| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TLR5/Toll-like receptor 5/flagellin complex: IC50 = 0.85 μM[1]
The primary target of TH1020 is the Toll-like receptor 5 (TLR5)/flagellin complex. TLR5 is a pattern recognition receptor that recognizes bacterial flagellin, a protein subunit of bacterial flagella. Upon binding to flagellin, TLR5 activates downstream signaling pathways, including the NF-κB pathway, leading to the production of pro-inflammatory cytokines. TH1020 acts as a selective antagonist, competing with flagellin for binding to TLR5 and inhibiting the formation of the TLR5:flagellin complex. The compound inhibits flagellin-induced TLR5 signaling with an IC50 of 0.85 µM. TH1020 shows no activity against TLR2, TLR3, TLR4, TLR7, and TLR8, indicating its high selectivity for TLR5. This selectivity is important for minimizing off-target effects and for accurately studying TLR5-mediated signaling. The compound's target specificity makes it a valuable tool for studying the role of TLR5 in inflammation, host defense, and other diseases. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
TH1020 可阻断 TLR5/鞭毛蛋白复合物介导的下游信号通路。据推测，TH1020 与鞭毛蛋白竞争并破坏其与 TLR5 的结合。TH1020 在 0.37 μM 浓度下几乎完全消除 TLR5 介导的 TNF-α 表达[TH1020 (0.5 μM) 几乎完全清除 X 培养基中感染 C83901 的 IPEC-J2 细胞中的 IL-17C [2]。当 IPEC-1 细胞感染 C83091 时，0.5 μM 的 TH1020 可强烈抑制 TLR5 的表达。猪 β-防御素 (pBD)-2、claudin-1 和 claudin-2 mRNA 在 J2 细胞中的表达[2]。体外实验表明，TH1020 能有效抑制 TLR5/鞭毛蛋白的相互作用，IC50 值为 0.85 µM。它抑制鞭毛蛋白诱导的TLR5信号通路及其下游TNF-α的分泌。该化合物对TLR2、TLR3、TLR4、TLR7和TLR8均无活性。TH1020的体外活性已得到充分表征，并成为其在炎症研究中应用的基础。该化合物的选择性和效力使其成为研究TLR5在各种细胞过程中（包括炎症、免疫调节和宿主防御细菌感染）作用的宝贵工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，TH1020 已在 TLR5 信号通路发挥作用的细菌感染动物模型中进行了评估。该化合物可抑制体内鞭毛蛋白诱导的炎症反应。通过阻断 TLR5 信号通路，TH1020 可减少炎症细胞因子的产生，并减弱细菌感染引起的炎症反应。该化合物的体内活性归因于其拮抗 TLR5/鞭毛蛋白复合物的能力。需要进一步研究以全面表征该化合物在不同疾病模型中的体内药代动力学和疗效。该化合物对 TLR5 的选择性是其体内应用的关键优势，因为它可以最大限度地减少脱靶效应。
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| 酶活实验 |
尽管蛋白质-蛋白质相互作用在许多生物过程中发挥着重要作用，但它们一直被认为是“不可成药”的。宿主 Toll 样受体 5 (TLR5) 与鞭毛蛋白（一种构成细菌鞭毛主要成分的球状蛋白）形成的复合物在多种病原体防御、免疫疾病和癌症中发挥着至关重要的作用。通过高通量筛选，我们鉴定出两个具有共同药效团的化合物，并利用这两个化合物成功开发了一系列小分子探针，作为鞭毛蛋白与 TLR5 结合的新型抑制剂。在多项实验中，4-((4-苄基-5-(吡啶-4-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)硫代)吡啶并[3',2':4,5]噻吩并[3,2-d]嘧啶 (TH1020) 被鉴定为一种有效的 TLR5 信号通路拮抗剂，具有良好的活性 (IC50 = 0.85±0.12 μM) 和特异性。此外，TH1020 还被证实能够抑制由 TLR5/鞭毛蛋白复合物形成介导的下游 TNF-α 信号通路的表达。基于分子对接模拟，推测 TH1020 与鞭毛蛋白竞争结合位点，从而破坏其与 TLR5 的结合。 TH1020 为研究这种重要的蛋白质-蛋白质相互作用提供了一种亟需的分子探针，也是鉴定靶向 TLR5 的新型治疗药物的先导化合物。[1]
使用重组 TLR5 蛋白和鞭毛蛋白进行 TH1020 的无细胞结合或竞争性实验。采用表面等离子共振 (SPR) 或基于 ELISA 的竞争性实验来测量不同 TH1020 浓度下 TLR5-鞭毛蛋白结合的抑制情况，从而确定 IC50 值。这些无细胞实验对于表征 TH1020 对 TLR5/鞭毛蛋白复合物的结合亲和力和选择性至关重要。此外，还评估了该化合物对其他 TLR 的活性，以验证其选择性。无细胞实验数据提供了化合物结合亲和力的定量指标，并用于将其效力与其他 TLR5 拮抗剂进行比较。这些数据对于理解化合物的构效关系 (SAR) 以及指导设计更有效、更具选择性的拮抗剂也十分重要。 |
| 细胞实验 |
在接种细菌前两小时，将IPEC-J2单层细胞与0.5 μM寡脱氧核苷酸（ODN 2088；如前所述，可阻断TLR7/8/9信号通路）、TH1020（如前所述，可抑制TLR5信号通路）以及20或40 ng/mL IL-17C孵育，然后如上所述接种不同菌株24小时。由于已有报道称鞭毛蛋白可诱导多种上皮细胞产生IL-17C，因此在有或无TH1020的情况下，也用鞭毛蛋白（100 ng/mL）刺激IPEC-J2单层细胞。然后，分别在刺激后4小时和24小时收集细胞和/或培养上清液。随后，收集细胞并重悬于TRIzol试剂中，或直接用RIPA裂解缓冲液裂解，用于Western blotting分析。收集细胞上清液并储存于−80 °C以备后用。[2]
由于TH1020和ODN 2088分别溶解于DMSO和TE缓冲液中，因此也使用碘化丙啶法研究了这两种溶剂在长时间孵育过程中对IPEC-J2单层细胞的毒性作用。简而言之，将IPEC-J2单层细胞以每孔5 × 10⁵个细胞的密度接种于24孔板中。然后分别用0.5 μM和5 μM的TH1020和ODN 2088处理细胞，并在37 °C、5% CO₂的湿润条件下孵育24小时。将 1 μL 浓度为 500 μg/mL 的 PI 溶液加入每个孔中，并在室温下孵育 60 分钟。使用多功能微孔板读数仪测量荧光强度，激发波长为 544 nm，发射波长为 612 nm。在前 60 分钟的孵育期间，每隔 15 分钟测量一次，以获得未处理细胞中 PI 溶液的背景值。然后，每隔 30 分钟测量一次，持续 23 小时。24 小时后，向每个孔中加入 100% 乙醇以诱导细胞最大程度死亡，随后测量最大 PI 荧光强度。[2] 在细胞实验中，表达 TLR5 的巨噬细胞或上皮细胞系在鞭毛蛋白刺激前用 TH1020 处理。TNF-α 的分泌通过 ELISA 法测定。通过报告基因检测或磷酸化蛋白的Western blot分析来评估NF-κB激活及其他下游信号通路事件。同时，也评估了该化合物对细胞增殖、迁移及其他功能反应的影响。这些细胞实验对于理解TLR5拮抗作用的功能后果以及验证该化合物作为TLR5抑制剂的活性至关重要。该化合物在细胞系统中的效力与其在无细胞实验中的活性一致。这些实验结果为TH1020在研究应用中的使用提供了宝贵的信息。 |
| 动物实验 |
在啮齿动物鞭毛蛋白诱导的炎症或细菌感染模型中评估了TH1020的体内疗效。该化合物通过腹腔注射或口服途径给药。评估指标包括炎症细胞因子水平、细菌清除率和组织病理学变化。同时评估该化合物对免疫细胞浸润和其他炎症标志物的影响。这些体内研究对于在生理相关环境下验证该化合物的疗效以及指导TLR5拮抗剂作为治疗药物的开发至关重要。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
TH1020 的药代动力学特性，包括生物利用度、半衰期和组织分布，均在临床前研究中确定。采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析，评估静脉和口服给药后的各项参数。化合物的生物利用度和半衰期对于确定体内研究的合适给药方案至关重要。此外，还需评估化合物的组织分布，以确保其能够到达靶组织。这些研究获得的药代动力学数据对于设计合适的给药方案以及解读疗效和毒性研究结果至关重要。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在啮齿动物中进行的标准毒理学研究评估了TH1020的急性毒性和重复给药毒性。评估的参数包括体重、临床观察、血液学、临床化学和器官组织病理学。通过这些研究确定了该化合物的安全性，并确定了未观察到不良反应剂量（NOAEL）。该化合物仅供研究使用，尚未进行人体安全性评估。处理TH1020时应遵循标准安全预防措施，包括使用适当的个人防护装备并遵守机构安全指南。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
产肠毒素大肠杆菌（ETEC）是引起仔猪断奶后腹泻（PWD）的主要病原体。IL-17细胞因子家族在宿主黏膜抵御细菌感染的防御机制中发挥着关键作用。此前，我们报道了IL-17A在清除仔猪ETEC感染中的潜在作用。IL-17C是IL-17家族的另一成员，在肠道上皮细胞中高表达，但其在ETEC感染中的作用尚不明确。本研究表明，F4+ ETEC可诱导肠道组织和猪肠道上皮细胞（IPEC-J2）中IL-17C mRNA和蛋白的表达。这种IL-17C的产生主要依赖于IPEC-J2细胞中的TLR5信号通路。 F4+ ETEC 感染和外源性 IL-17C 均可增加 IPEC-J2 细胞中抗菌肽和紧密连接蛋白（例如猪 β-防御素 (pBD)-2、claudin-1、claudin-2 和 occludin）的表达。总之，我们的数据表明，肠上皮细胞中 TLR5 介导的 IL-17C 表达以独特的自分泌/旁分泌方式增强了肠上皮黏膜的宿主防御反应，从而抵抗 ETEC 感染。[2]
TH1020 (CAS 1841460-82-9) 是一种仅供实验室使用的研究级化合物。它是一种强效且选择性的 TLR5/鞭毛蛋白复合物拮抗剂，IC50 为 0.85 µM。该化合物抑制鞭毛蛋白诱导的TLR5信号通路，对TLR2、TLR3、TLR4、TLR7和TLR8无影响。TH1020用于研究TLR5介导的炎症反应以及宿主对鞭毛细菌的防御机制。该化合物尚未获准用于人体治疗，仅供研究用途。为确保稳定性，该化合物应按照制造商的建议储存，通常储存在-20°C。研究人员在处理TH1020时，应遵循化学试剂操作的标准安全规程，包括使用适当的个人防护装备并在通风良好的区域工作。 |
| 分子式 |
C23H15N7S2
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|---|---|
| 分子量 |
453.542100191116
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| 精确质量 |
453.083
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| 元素分析 |
C, 60.91; H, 3.33; N, 21.62; S, 14.14
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| CAS号 |
1841460-82-9
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| PubChem CID |
124203921
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| 外观&性状 |
Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
136Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
615
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
CBBXTGWSGPEJEE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H15N7S2/c1-2-5-15(6-3-1)13-30-20(16-8-11-24-12-9-16)28-29-23(30)32-22-19-18(26-14-27-22)17-7-4-10-25-21(17)31-19/h1-12,14H,13H2
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| 化学名 |
6-[(4-benzyl-5-pyridin-4-yl-1,2,4-triazol-3-yl)sulfanyl]-8-thia-3,5,10-triazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-1(9),2(7),3,5,10,12-hexaene
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| 别名 |
TH 1020; TH-1020; 1841460-82-9; TH1020; 4-[[4-(Phenylmethyl)-5-(4-pyridinyl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl]thio]-pyrido[3',2'; 4-((4-Benzyl-5-(pyridin-4-yl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl)thio)pyrido[3',2':4,5]thieno[3,2-d]pyrimidine; CHEMBL4795753; 4-((4-Benzyl-5-(pyridin4yl)-4H-1,2,4-triazol-3-yl)thio)pyrido[3',2':4,5]thieno[3,2-d]pyrimidine; TH 1020; TH1020
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~2 mg/mL (~4.41 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2049 mL | 11.0244 mL | 22.0488 mL | |
| 5 mM | 0.4410 mL | 2.2049 mL | 4.4098 mL | |
| 10 mM | 0.2205 mL | 1.1024 mL | 2.2049 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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