Tolclofos-methyl   中文名称: 甲基立枯磷

Tolclofos-methyl targets phospholipid biosynthesis in fungi, disrupting cell membrane formation and function. By inhibiting this essential process, it prevents fungal growth and reproduction. It is effective against a broad spectrum of fungal pathogens, including Deuteromycetes, Basidiomycetes, and Ascomycetes.

体外实验表明，托克洛福斯-甲基能抑制多种真菌病原体的生长。其抗真菌活性可通过测定琼脂或肉汤稀释法中的最小抑菌浓度（MIC）或抑制50%真菌生长的浓度（IC50）来评估。它对立枯丝核菌和其他土壤真菌表现出强效的活性。

在生物防治中，甲基托克洛福斯可施用于土壤或作物，以控制真菌病害。它能有效保护马铃薯、蔬菜和观赏植物等作物免受猝倒病、茎腐病和菌核病等病害的侵害。该药剂可被植物根系吸收，提供系统性保护。

采用标准肉汤稀释法或琼脂稀释法评估托克洛福斯-甲基的体外抗真菌活性。将该杀菌剂在培养基中进行系列稀释，并加入真菌菌种。培养后，通过测量真菌生长情况确定最小抑菌浓度（MIC）或半数抑制浓度（IC50）。

由于托克洛福斯-甲基的作用靶点是真菌而非哺乳动物，因此通常不进行体外细胞试验。可以通过测量磷脂生物合成的抑制或细胞膜完整性的破坏来研究其对真菌细胞的影响。

甲基托克洛福斯不作为药物用于体内动物实验。它是一种农用化学品，其安全性是通过对哺乳动物、鸟类和水生生物进行环境毒理学研究来评估的。这些研究评估其急性毒性和慢性毒性、生物蓄积性以及对生殖和发育的影响。

吸收、分布和排泄
八周龄雄性和雌性ICR小鼠经口给予5 mg/kg体重的[(14)C-4-甲基]-托克罗夫斯-甲基（放射化学纯度99%），溶于玉米油中，并在给药后7天内监测尿液、粪便和呼出气体中的放射性碳含量。24小时内，69-76%的给药放射性标记物质经尿液排出，4-6%经粪便排出，不足1%经呼出气体排出。给药7天后，体内残留放射性碳总量不足给药剂量的1%。将6周龄的Sprague-Dawley大鼠口服5 mg/kg体重的[(14)C-4-甲基]-托克罗夫斯-甲基（放射化学纯度99%），溶于玉米油中，并在给药后7天内监测尿液、粪便和呼出气体中的放射性碳含量。24小时内，62-67%的给药剂量经尿液排出，16-21%经粪便排出，不足1%经呼出气体排出。给药7天后，体内残留放射性碳总量不足给药剂量的1%。给药后1小时和6小时进行的全身放射自显影显示，放射性标记物质在胃和肠道中的积累量最高，其次是肾脏和肝脏。雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠分别单次口服5或200 mg/kg体重的托克罗福斯-甲基（tocrofos-methyl），该化合物的苯环上均匀标记有¹⁴C（放射化学纯度>99%）。另一组动物连续14天口服未标记的托克罗福斯-甲基，剂量为5 mg/kg体重，随后单次口服5 mg/kg体重的[¹⁴C-苯基]-托克罗福斯-甲基。所给的放射性碳很容易排出体外，48小时内超过95%的剂量通过尿液和粪便排出。7天后，85-91%的药物通过尿液排出。此时的粪便排泄情况如下：连续给药组，雄性9.3%，雌性12%；低剂量组，雄性20%，雌性19%。高剂量组中，男性占20%，女性占12%。所有组别中，以¹⁴C-二氧化碳形式排出的给药剂量均不足0.1%。几乎所有组织中的¹⁴C浓度峰值均在2小时内达到。低剂量给药后，肾脏中¹⁴C浓度最高；以托克罗福斯甲基当量表示，男性肾组织中的¹⁴C浓度为4700 ng/g，女性肾组织中的¹⁴C浓度为3450 ng/g；男性血浆中的¹⁴C浓度为1140 ng/mL，女性血浆中的¹⁴C浓度为1270 ng/mL。雄性大鼠肝脏中的¹⁴C浓度为1240 ng/g组织，雌性大鼠肝脏中的¹⁴C浓度为1220 ng/g组织。雄性大鼠血液中¹⁴C浓度为736 ng/mL，雌性大鼠血液中¹⁴C浓度为835 ng/mL。给药72小时后，各器官中¹⁴C浓度≤其各自峰值浓度的5%。7天后，残余放射性低于给药剂量的1%。在胆管插管的雄性和雌性大鼠中，48小时内¹⁴C的累积排泄量分别为：胆汁5.8-12%，尿液47-59%，粪便42-24%。

---

代谢/代谢物
雄性ICR小鼠口服5 mg/kg体重的[¹⁴C-4-甲基]-托克罗夫斯-甲基；通过色谱法从粪便和尿液中分离代谢物，并用标准品进行共色谱和/或光谱分析鉴定。在粪便中检测到的主要代谢物包括：2,6-二氯-4-甲基苯酚（占剂量标签的9%）、O,O-二甲基-O-(2,6-二氯-4-羧基苯基)磷酸酯（11%）、O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-羧基苯基)磷酸酯（12%）、3,5-二氯-4-羟基苯甲酸（12%）和3,5-O-二氯-4-羟基苄基甘氨酸（13%）。主要的生物转化反应包括：氧化脱硫生成氧化化合物及其衍生物；4-甲基氧化生成醇和酸；PO-芳基键和PO-甲基键的断裂；以及生成的酸与甘氨酸的结合。除3,5-O-二氯-4-羟基苄基甘氨酸外，小鼠体内发现的代谢物与大鼠体内发现的代谢物相似。雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠分别口服5或200 mg/kg体重的甲基托克洛福斯，该药物在4-甲基或苯环上均匀分布的位点上用¹⁴C标记。部分大鼠预先连续14天以5 mg/kg体重/天的剂量服用未标记的甲基托克洛福斯。通过色谱法从粪便、尿液、胆汁和主要组织中分离代谢物，并利用共色谱和/或光谱分析与标准品进行鉴定。在排泄物中检测到10多种代谢物。未观察到与性别或剂量相关的显著差异。在排泄物中检测到的主要代谢物为O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-甲基苯基)磷酸酯（占尿液的10-26% (14)C）、O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-羟甲基苯基)硫代磷酸酯（12-25%）、O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-羧基苯基)硫代磷酸酯（11-35%）和O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-甲基苯基)硫代磷酸酯（12-44%）。在插管大鼠中，给药后24小时内排泄到胆汁中的放射性标记物质大部分与极性代谢物相关；胆汁中的主要代谢物为O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-羟甲基苯基)硫代磷酸酯和2,6-二氯-4-甲基苯酚葡糖醛酸苷。给药后24小时内，粪便中排出的放射性碳仅与母体化合物相关。口服给药两小时后，血液、肝脏和肾脏中的主要代谢物为O,O-二甲基-O-(2,6-二氯-4-羧基苯基)硫代磷酸酯、3,5-二氯-4-羟基苯甲醛、O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-甲基苯基)硫代磷酸酯和O-甲基-O-氢-O-(2,6-二氯-4-羟甲基苯基)硫代磷酸酯。肝脏中仅检测到痕量母体化合物。主要的生物转化反应包括氧化脱硫生成氧化化合物及其衍生物、4-甲基氧化生成醇和酸、PO-芳基键和PO-甲基键的断裂，以及所得酸和酚与葡萄糖醛酸的结合。
托克洛福斯-甲基可被哺乳动物吸收和代谢，生物蓄积潜力低。它主要通过尿液和粪便排出体外。其在土壤中的半衰期相对较短，具体取决于环境条件。

毒性概述
识别和用途：甲基杀菌剂是一种农业杀菌剂。人体研究：在体外人雌激素活性测定中，甲基杀菌剂诱导了微弱的反应。在体外人癌细胞（HeLa细胞）非程序性DNA合成测定中，结果为阴性。动物研究：在兔中，甲基杀菌剂仅引起轻微的眼刺激，未引起皮肤刺激。在豚鼠中，未引起皮肤致敏。大鼠、小鼠和犬急性暴露于甲基杀菌剂后，出现自发活动减少、呼吸困难、竖毛、尿失禁和共济失调。这些症状在第10天完全消退。在接受1000 mg/kg体重剂量的犬中，与接受较低剂量的犬相比，治疗16天后脑胆碱酯酶活性降低。在浓度为 2000 ppm 的犬中，雌性犬的血浆胆碱酯酶活性在整个研究期间下降了 19%～26%，但雄性或雌性犬的红细胞胆碱酯酶活性均未观察到显著下降，雄性犬的血浆胆碱酯酶活性也未观察到显著下降。脑胆碱酯酶活性不受治疗影响。在经皮给药的兔中，雄性兔的红细胞胆碱酯酶活性低于对照组，但未观察到剂量反应关系。在剂量为 300 和 1000 mg/kg 体重/天的动物中，雄性和雌性犬的血浆胆碱酯酶活性均低于对照组（下降 22%～29%）。在剂量为 1000 mg/kg 体重/天的雌性犬中，肾脏相对重量增加了 20%。在剂量高达 3000 mg/kg 体重/天时，托克罗福斯-甲基对兔无致畸性，但对雌兔有毒性。在剂量高达 50 mg/kg 体重/天时，托克罗福斯-甲基对大鼠无胚胎毒性、胎儿毒性或致畸性。针对鼠伤寒沙门氏菌 TA98、100、1535、1537 和 1538 的体外回复突变试验结果均为阴性，与代谢活化无关。在大鼠和小鼠中进行的体内遗传毒性研究结果也为阴性。

---

非人类毒性值
雄性大鼠口服LD50：约5000 mg/kg
雄性大鼠皮肤LD50：>5000 mg/kg
雄性大鼠腹腔注射LD50：约5000 mg/kg
雄性大鼠皮下注射LD50：>5000 mg/kg
有关甲基托克洛福斯（共18项）更完整的非人类毒性数据，请访问HSDB记录页面。
甲基托克洛福斯对哺乳动物的急性口服毒性较低。但是，它可能刺激皮肤和眼睛。它被归类为皮肤致敏剂。它对鱼类和水生生物具有中等毒性。与所有农药一样，在处理和施用过程中应采取适当的安全预防措施。

甲基托克罗磷是一种有机硫代磷酸酯，化学名称为2,6-二氯-4-甲基苯酚，其中羟基上的氢原子被二甲氧基硫代磷酸酯基团取代。甲基托克罗磷是一种磷脂生物合成抑制剂和杀菌剂，用于防治由红腐病菌（Typhula incarnata）、罗尔夫氏皮壳菌（Corticium rolfsii）、石川腐霉（Typhula ishikariensis）和立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）引起的土壤传播病害。它是一种抗真菌农药，属于有机硫代磷酸酯和二氯苯化合物。
甲基托克罗磷是一种广泛使用的杀菌剂，以多种商品名销售，包括Risolex、Rizolex和Basilex。它用于农业，防治多种作物的土壤传播真菌病害。它不是药品，也没有用于人类的临床应用。

C9H11O3PSCL2

301.12664

299.954

57018-04-9

91664

White crystals from methanol
Colorless crystals
White cyrstalline solid

1.4±0.1 g/cm3

338.5±52.0 °C at 760 mmHg

78-80°C

158.5±30.7 °C

0.0±0.7 mmHg at 25°C

1.563

4.03

69.59

0

4

4

16

260

0

S=P(OC)(OC1=C(Cl)C=C(C)C=C1Cl)OC

OBZIQQJJIKNWNO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C9H11Cl2O3PS/c1-6-4-7(10)9(8(11)5-6)14-15(16,12-2)13-3/h4-5H,1-3H3

(2,6-dichloro-4-methylphenoxy)-dimethoxy-sulfanylidene-λ5-phosphane

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 36 mg/mL (~119.55 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

---

注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

---

口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

---

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。