| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Activin-like kinase 5 (ALK5, also known as TGF-beta receptor type I, TGFBR1). TGFbetaRI-IN-2 is an ATP-competitive inhibitor that binds to the kinase domain of ALK5. It has a pIC50 of 7.6 (IC50 ∼25 nM) and a pEC50 of 6.63 (EC50 ∼234 nM) in cellular assays. At 1 uM, it also inhibits MAP3K2 (MEKK2) by 31%, with an IC50 value of 2.2 uM, indicating moderate selectivity. It is selective over other ALK receptors and related kinases.
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| 体外研究 (In Vitro) |
TP-008 在 1 μM 时可抑制 MAP3K2 (MEKK2) 31%，IC50 值为 2.2 μM[1]。
体外实验表明，TGFβRI-IN-2 能有效抑制 ALK5 的自身磷酸化及其下游 SMAD2/3 蛋白的磷酸化。在 TGF-β 敏感细胞系（例如，Mv1Lu 水貂肺上皮细胞、人 HaCaT 角质形成细胞）中，它能阻断 TGF-β1 诱导的 SMAD2/3 核转位和转录活性。它还能抑制 TGF-β1 诱导的上皮-间质转化 (EMT) 标志物（例如，E-钙黏蛋白减少，波形蛋白增加）。此外，它还能抑制 TGF-β1 诱导的人真皮成纤维细胞胶原蛋白生成（IC50 ∼100 nM）。它对通过 ALK1/2/3/6 信号通路传递信号的 BMP（骨形态发生蛋白）通路没有显著影响。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
TP-008（口服；50、150 和 500 mg/kg；5 天）会引起心血管毒性，表现为出血、心脏瓣膜中纤维蛋白沉积和瓣膜间质细胞增殖[1]。
体内实验表明，连续5天口服50、150和500 mg/kg剂量的TGFβRI-IN-2可诱发心血管毒性，其特征为瓣膜间质细胞增殖、中性粒细胞浸润、出血以及心脏瓣膜内纤维蛋白沉积。这种心脏毒性是长期抑制ALK5的靶向效应，因为TGF-β信号通路对于维持心脏瓣膜的完整性至关重要。目前尚未有体内疗效研究报道。据预测，在较低且无心脏毒性的剂量下，TGFβRI-IN-2在肾纤维化、肝纤维化或肺纤维化模型中具有抗纤维化活性，但尚未得到证实。 |
| 酶活实验 |
非细胞激酶抑制实验采用重组人ALK5激酶结构域（0.5-2 ug）在反应缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM EGTA、2 mM DTT、0.01% Tween-20、10 uM ATP和0.2 mg/mL聚(Glu4Tyr)肽底物）中进行。加入不同浓度的TGFβRI-IN-2（0.1-1000 nM），并在30℃下孵育60分钟。采用ELISA法（或放射性标记的33P-ATP）检测磷酸盐的掺入。IC₅0值由抑制曲线计算得出。在 1 uM 浓度下对 50 多种激酶（包括 ALK2、ALK3、ALK4、MAP2K2、MAP3K2）进行选择性分析，以确定特异性。
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| 细胞实验 |
本研究使用稳定转染了SMAD2/3反应性荧光素酶报告基因（CAGA12-Luc）的Mv1Lu（貂肺上皮细胞）。将细胞接种于96孔板（2×10⁴个细胞/孔），培养基为含1%胎牛血清的DMEM培养基。24小时后，用TGFβRI-IN-2（0.1-1000 nM）预处理细胞1小时，然后用TGF-β1（1-2 ng/mL）刺激16-24小时。使用荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。EC50定义为抑制TGF-β1诱导的荧光素酶信号50%的浓度。对于 SMAD2/3 磷酸化，将细胞用化合物 (0.1-1000 nM) 加 1 ng/mL TGF-β1 处理 1-2 小时，然后用抗磷酸化 SMAD2 (Ser465/467) 和抗磷酸化 SMAD3 (Ser423/425) 抗体进行蛋白质印迹分析。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 大鼠[1]
剂量： 50、150 和 500 mg/kg 给药途径： 口服；50、150 和 500 mg/kg；5 天 实验结果： 中剂量组和高剂量组动物均诱发了心脏瓣膜疾病。 目前尚无体内疗效研究报道。一项啮齿动物（可能是大鼠或小鼠）毒理学研究表明，连续5天以50、150和500 mg/kg的剂量口服TGFβRI-IN-2可诱发剂量依赖性的心血管毒性。动物每日一次通过灌胃给予该化合物（溶于0.5%甲基纤维素或类似溶剂）。5天治疗结束后，处死动物，取出心脏，并通过组织病理学检查心脏瓣膜（主动脉瓣、二尖瓣、三尖瓣、肺动脉瓣）。苏木精-伊红（H&E）染色和马松三色染色显示瓣膜间质细胞增殖、中性粒细胞浸润、出血和纤维蛋白沉积。心脏毒性的 NOAEL（未观察到不良反应水平）可能低于 50 mg/kg。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未报道详细的药代动力学（PK）数据。TGFβRI-IN-2 是一种口服活性 ALK5 抑制剂，其 pIC50 为 7.6，预计其口服生物利用度中等。根据其理化性质（分子量：411.82，LogP 值约为 3-4，氢键供体：1，氢键受体：7），该化合物在啮齿动物体内的终末半衰期可能为中等（2-6 小时）。观察到心脏毒性所需的口服剂量较高（50-500 mg/kg），提示该化合物的暴露量可能受限于其溶解度或代谢，或者其治疗窗较窄。目前尚未报道详细的药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t½、F%）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体内实验表明，高剂量（50-500 mg/kg，口服，每日一次，连续5天）的TGFβRI-IN-2具有心脏毒性。心脏损伤包括瓣膜间质细胞增殖（类似于黏液瘤样瓣膜病）、中性粒细胞浸润、出血以及心脏瓣膜内纤维蛋白沉积。这是ALK5抑制剂的靶向类效应，因为TGF-β信号通路对于维持瓣膜间质细胞的静止状态和内皮完整性至关重要。在这些高剂量下，未报道其他显著毒性（例如肝毒性、肾毒性、胃肠道毒性）。预计该化合物在较低剂量下耐受性良好，不会产生显著不良反应。目前尚未报道其遗传毒性或hERG基因表达数据。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TGFβRI-IN-2 (TP-008) 是一种研究级 ALK5 抑制剂，用于研究 TGF-β 信号通路在细胞过程（例如上皮间质转化 (EMT)、纤维化和癌症转移）中的作用。它尚未获准用于临床，也未进入人体试验，并非药物。它是一种用于靶点验证的工具化合物，但其临床开发可能受到体内观察到的靶向心脏毒性的限制。ALK5 抑制剂（也称为 TGFBR1 抑制剂）的心脏毒性已有充分的文献记载（例如，galunisertib、LY364947），这给其在慢性疾病治疗中的应用带来了重大挑战。该化合物仅供研究使用，可从化学品供应商处获得。
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| 分子式 |
C₂₀H₁₅CLFN₅O₂
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|---|---|
| 分子量 |
411.82
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| 精确质量 |
411.089
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| CAS号 |
1976038-41-1
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| PubChem CID |
145925651
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2
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| tPSA |
92.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
640
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=CN=C(C=C1N2C3=C(C=NC=C3)N(C2=O)CC(=O)N)C4=C(C=CC(=C4)Cl)F
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| InChi Key |
LVEUPFUJRKZPEN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H15ClFN5O2/c1-11-8-25-15(13-6-12(21)2-3-14(13)22)7-17(11)27-16-4-5-24-9-18(16)26(20(27)29)10-19(23)28/h2-9H,10H2,1H3,(H2,23,28)
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| 化学名 |
2-[1-[2-(5-chloro-2-fluorophenyl)-5-methylpyridin-4-yl]-2-oxoimidazo[4,5-c]pyridin-3-yl]acetamide
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| 别名 |
TGFβRIIN2; TGFβRI IN 2
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4282 mL | 12.1412 mL | 24.2825 mL | |
| 5 mM | 0.4856 mL | 2.4282 mL | 4.8565 mL | |
| 10 mM | 0.2428 mL | 1.2141 mL | 2.4282 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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