| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Methionine aminopeptidase 2 (MetAP2). TP-004 binds to the active site of MetAP2 and chelates the divalent metal ion (e.g., Mn2+, Co2+, or Zn2+) essential for enzymatic activity, acting as a non-covalent, reversible inhibitor with an IC50 of 6 nM. It is highly selective for MetAP2 over the closely related MetAP1 (IC50 > 10 uM) and other metalloproteases, making it an excellent chemical probe.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，TP-004 可抑制 MetAP2 的酶活性，阻断新生多肽 N 端甲硫氨酸残基的裂解。这会损害靶蛋白（包括血管生成和细胞增殖的关键调节因子）的正常成熟、稳定性和功能。在人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中，TP-004 抑制 MetAP2 活性的 EC50 为 15 nM，该值通过检测 N 端甲硫氨酸形式的 14-3-3γ 蛋白的积累量来测定。TP-004 可抑制细胞增殖和血管生成，其抑制 HUVEC 生长的 IC50 值在低纳摩尔至微摩尔范围内。研究表明，TP-004 可通过诱导 G1 期细胞周期阻滞来抑制多种癌细胞系（例如，HCT-116 结肠癌细胞系和 MDA-MB-231 乳腺癌细胞系）的增殖。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无已发表的TP-004单药体内研究。基于MetAP2在血管生成中的已知功能以及其他MetAP2抑制剂（例如，富马吉林、TNP-470、M8891）的作用，预计TP-004在小鼠异种移植模型中给药后可抑制肿瘤生长和血管生成。预计TP-004能够穿过血脑屏障（与其他MetAP2抑制剂类似），并可能对原位脑肿瘤模型有效。然而，目前尚未有关于TP-004的此类数据报道。
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| 酶活实验 |
非细胞 MetAP2 抑制实验：将重组人 MetAP2（大肠杆菌表达）与不同浓度的 TP-004（0.1-1000 nM）在测定缓冲液（50 mM HEPES pH 7.2、50 mM NaCl、5 mM MnCl2、1 mM DTT）中于 37℃ 孵育 30 分钟。加入荧光底物 Met-AMC（甲硫氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素，100 uM），使用荧光酶标仪（激发波长 380 nm，发射波长 460 nm）测定 30 分钟内游离 AMC 的酶促释放量。根据反应速率计算抑制常数（IC50）。可通过透析或稀释实验验证抑制作用的可逆性。使用相同的底物进行针对 MetAP1 的选择性分析。
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| 细胞实验 |
将HUVEC细胞接种于96孔板中，培养基为EGM-2内皮细胞生长培养基。24小时后，用TP-004（0.001-10 uM）处理细胞24-72小时。采用Western blot法，使用仅识别N端甲硫氨酰化形式的特异性抗体，检测N端甲硫氨酰化14-3-3γ（N-Met-14-3-3γ）的积累。为检测细胞增殖，将HUVEC细胞或癌细胞（例如HCT-116、MDA-MB-231）用TP-004（0.01-10 uM）处理48-72小时，并通过MTT或CellTiter-Glo法评估细胞活力。IC50值根据剂量反应曲线计算。为了评估血管生成，可以在 Matrigel 上进行 HUVEC 管形成试验：将细胞接种到涂有 Matrigel 的培养板上，并在 TP-004 存在下培养 6-18 小时，然后量化管的长度和分支点。
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| 动物实验 |
目前尚无动物实验报道。一项假设性研究将使用携带HCT-116异种移植瘤的裸鼠。TP-004将配制成合适的溶剂（例如，10% DMSO、30% PEG300、5% Tween-80、55%生理盐水），并每日一次腹腔注射（10-30 mg/kg）或皮下注射（使用渗透泵进行缓释），持续14-21天。每2-3天测量一次肿瘤体积，并在研究结束时收集肿瘤组织，用于分析MetAP2靶点结合情况（N-Met-14-3-3γ积累）和细胞凋亡标志物。微血管密度（MVD）将通过CD31免疫组化进行评估。然而，目前尚无此类数据。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未有关于TP-004的药代动力学数据报道。根据其理化性质（分子量：363.34，LogP值约为2.5-3.0，氢键供体：2，氢键受体：6，TPSA约为90埃²），预计其口服生物利用度中等（30-50%），在啮齿动物体内的半衰期为2-4小时。TP-004可溶于DMSO（溶解度>30 mg/mL），预计能够轻易穿过生物膜。该化合物可能通过CYP450酶（CYP3A4、CYP2C9）代谢，并可能发生葡萄糖醛酸化。预计其药代动力学性质与相关的MetAP2小分子抑制剂（如M8891）相似，后者已证实具有口服生物利用度和脑渗透性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚未有关于TP-004毒性的数据报道。在HUVEC和癌细胞系中，TP-004在低于其靶点结合EC50值（15 nM）的浓度下未显示出明显的细胞毒性。当浓度超过1 μM时，在某些细胞系中可能会观察到非特异性细胞毒性。作为一种MetAP2抑制剂，TP-004的潜在毒性预计较低，因为其他MetAP2抑制剂在临床前研究中已显示出可接受的安全范围。目前尚无遗传毒性、心脏毒性（hERG）或器官特异性毒性数据。应采取标准的实验室操作防护措施（手套、实验服、护目镜）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TP-004 是一种特性明确的化学探针，用于研究 MetAP2 在蛋白质成熟、血管生成和细胞增殖中的作用。它尚未获准用于临床，也未进入人体试验，并非药物。它仅供研究使用，可从化学品供应商处获得。MetAP2 是肿瘤学（例如 TNP-470、M8891）和肥胖症（例如贝洛拉尼）中已验证的治疗靶点。TP-004 是研究 MetAP2 生物学以及评估 MetAP2 抑制剂在癌症、代谢性疾病和涉及过度血管生成的疾病（例如年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变）中的治疗潜力的重要工具。它是一种强效、可逆的非共价抑制剂，可替代富马吉林等共价抑制剂。
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| 分子式 |
C17H16F3N5O
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|---|---|
| 分子量 |
363.33705329895
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| 精确质量 |
363.13
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| CAS号 |
1454299-21-8
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| PubChem CID |
89794927
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| LogP |
2.7
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| tPSA |
77.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
507
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
FC(C1=CC2=C(C=NN2)C(=C1)C1C=NC(=NC=1C)N1CC[C@H](C1)O)(F)F
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| InChi Key |
BNTAEJNPQLMGDJ-LLVKDONJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H16F3N5O/c1-9-13(6-21-16(23-9)25-3-2-11(26)8-25)12-4-10(17(18,19)20)5-15-14(12)7-22-24-15/h4-7,11,26H,2-3,8H2,1H3,(H,22,24)/t11-/m1/s1
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| 化学名 |
(3R)-1-[4-methyl-5-[6-(trifluoromethyl)-1H-indazol-4-yl]pyrimidin-2-yl]pyrrolidin-3-ol
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| 别名 |
TP004; TP 004
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~688.06 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7522 mL | 13.7612 mL | 27.5224 mL | |
| 5 mM | 0.5504 mL | 2.7522 mL | 5.5045 mL | |
| 10 mM | 0.2752 mL | 1.3761 mL | 2.7522 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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