| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TLR5/Toll-like receptor 5/flagellin complex: IC50 = 0.85 μM[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
TH1020 阻断 TLR5/鞭毛蛋白复合物介导的下游信号传导。据推测,TH1020 与鞭毛蛋白竞争并破坏其与 TLR5 的键。 TLR5 介导的 TNF-α 几乎被 0.37 μM 的 TH1020 完全消除 [TH1020 (0.5 μM) 几乎完全消除 X 培养基 C83901 感染的 IPEC-J2 细胞中的 IL-17C [2]。当 IPEC-1 感染 C83091 时,TLR5 使用 0.5 μM TH1020 强烈抑制它。 J2 细胞中猪 β-防御素 (pBD)-2、claudin-1 和 claudin-2 mRNA 表达 [2]。
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| 酶活实验 |
尽管蛋白质-蛋白质相互作用在许多生物过程中很重要,但它们一直被认为是“不可药物的”。宿主toll样受体5 (TLR5)与鞭毛蛋白之间形成的复合物在许多病原体防御、免疫疾病和癌症中起着至关重要的作用,鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分。通过高通量筛选,我们确定了两个与共同药效团的命中点,并成功开发了一系列小分子探针,作为鞭毛蛋白与TLR5结合的新型抑制剂。在大量的实验中,4-((4-苄基-5-(吡啶4基)- 4h -1,2,4-三唑-3-基)硫代)吡啶[3',2':4,5]硫代[3,2-d]嘧啶(TH1020)被鉴定为TLR5信号通路的有效拮抗剂,具有良好的活性(IC50 =0.85±0.12 μm)和特异性。此外,TH1020被证明可以抑制由TLR5/鞭毛蛋白复合物形成介导的下游TNF-α信号通路的表达。基于分子对接模拟,TH1020可能与鞭毛蛋白竞争,破坏其与TLR5的结合。TH1020为研究这一重要的蛋白-蛋白相互作用提供了急需的分子探针,并为鉴定靶向TLR5的新疗法提供了先导化合物。[1]
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| 细胞实验 |
接种细菌前2小时,IPEC-J2单层膜与0.5 μM寡脱氧核糖核苷酸(ODN 2088;阻断TLR7/8/9信号(如上所述),TH1020(抑制TLR5信号,如上所述),20或40 ng/mL IL-17C,然后用上述不同菌株接种24 h。据报道,鞭毛蛋白在几种上皮细胞中诱导IL-17C的产生,在TH1020存在或不存在的情况下,鞭毛蛋白(100 ng/mL)也能刺激IPEC-J2单层细胞。然后,分别在刺激后4 h和24 h收集细胞和/或培养上清。随后,收集细胞并在TRIzol试剂中重悬或直接在RIPA裂解缓冲液中裂解以进行Western印迹。收集细胞上清液,在- 80℃保存备用。[2]
将TH1020和ODN 2088分别溶解在DMSO和TE缓冲液中,利用碘化丙啶法研究了这两种溶剂在长时间孵育期间对IPEC-J2单层膜的毒性作用。简单地说,IPEC-J2单层膜在24孔板上以每孔5 × 105个细胞的密度培养。分别用0.5 μM TH1020和5 μM ODN 2088处理细胞,37°C 5%加湿二氧化碳孵育24 h,每孔加入1 μL 500 μg/mL PI,室温孵育60 min。荧光检测采用激发波长为544 nm,发射波长为612 nm的多检测微孔板读卡器。在第一个60分钟的孵育期间,每隔15分钟进行一次测量,以获得未经处理的细胞中PI溶液的背景水平。然后,每隔30分钟测量23 h。24 h结束时,在每孔中加入EtOH(100%),以诱导最大死亡,然后测量最大PI荧光。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是仔猪断奶后腹泻(PWD)的重要病原体。IL-17细胞因子家族在宿主黏膜抵御细菌感染的防御机制中发挥着重要作用。此前,我们报道了IL-17A在清除仔猪ETEC感染中的潜在作用。IL-17C是IL-17家族的另一成员,在肠道上皮细胞中高表达,但其在ETEC感染中的作用尚不明确。本研究表明,F4+ ETEC可诱导肠道组织以及猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)中IL-17C mRNA和蛋白的表达。这种IL-17C的产生主要依赖于IPEC-J2细胞中的TLR5信号通路。 F4+ ETEC 感染和外源性 IL-17C 均可增加 IPEC-J2 细胞中抗菌肽和紧密连接蛋白(如猪 β-防御素 (pBD)-2、claudin-1、claudin-2 和 occludin)的表达。综上所述,我们的数据表明,肠上皮细胞中 TLR5 介导的 IL-17C 表达以独特的自分泌/旁分泌方式增强肠上皮黏膜宿主防御反应,从而抵抗 ETEC 感染。[2]
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| 分子式 |
C23H15N7S2
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|---|---|
| 分子量 |
453.542100191116
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| 精确质量 |
453.083
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| 元素分析 |
C, 60.91; H, 3.33; N, 21.62; S, 14.14
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| CAS号 |
1841460-82-9
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| PubChem CID |
124203921
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| 外观&性状 |
Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
136Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
615
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
CBBXTGWSGPEJEE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H15N7S2/c1-2-5-15(6-3-1)13-30-20(16-8-11-24-12-9-16)28-29-23(30)32-22-19-18(26-14-27-22)17-7-4-10-25-21(17)31-19/h1-12,14H,13H2
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| 化学名 |
6-[(4-benzyl-5-pyridin-4-yl-1,2,4-triazol-3-yl)sulfanyl]-8-thia-3,5,10-triazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-1(9),2(7),3,5,10,12-hexaene
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| 别名 |
TH 1020; TH-1020; 1841460-82-9; TH1020; 4-[[4-(Phenylmethyl)-5-(4-pyridinyl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl]thio]-pyrido[3',2'; 4-((4-Benzyl-5-(pyridin-4-yl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl)thio)pyrido[3',2':4,5]thieno[3,2-d]pyrimidine; CHEMBL4795753; 4-((4-Benzyl-5-(pyridin4yl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl)thio)pyrido[3',2':4,5]thieno[3,2-d]pyrimidine; TH 1020; TH1020
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~2 mg/mL (~4.41 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2049 mL | 11.0244 mL | 22.0488 mL | |
| 5 mM | 0.4410 mL | 2.2049 mL | 4.4098 mL | |
| 10 mM | 0.2205 mL | 1.1024 mL | 2.2049 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。