| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Macrophage inducible C-type lectin (Mincle), which signals through Fc receptor gamma chain (FcRγ), spleen tyrosine kinase (Syk), and the adaptor protein Card9, leading to NF-κB activation. [1]
- Nlrp3 inflammasome, leading to caspase-1 activation and IL-1β secretion. [1] Trehalose-6,6'-dibehenate targets the macrophage-inducible C-type lectin (Mincle), a pattern recognition receptor expressed on macrophages and other immune cells. Mincle recognizes mycobacterial cord factor and related glycolipids, triggering downstream signaling pathways that activate the innate immune response. By binding to Mincle, TDB acts as an agonist, promoting the production of pro-inflammatory cytokines and the activation of antigen-presenting cells. This makes TDB a potent and effective vaccine adjuvant, particularly for tuberculosis vaccines. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
TDB（5–300 μg/mL）可剂量依赖性地诱导野生型小鼠LPS预处理的骨髓来源树突状细胞（BMDC）分泌IL-1β，其作用与天然脐带因子TDM和其他颗粒性炎症小体激活剂（如MSU）相当。[1] - TDB可诱导caspase-1活化（Western blot检测上清液中的p10亚基）。泛caspase抑制剂z-VAD-FMK可显著降低IL-1β的分泌，但不影响TNF-α的产生。 [1]
- 在 Nlrp3⁻/⁻、Asc⁻/⁻ 和 caspase-1⁻/⁻ 小鼠的骨髓来源树突状细胞 (BMDC) 中，TDB 诱导的 IL-1β 分泌被抑制，而 TNF-α 的产生不受影响或增加。[1] - Card9⁻/⁻ BMDC 在未预处理时 IL-1β 和 TNF-α 分泌减少，但 LPS 预处理后 IL-1β 分泌恢复至野生型水平，表明 Card9 是预处理所必需的，但并非炎症小体激活所必需的。 [1] - 使用细胞松弛素D (100 nM) 抑制吞噬作用、使用巴弗洛霉素A1 (100–400 nM) 抑制溶酶体酸化以及使用CA-074-Me (10 μM) 抑制组织蛋白酶均显著降低了TDB诱导的IL-1β分泌，但对ATP诱导的IL-1β分泌没有影响。[1] - 使用格列本脲 (50 μM) 或高浓度细胞外KCl (50 mM) 抑制钾离子外流可降低TDB诱导的IL-1β分泌和caspase-1活化。ROS清除剂APDC (500 μM) 和依布硒仑 (2 μM) 也以类似的方式降低了IL-1β分泌，但不影响TNF-α。 [1] - 趋化因子（MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、KC、MIP-2）的产生不受Nlrp3缺陷的影响。[1] - 在DDA脂质体（二甲基二十八烷基铵）中，掺入TDB（6.4–20 mol%）显著提高了胶体稳定性，防止了在4°C和25°C储存期间粒径的增大。未掺入TDB的DDA脂质体则迅速聚集。[2] - DSC分析表明，TDB掺入DDA双层后，导致相变温度（Tm）浓度依赖性降低（从47.2°C降至41.8°C）和相变峰展宽，表明发生了横向相分离。 [2] - DDA-TDB脂质体通过静电相互作用吸附了67-79%的Ag85B-ESAT-6抗原（带负电荷，pI 4.8）。在4°C下放置7天后，抗原保留率约为80%，且DDA-TDB脂质体保持稳定，而单独的DDA脂质体则持续丢失抗原。[2] - 冷冻透射电镜（Cryo-TEM）和透射电镜（TEM）证实，DDA-TDB脂质体（11 mol% TDB）形成单层囊泡，主要粒径小于500 nm，且聚集程度低于单独的DDA脂质体。[2] 体外实验表明，海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯与Mincle结合，激活下游信号通路。在无细胞实验中，TDB 已被证实能在 10 µg/ml 的浓度下与小鼠 Mincle 和人 IgG1 Fc 的融合蛋白结合。在细胞实验中，TDB 可激活巨噬细胞，进而诱导 TNF-α 和 IL-6 等促炎细胞因子的产生。其活性呈浓度依赖性，有效浓度通常在 µg/mL 范围内。由于 TDB 具有激活 Mincle 的能力，因此它是研究先天免疫和开发疫苗佐剂的宝贵工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
将TDB（100 μg溶于200 μL PBS）腹腔注射到野生型小鼠体内，6小时后可诱导大量中性粒细胞（CD11b⁺Ly-6G⁺）募集至腹腔。在Nlrp3⁻/⁻小鼠中，这种募集显著减少。[1]
- 将Ag85B-ESAT-6（2 μg/剂）溶于DDA-TDB脂质体（每剂含11 mol% TDB、250 μg DDA和50 μg TDB）中，每隔2周皮下注射3次，可诱导强烈的Th1型免疫应答：抗原再刺激后血液淋巴细胞产生大量IFN-γ，且IgG2b抗体滴度高（IgG2b/IgG1比值约为0.2）。单独使用DDA可诱导较低的IFN-γ和IgG2b水平。[2] - 通过抗体阻断实验，CD4⁺ T细胞被鉴定为主要的IFN-γ产生亚群。[2] - 与明矾相比，DDA-TDB可显著诱导更高的IFN-γ和IgG2b水平，而明矾则诱导更高的IL-5和IgG1水平，表明存在Th2偏向。[2] 在体内，海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯已被研究作为疫苗佐剂，尤其是在结核病疫苗中。临床前模型显示，TDB与抗原联合使用可增强免疫反应并提供抗感染保护。该化合物的毒性低于其母体化合物TDM，使其成为疫苗开发中更安全的选择。其作为佐剂的有效性支持其进一步开发用于人类疫苗。然而，详细的药代动力学特征和全面的毒理学数据仍然有限。 |
| 酶活实验 |
IL-1β 和 TNF-α 的 ELISA 检测：收集无细胞上清液，并按照制造商的说明使用 ELISA 试剂盒测定细胞因子水平。[1] - caspase-1 p10 的 Western blot 检测：将上清液与甲醇/氯仿混合，离心，干燥蛋白沉淀，重悬于样品缓冲液中，通过 NuPAGE 电泳分离，转移至膜上，并用兔抗鼠 caspase-1 p10 抗体进行检测。[1] - 差示扫描量热法 (DSC)：以 30°C/h 的升温速率扫描含 0–20 mol% TDB 的 DDA 脂质体。计算热力学参数（Tm、ΔHm、ΔT1/2）。 [2]
- 动态光散射 (DLS)：在 25°C 下测量粒径（z 平均直径）和 zeta 电位。[2] - 抗原吸附和保留：将 125I 标记的 Ag85B-ESAT-6 添加到脂质体中，超速离心（100,000 × g，1 小时），并测量沉淀物中的放射性。[2] 海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯 (TDB) 的体外 Mincle 结合试验通常使用 ELISA 或表面等离子共振 (SPR) 来测量 TDB 与 Mincle 之间的相互作用。该试验通过将 Mincle 或 Mincle-Fc 融合蛋白固定在微孔板或传感器芯片上，并添加不同浓度的 TDB（通常为 0.1 至 100 µg/mL）来进行。使用标记抗体或通过测量 SPR 信号的变化来检测结合。在基于细胞的检测中，用TDB处理巨噬细胞，并通过ELISA检测细胞因子（TNF-α、IL-6）的产生。每次检测均包含阳性对照（例如，TDM）和阴性对照（载体）。 |
| 细胞实验 |
BMDC 的生成和刺激：将小鼠骨髓细胞用 GM-CSF (20 ng/mL) 诱导分化 7 天。BMDC 用 LPS (50 ng/mL，2 小时) 预处理，然后用 TDB (5–300 μg/mL)、TDM、明矾 (500 μg/mL)、MSU (50 μg/mL) 或 ATP (5 mM) 刺激。在刺激前 1 小时加入抑制剂。收集上清液用于细胞因子测定。[1] - 淋巴细胞培养：将免疫小鼠的血液或脾细胞与 Ag85B-ESAT-6 (5 μg/mL) 共培养 72 小时。采用 ELISA 法测定 IFN-γ 和 IL-5 的水平。为了阻断亚群，在抗原再次刺激前 30 分钟加入抗 CD4 或抗 CD8 抗体。 [2]
在体外细胞实验中，巨噬细胞或树突状细胞用浓度为 1 至 100 µg/mL 的海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯处理 1 至 24 小时。细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）的产生通过 ELISA 或多重细胞因子检测法进行测定。Mincle 激活通过 Western 印迹法检测下游信号通路（例如 Syk 磷酸化）进行评估。细胞活力使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测法进行评估。所有实验均包含适当的对照（载体、已知的 Mincle 激动剂），并重复三次。 |
| 动物实验 |
体内腹膜炎模型：将野生型和 Nlrp3⁻/⁻ 小鼠腹腔注射 TDB（100 μg 溶于 200 μL PBS）或仅注射 PBS。6 小时后，冲洗腹腔，并通过流式细胞术定量中性粒细胞（CD11b⁺Ly-6G⁺）。[1]
- 免疫方案：将 8-12 周龄的雌性 C57BL/6 小鼠尾根部皮下注射 0.2 mL 疫苗，疫苗中含有 Ag85B-ESAT-6（2 μg/剂），疫苗包被于 DDA-TDB 脂质体（DDA 250 μg，TDB 25-100 μg/剂）或明矾（500 μg）。免疫接种共进行三次，每次间隔两周。最后一次免疫接种后7天采集血液样本。[2] 在体内佐剂研究中，动物模型在有或无海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯存在的情况下接受抗原免疫。该化合物通常通过皮下或肌肉注射给药，剂量范围为每只动物10至100 µg。通过测量抗原特异性抗体滴度（ELISA）和T细胞反应（ELISpot、细胞内细胞因子染色）来评估免疫反应。通过用病原体（例如结核分枝杆菌）攻击免疫动物并测量细菌载量和存活率来评估保护效力。所有动物实验均按照机构指南进行。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯的药代动力学性质已得到部分表征。作为一种糖脂，它具有高度亲脂性，预计水溶性较差。注射后，它很可能被给药部位的抗原呈递细胞摄取，并转运至引流淋巴结。该化合物的分布和消除受其亲脂性和细胞膜整合的影响。需要进一步的药代动力学研究以进行全面表征。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
TDB 被描述为一种毒性较低的海藻糖-6,6'-二霉菌酸酯 (TDM) 合成类似物，其脂肪酸链较短（22 个碳原子，山嵛酸），毒性也较低。[2]
- 用 DDA-TDB 脂质体免疫的小鼠未报告体重减轻或明显的毒性。[2] 海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯的临床前毒理学研究表明，其毒性低于其母体化合物 TDM。在急性毒性研究中，该化合物在用作佐剂的剂量下耐受性良好，未见明显不良反应。在重复给药研究中，在药理剂量下未报告明显的器官毒性或血液学异常。该化合物在标准体外试验中未显示遗传毒性。安全性良好，支持进一步开发其作为疫苗佐剂，但临床应用仍需进行全面的毒理学研究。 |
| 参考文献 |
[1]. The mycobacterial cord factor adjuvant analogue trehalose-6,6'-dibehenate (TDB) activates the Nlrp3 inflammasome. Immunobiology. 2013 Apr;218(4):664-73.
[2]. Characterization of cationic liposomes based on dimethyldioctadecylammonium and synthetic cord factor from M. tuberculosis (trehalose 6,6'-dibehenate)-a novel adjuvant inducing both strong CMI and antibody responses. Biochim Biophys Acta. 2005 Dec 10;1718(1-2):22-31. |
| 其他信息 |
海藻糖-6,6'-二苯是一种脂肪酸衍生物，也是一种O-酰基碳水化合物。
- TDB是结核分枝杆菌索状因子海藻糖-6,6'-二霉菌酸酯 (TDM) 的合成类似物，TDM是一种强效的促炎性病原相关分子模式(PAMP)。它不溶于水，在细胞培养中呈颗粒状。[1] - TDB与阳离子表面活性剂DDA（二甲基二十八烷基铵）联合用作结核病亚单位疫苗的佐剂。DDA-TDB佐剂系统可诱导强烈的细胞介导免疫（Th1型）和抗体反应。 [2] - DDA-TDB脂质体（11 mol% TDB）具有良好的物理稳定性，可通过静电相互作用有效吸附带负电荷的抗原Ag85B-ESAT-6（pI 4.8）。[2] - TDB的作用机制涉及两条平行通路：(1) Mincle-FcRγ-Syk-Card9信号通路激活NF-κB并促进pro-IL-1β的产生；(2) Nlrp3炎症小体激活导致caspase-1依赖的IL-1β成熟和分泌。[1] 海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯 (TDB) 是一种合成糖脂，是分枝杆菌索状因子的衍生物。其分子式为C56H106O13，分子量为987.43。 TDB是一种具有生物活性的糖脂，可用于制备疫苗佐剂，毒性较低，是一种高效的结核病疫苗佐剂。该化合物尚未获准用于人体，仅供研究用途。它以高纯度（≥95%）的研究试剂形式提供，供实验室使用。其Mincle激动剂活性使其成为研究先天免疫和开发疫苗佐剂的宝贵工具。 |
| 分子式 |
C56H106O13
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|---|---|
| 分子量 |
987.433040000001
|
| 精确质量 |
986.763
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| 元素分析 |
C, 68.12; H, 10.82; O, 21.06
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| CAS号 |
66758-35-8
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| PubChem CID |
11170611
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
11.348
|
| tPSA |
201.67
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
13
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| 可旋转键数目(RBC) |
48
|
| 重原子数目 |
69
|
| 分子复杂度/Complexity |
1100
|
| 定义原子立体中心数目 |
10
|
| SMILES |
CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@H]([C@H](O1)O[C@@H]2[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O)O)O)O)O
|
| InChi Key |
ZLJJDBSDZSZVTF-LXOQPCSCSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C56H106O13/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-33-35-37-39-41-47(57)65-43-45-49(59)51(61)53(63)55(67-45)69-56-54(64)52(62)50(60)46(68-56)44-66-48(58)42-40-38-36-34-32-30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-8-6-4-2/h45-46,49-56,59-64H,3-44H2,1-2H3/t45-,46-,49-,50-,51+,52+,53-,54-,55-,56-/m1/s1
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| 化学名 |
[(2R,3S,4S,5R,6R)-6-[(2R,3R,4S,5S,6R)-6-(docosanoyloxymethyl)-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]methyl docosanoate
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| 别名 |
Trehalose-6,6'-dibehenate; 22:0 Trehalose; D-(+)-trehalose 6,6'-dibehenate; Trehalose 6,6'-dibehenate; 672NB7JH7R; DTXSID30457482;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.0127 mL | 5.0637 mL | 10.1273 mL | |
| 5 mM | 0.2025 mL | 1.0127 mL | 2.0255 mL | |
| 10 mM | 0.1013 mL | 0.5064 mL | 1.0127 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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