| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HCV NS5B RNA-dependent RNA polymerase (allosteric inhibitor binding to the NNI-1 site, also known as the thumb pocket I) [1].
Biochemical IC50 against genotype 1b (Con1b) NS5B polymerase: 34 nM [1]. The primary target of TMC647055 is the HCV NS5B polymerase. It acts as a potent non-nucleoside inhibitor, binding to the NS5B polymerase and inhibiting its activity. The compound has an IC50 of 34 nM in the RNA polymerase assay and an EC50 of 82 nM in cellular assays. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 Huh7-Luc 细胞中，TMC647055 表现出抗病毒活性，EC90 值为 0.3 μM [1]。TMC647055 的 EC50 值为 82 nM，在细胞 HCV 检测中表现出强大的联合作用 [2]。抗复制子活性：在稳定含有复制子的细胞系中，TMC647055 抑制 HCV 基因 1b 型的复制，中位 EC50 值分别为 77 nM（荧光素酶检测）和 139 nM（qRT-PCR 检测）。针对基因 1a 型，中位 EC50 值为 166 nM（qRT-PCR 检测）。在 40% 人血清存在下，针对基因型 1b 的 EC50 值增加至 740 nM（荧光素酶读数）[1]。
跨基因型活性（嵌合复制子）：在瞬时复制子试验中，使用来自患者分离株的 NS5B 序列的嵌合复制子，TMC647055 对基因型 1a、1b、3a、4a 和 6a 的 EC50 中值范围为 27 nM 至 113 nM。然而，与参考基因型 1b 相比，针对基因型 2a 和 2b 嵌合复制子的活性降低了 200 倍以上 [1]。 选择性和细胞毒性：TMC647055 对 HCV 表现出高选择性。在浓度高达 100 μM 时，未观察到该化合物对多种 DNA 和 RNA 病毒（巨细胞病毒、腺病毒、牛痘病毒、柯萨奇病毒、流感病毒、黄热病病毒）的抗病毒活性；在浓度高达 25 μM 时，也未观察到对登革病毒的抑制作用。该化合物对乙型肝炎病毒的 EC50 值为 86 μM。在 Huh7 细胞中，平均 CC50 值为 42.1 μM；在 MT4 细胞中，平均 CC50 值为 28.9 μM。在其他细胞系（MRC-5、HEK-293T、HepG2、VeroE6）中，CC50 值均大于 50 μM [1]。 耐药性谱（突变）：TMC647055 的活性因 NNI-1 结合口袋突变而显著降低。在瞬时复制子分析中，L392I、V494A 和 P495L 突变的 EC50 倍数变化分别为 9 倍、3 倍和 371 倍。活性不受与其他抑制剂类别（NNI-2、-3、-4、核苷类抑制剂、NS3/4A 蛋白酶抑制剂、NS5A 抑制剂）耐药相关的突变的影响[1]。 体外耐药性筛选：在 1b 基因型复制子细胞中，使用 TMC647055 进行的耐药性筛选实验经常筛选出 NS5B 残基 L392 (L392I) 和 P495 (P495S/T/L) 的突变。在基因型 1a 实验中，P495 (P495S/L)、Q309 (Q309R/K)、F574 (F574V/S/A) 和 C575 (C575F/S) 位点的突变最为常见 [1]。 克隆形成实验：在使用 Huh7-Luc 复制子细胞进行的克隆形成实验中，浓度为 1.5 μM 的 TMC647055 完全抑制了耐药复制子克隆的形成。浓度为 750 nM 时，需要与 NS3/4A 蛋白酶抑制剂 TMC435 (80 nM) 联合使用才能抑制克隆形成 [1]。 体外实验表明，TMC647055 是一种有效的 HCV NS5B 聚合酶抑制剂，在 RNA 聚合酶活性测定中，其 IC50 值为 34 nM。在细胞试验中，其EC50值为82 nM，且细胞毒性极低（CC50 > 20 μM）。TMC647055（1.5 μM和3.75 μM）可降低HCV复制子RNA水平。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
复制子清除和反弹试验：在为期 2 周的 Huh7-Luc 复制子细胞清除试验中，1.5 μM 和 3.75 μM 的 TMC647055 均能剂量依赖性地降低 HCV 复制子 RNA 水平，最大降低值分别为 3.1 log10 和 3.7 log10。然而，停药后 HCV RNA 水平出现反弹，表明单药治疗不足以完全清除病毒。相比之下，1.5 μM TMC647055 与 100 nM TMC435 联用可使 HCV RNA 在清除期迅速下降至定量限以下，并在停药后 3 周内防止病毒反弹 [1]。
TMC647055（化合物 18a）（2 mg/kg 静脉注射；10 mg/kg 口服）表现出可接受的药代动力学特征，单次口服 10 mg/kg 后具有较高的口服生物利用度，同时结合中等剂量和较高的全身暴露量。血浆清除率和分布容积较低 [2]。 在体内，TMC647055 在大鼠和犬中具有良好的药代动力学特征。它正在被开发用于治疗 HCV 感染。然而，现有文献中关于动物模型体内疗效的具体数据有限。 |
| 酶活实验 |
引物依赖性RNA聚合酶（RdRp）活性测定：采用引物依赖性转录活性测定法测定TMC647055的生化活性。将纯化的Con1b NS5BAC21聚合酶（20 nM）与抑制剂预孵育15分钟。加入含有5'-生物素标记的寡核苷酸（rG13）引物、poly(rC)模板、GTP和[3H]GTP的混合物启动反应。室温孵育2小时后，加入链霉亲和素包被的SPA磁珠终止反应。基因型 1b NS5B 聚合酶的 IC50 测定值为 34 nM [1]。
表面等离子共振 (SPR) 结合动力学：采用 SPR 技术测定了 TMC647055 与各种 NS5BAC21 聚合酶分离株之间的相互作用。将纯化的 His6 标签聚合酶固定在传感器芯片上。采用单循环动力学方法，每次注入 300 秒，共注入 5 种递增浓度的抑制剂，并监测解离情况 1200 秒。使用全局拟合分析数据。对于野生型 Con1b NS5B，中位 KD 值为 4.1 nM，kon 为 2.2E+04 1/Ms，koff 为 8.9E-05 1/s，复合物半衰期 (t1/2) 为 130.5 分钟。 P495L突变体由于koff值增加200倍和kon值降低6倍，其亲和力显著降低（KD = 6.5 μM）[1]。 TMC647055的体外酶或受体结合试验包括测量其对HCV NS5B聚合酶活性的抑制作用。该试验使用纯化的重组NS5B聚合酶和模板-引物底物，并在核苷酸存在下进行。通过测量放射性标记的核苷酸掺入到正在延伸的RNA链中的量来进行。将该化合物与酶和底物在不同浓度下孵育，以确定IC50值（34 nM）。 |
| 细胞实验 |
稳定复制子荧光素酶报告基因检测：将含有1b型双顺反子亚基因组HCV复制子（克隆ET）的Huh7-Luc细胞接种，并用TMC647055系列稀释液孵育3天。通过测量萤火虫荧光素酶活性来确定HCV复制的抑制情况。EC50和EC90值由剂量反应曲线计算得出[1]。
稳定复制子qRT-PCR检测：将Huh7-Luc（1b型）、Huh7-SG-Con1b（1b型）和Huh7-SG-1a（1a型）复制子细胞与TMC647055孵育3天。采用定量实时PCR检测HCV复制子RNA水平，并以细胞参考mRNA（RPL13基因）进行标准化[1]。 突变体和嵌合体瞬时复制子检测：构建突变复制子（NS5B位点定向突变）或嵌合复制子（NS5B序列来自不同基因型）。将体外转录的RNA电穿孔导入Huh7-Lunet细胞。4天后，通过比较抑制剂处理组和未处理对照组的荧光素酶发光值来评估药物敏感性[1]。 细胞毒性检测：将不同浓度的TMC647055与多种细胞系（MRC-5、HEK-293T、HepG2、VeroE6）孵育3天。通过添加刃天青分析细胞毒性，并测量转化产物（试卤灵）的荧光强度。CC50 值根据剂量依赖性抑制曲线计算得出[1]。 基于荧光素酶的反向筛选：将表达 CMV 启动子控制的荧光素酶报告基因的 Huh7 细胞（Huh7-CMV-Luc）和表达 HIV-1 LTR 控制的荧光素酶报告基因的 MT4 T 淋巴细胞（MT4-LTR-Luc）与 TMC647055 孵育 3 天。通过测量荧光素酶发光强度确定细胞毒性[1]。 克隆形成实验：将 Huh7-Luc 复制子细胞接种，并在 G418 存在下，单独或与 TMC435 联合处理不同浓度的 TMC647055。每周更换两次培养基。 2-3周后，剩余的细胞克隆用中性红染色并计数[1]。 复制子清除和反弹试验（基于细胞）：在不含G418的情况下，将Huh7-Luc复制子细胞用TMC647055单独或与TMC435联合处理2周。每周传代培养两次，收集细胞沉淀进行RNA提取和RT-PCR，以监测HCV复制子RNA水平。2周后，撤除抑制剂，并在G418存在下继续培养细胞3周，以观察残留HCV RNA的潜在反弹[1]。 使用HCV复制子细胞系进行TMC647055的体外细胞试验。用该化合物处理细胞，并通过qPCR测量HCV RNA复制。评估细胞活力以确定CC50（>20 μM）。该化合物的 EC50 (82 nM) 是通过 HCV RNA 水平的降低来确定的。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 大鼠[2]
剂量： 2 mg/kg；10 mg/kg 给药途径： 2 mg/kg，静脉注射；10 mg/kg，口服；单次 实验结果：编号 Cl (L/h/kg) Cmax (ng /mL) [肝脏] (ng/mL) L/PF (%) TMC647055 (化合物 18a) 3.2 440 7800 46 ＞66 大鼠药代动力学研究：雄性大鼠分别静脉注射 (2 mg/kg) 和口服 (10 mg/kg) 给予 TMC647055。静脉注射载体为PEG400/生理盐水（70/30），口服载体为PEG400/2%维生素E TPGS。测定了血浆清除率、肝脏浓度（给药后7小时）、肝血比值和口服生物利用度[2]。 犬药代动力学研究：犬单次口服10 mg/kg的TMC647055。口服载体为PEG400/2%维生素E TPGS。评估了所得药代动力学参数（生物利用度、Cmax、AUC、清除率、Vdss）[2]。 TMC647055的体内动物实验采用啮齿动物模型进行。该化合物经口服给药，并在大鼠和犬中评估其药代动力学特征。然而，在HCV感染模型中的具体体内疗效数据有限。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
体外代谢稳定性（大鼠和人肝微粒体）：代谢稳定性以浓度为 5 μM 时 15 分钟后化合物的代谢百分比表示。对于 TMC647055（化合物 18a），在大鼠肝微粒体中的代谢率为 30%，在人肝微粒体中的代谢率为 35% [2]。
大鼠药代动力学：静脉注射（2 mg/kg，溶剂：PEG400/生理盐水 70/30）后，TMC647055 的血浆清除率 (Cl) 为 3.2 L/h/kg。口服给药（10 mg/kg，赋形剂：PEG400/2% vitE-TPGS）后，Cmax 为 440 ng/mL，给药后 7 小时肝脏浓度为 7800 ng/mL，肝血比为 46，口服生物利用度 >66% [2]。 犬药代动力学：单次口服 10 mg/kg（赋形剂：PEG400/2% vitE-TPGS）后，TMC647055 显示出较高的口服生物利用度 (F = 87%)、Cmax 为 10.2 μM、AUC0-inf 为 25.8 μM·h、中等血浆清除率 (Cl = 0.54 L/h/kg) 和较低的分布容积 (Vdss = 0.32 L/kg) [2]。 药代动力学 (PK) 特性TMC647055 的分子量为 606.73，分子式为 C32H38N4O6S。CAS 编号为 1204416-97-6。该化合物在大鼠和犬中均表现出良好的药代动力学特征。粉末在 -20°C 下可稳定保存 3 年。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
细胞毒性：TMC647055在多种细胞系中均未显示出细胞毒性。在Huh7细胞中，平均CC50为42.1 μM，在MT4细胞中为28.9 μM。在MRC-5、HEK-293T、HepG2和VeroE6细胞中，CC50均大于50 μM [1]。在Huh7细胞中，相关类似物的选择性指数（CC50/EC50）超过70至>400 [2]。
体内代谢：在大鼠体内，TMC647055的体内代谢未产生二期代谢物，例如活性酰基葡糖醛酸苷[2]。 细胞色素P450抑制：未检测到TMC647055对细胞色素P450酶的显著抑制作用，表明其药物相互作用的可能性较低[2]。 遗传毒性和心血管效应：在临床前试验中，TMC647055在遗传毒性和心血管效应的检测中显示出可接受的指标[2]。 TMC647055的毒理学数据表明其细胞毒性极低（CC50 > 20 μM）。作为一种研究化合物，其安全性是重要的考量因素。该化合物在临床前模型中，有效剂量下通常耐受性良好。然而，其长期安全性仍需进一步评估。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
作用机制 (MOA)：TMC647055 是一种非核苷类抑制剂，可与 HCV NS5B 聚合酶上的变构 NNI-1 位点（拇指口袋 I）结合。据推测，这种结合可将柔性 λ1 环从其拇指结构域结合位点上置换下来，扰乱手指结构域和拇指结构域之间的相互作用，从而将酶锁定在开放的、无活性的构象中，并阻止 RNA 合成 [1]。
结合动力学：SPR 研究表明，TMC647055 对大多数基因型具有高效力，这主要归因于其极慢的解离速率 (koff)，从而导致复合物半衰期 (t1/2) 较长，尤其是对基因型 1b 的半衰期长达 130.5 分钟。对2b基因型活性降低归因于其解离速率加快9倍以上以及复合物半衰期缩短9倍以上[1]。 临床状态：截至本文发表时，TMC647055正在进行治疗慢性丙型肝炎的临床试验。该药物已完成健康志愿者和丙型肝炎病毒（HCV）感染患者的I期研究，证实了其安全性、耐受性和抗病毒活性。随后，该药物正在进行II期临床试验[1][2]。 TMC647055已用于治疗丙型肝炎、慢性丙型肝炎和慢性丙型肝炎病毒感染的研究试验。 其他信息：TMC647055是一种强效的非核苷类NS5B聚合酶抑制剂。它正在被开发用于治疗HCV感染。该化合物也称为TMC-647055。其CAS编号为1204416-97-6。 |
| 分子式 |
C32H38N4O6S
|
|---|---|
| 分子量 |
606.732326984406
|
| 精确质量 |
606.251
|
| 元素分析 |
C, 63.35; H, 6.31; N, 9.23; O, 15.82; S, 5.28
|
| CAS号 |
1204416-97-6
|
| 相关CAS号 |
TMC647055 Choline salt
|
| PubChem CID |
44556044
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.669
|
| LogP |
3.77
|
| tPSA |
122.05
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
43
|
| 分子复杂度/Complexity |
1170
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
S1(N(C)CCOCCN(C)C(C2=CC3C=C(C=CC=3C3=C(C4C=CC(C(N1)=O)=CC=4N3C2)C1CCCCC1)OC)=O)(=O)=O
|
| InChi Key |
UOBYJVFBFSLCTQ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H38N4O6S/c1-34-13-15-42-16-14-35(2)43(39,40)33-31(37)22-9-11-27-28(19-22)36-20-24(32(34)38)17-23-18-25(41-3)10-12-26(23)30(36)29(27)21-7-5-4-6-8-21/h9-12,17-19,21H,4-8,13-16,20H2,1-3H3,(H,33,37)
|
| 化学名 |
28-cyclohexyl-22-methoxy-10,16-dimethyl-9,9-dioxo-13-oxa-9λ6-thia-1,8,10,16-tetrazapentacyclo[16.8.1.12,6.13,26.020,25]nonacosa-2,4,6(29),18,20(25),21,23,26(28)-octaene-7,17-dione
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| 别名 |
TMC647055; TMC-647055; TMC 647055; UNII-11BD024G7J; 11BD024G7J;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6482 mL | 8.2409 mL | 16.4818 mL | |
| 5 mM | 0.3296 mL | 1.6482 mL | 3.2964 mL | |
| 10 mM | 0.1648 mL | 0.8241 mL | 1.6482 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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