对过氧亚硝酸根或超氧自由基的检测灵敏度比自旋捕获剂 DMPO 或 TMIO 高约十倍 [1]。
在体外,TEMPONE-H 可用作自旋捕获剂,用于定量分析化学和生物系统中过氧亚硝酸根和超氧自由基的生成。其稳定的自由基特性使其能够深入了解细胞环境,尤其是在氧化应激的背景下。它可用于电子顺磁共振 (EPR) 光谱中,以检测和定量分析自由基的生成。铁离子和铜离子是 TEMPONE-H 的有效氧化剂,因此在使用时需要考虑这一点。
体内研究 (In Vivo)
Tempone-H 的体内活性与其作为自旋捕获剂在生物体内检测活性氧 (ROS) 的作用密切相关。其细胞渗透性使其可用于体内检测超氧自由基和过氧亚硝酸盐的生成。人们已对其在氧化应激相关疾病(例如衰老和神经退行性疾病)研究中的潜在作用进行了研究。其体内 ROS 定量能力使其成为研究氧化应激在疾病中作用的宝贵工具。
酶活实验
利用Tempone-H进行的体外酶/受体结合(非细胞)分析基于其作为自旋捕获剂的作用。检测超氧自由基的标准方案是:将含有超氧自由基生成系统(例如,黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶)的样品与Tempone-H孵育。通过电子顺磁共振(EPR)光谱监测反应,该光谱可检测硝基氧自由基信号。EPR信号的降低与产生的超氧自由基量成正比。该分析方法可用于测定超氧自由基生成酶的活性,或筛选清除超氧自由基的化合物。
细胞实验
利用Tempone-H进行的体外细胞检测涉及检测细胞内活性氧(ROS)的产生。标准流程如下:将细胞与Tempone-H(例如,1-10 mM)孵育一段时间(例如,1-2小时)。然后用诱导ROS产生的试剂(例如,佛波醇肉豆蔻酸酯或过氧化氢)刺激细胞。裂解细胞后,测量Tempone-H的EPR信号。EPR信号的增强表明超氧阴离子或过氧亚硝酸根自由基的生成。或者,也可以直接使用EPR光谱分析细胞。
动物实验
使用Tempone-H进行的体内动物实验包括向动物体内注射该化合物,以测量组织中活性氧(ROS)的产生。标准实验方案为:将Tempone-H腹腔注射或静脉注射给小鼠。经过一段时间(例如30-60分钟)使其分布后,收集组织(例如脑、心脏、肝脏)并进行匀浆处理。测量组织匀浆中硝基氧自由基的电子顺磁共振(EPR)信号。EPR信号的强度反映了组织中ROS的产生量。该方法用于研究各种疾病模型中的氧化应激。
药代性质 (ADME/PK)
Tempone-H 的药代动力学性质尚未得到充分表征。该化合物为小分子(分子量 171.24 g/mol),可透过细胞膜,且水溶性好、性质稳定。其体内分布取决于其穿过生物膜的能力。该化合物通常以粉末形式在室温下储存。其与活性氧(ROS)的反应活性和稳定性是其作为自旋捕获剂应用的主要考虑因素。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
关于Tempone-H的毒性数据有限。作为一种用于研究的自旋捕获剂,它通常被认为在实验浓度下毒性较低。然而,与所有化学试剂一样,在处理该化合物时应采取适当的安全预防措施。应避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物不适用于人体。
参考文献
[1]. Dikalov S, et al. Quantification of peroxynitrite, superoxide, and peroxyl radicals by a new spin trap hydroxylamine 1-hydroxy-2,2,6,6-tetramethyl-4-oxo-piperidine. Biochem Biophys Res Commun. 1997 Jan 3;230(1):54-7.
[2]. Dikalov SI, et al. Amyloid beta peptides do not form peptide-derived free radicals spontaneously, but can enhance metal-catalyzed oxidation of hydroxylamines to nitroxides. J Biol Chem. 1999 Apr 2;274(14):9392-9.
其他信息
Tempone-H 是一种稳定的、以氮为中心的自由基化合物,可用作化学和生物系统中的自旋捕获剂。它用于定量分析过氧亚硝酸根和超氧自由基的生成。此外,它还可用于磁共振成像 (MRI) 和电子顺磁共振 (EPR) 光谱分析。该化合物可透过细胞膜。它并非药物,目前没有临床应用或获批。它仅供研究用途,可从化学品供应商处购买。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C9H17NO2
分子量
171.23678
精确质量
171.126
CAS号
3637-11-4
PubChem CID
98642
外观&性状
Light yellow to brown solid powder
密度
1.02g/cm3
沸点
257.5ºC at 760mmHg
闪点
109.5ºC
LogP
1.535
tPSA
40.54
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
12
分子复杂度/Complexity
189
定义原子立体中心数目
0
SMILES
ON1C(C)(C)CC(=O)CC1(C)C
InChi Key
KMEUSKGEUADGET-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C9H17NO2/c1-8(2)5-7(11)6-9(3,4)10(8)12/h12H,5-6H2,1-4H3
化学名
1-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidin-4-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~729.97 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 5.8398 mL 29.1988 mL 58.3976 mL
5 mM 1.1680 mL 5.8398 mL 11.6795 mL
10 mM 0.5840 mL 2.9199 mL 5.8398 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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