| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
True Blue targets neurons for retrograde tracing, specifically labeling the nucleus, nucleolus, cell body, proximal dendrites, and axons. The dye is taken up by axon terminals and transported retrogradely to the cell body and dendrites, providing detailed visualization of the entire neuronal morphology. It is a UV light-excitable, divalent cationic dye that stains the cytoplasm with blue fluorescence. Unlike some other retrograde tracers, True Blue has no effects on neuronal survival, whether studied 4 days or 20 weeks after application. This property makes it safe for long-term tracing studies. True Blue can label dorsal root ganglion neurons (DRGNs) and motoneurons (MNs).
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在体外，True Blue 用于基于荧光的神经元示踪应用。该染料可应用于神经元细胞培养物或外植体培养物中神经的切断端，并被轴突末梢吸收，逆行运输至细胞体。其激发/发射波长最大值分别为 373/404 nm（或使用 450 nm 阻挡滤光片时，激发波长为 395-425 nm），蓝色荧光可清晰显示神经元形态。染色模式清晰，除细胞质、轴突和树突外，细胞核和核仁也明显被标记。该染料在免疫组织化学处理中表现出稳定性，可与其他荧光标记物联合使用。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
成年雌性大鼠切断坐骨神经后，可将其浸入 True Blue 中，标记背根神经节神经元 (DRGN) 和运动神经元 (MN)，而不会影响四天或二十周后的神经元存活 [2]。
在体内，True Blue 被用作动物模型（主要是大鼠和小鼠）中的逆行示踪剂，用于绘制神经元连接和通路。该染料被涂抹在神经的切断端（例如坐骨神经），或注射到特定的脑区。染料被轴突末梢吸收，并逆行运输至投射到该区域的神经元的胞体和树突。在 3-14 天的存活期（以获得最佳运输效果）后，对动物实施安乐死，并对脑或脊髓进行切片，然后在荧光显微镜（紫外激发）下进行观察。True Blue 对神经元存活没有影响，因此可以进行长达数周至数月的长期示踪研究。它可以标记背根神经节神经元和运动神经元。 |
| 酶活实验 |
对于非细胞检测，True Blue 的特性通过紫外-可见吸收光谱和荧光光谱进行表征。True Blue 的储备液（1-5 mg/mL）可溶于蒸馏水、PBS 或 10% DMSO 中。进行吸收光谱测量时，将溶液稀释至 10-50 ug/mL（溶于 pH 7.4 的 PBS 缓冲液中），并记录 250-500 nm 范围内的吸收光谱。True Blue 的最大吸收波长约为 373 nm，在 395-425 nm 处有一个肩峰。进行荧光光谱测量时，使用 373 nm 的光激发溶液，并记录 380-600 nm 范围内的发射光谱，最大发射波长接近 404 nm。对于神经元标记实验，可将染料涂抹于神经切断端或注射到脑区，具体方法如前所述。
|
| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，首先从胚胎或出生后的啮齿动物脑组织中制备原代神经元培养物。将神经元接种于盖玻片上，培养7-14天。向培养基中加入True Blue（10-100 ug/mL），孵育2-24小时；或者使用分隔培养系统将True Blue应用于轴突。之后，洗涤细胞，用4%多聚甲醛固定，并封片。使用紫外激发荧光显微镜（滤光片组：激发波长365-400 nm，发射波长420-450 nm）观察神经元胞体、树突和轴突中的蓝色荧光。该染料与神经元标记物（例如NeuN、MAP2、神经丝蛋白）的免疫染色兼容，且其蓝色发射与绿色或红色荧光染料的重叠不明显，因此可以进行多色标记。
|
| 动物实验 |
对于体内动物研究，采用大鼠坐骨神经逆行追踪的标准方案。成年雌性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）用异氟烷麻醉。暴露坐骨神经，并在大腿中部切开。将近端切口浸泡在True Blue溶液（2-10% w/v，溶于蒸馏水或PBS）中10-30分钟。对于脑区（例如纹状体、皮层、海马）的注射，将0.5-2 μL 2-5%的True Blue溶液立体定位注射到目标区域的特定坐标。注射后，缝合切口，让动物恢复。存活3-14天（以保证逆行追踪）后，处死动物，并取出脑或脊髓。组织用4%多聚甲醛固定，用30%蔗糖进行低温保护，在低温恒温切片机上切片（厚度20-40微米），然后贴于载玻片上。切片在紫外激发荧光显微镜下观察。True Blue染料可标记投射至注射部位的神经元的细胞核、核仁、胞体、近端树突和轴突。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
True Blue 的分子量为 417.3 g/mol，分子式为 C20H18Cl2N4O2。该化合物为浅黄色至黄色固体粉末，纯度≥90%（通常≥96.8%）。它可溶于水、PBS 和 DMSO。储备液（1-5 mg/mL）用蒸馏水或 PBS（pH 7.4）配制。True Blue 是一种二价阳离子染料，可通过内吞作用被轴突末梢摄取，并通过动力蛋白马达系统进行逆行运输。该化合物在免疫组织化学处理过程中稳定，包括固定、透化和抗体染色。储存条件：4℃ 或 -20℃，避光保存。长期保存时，请将粉末保存于 -20℃。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
True Blue 是一种荧光示踪剂，不适用于人体。在用于神经元示踪的浓度（0.5-10% 溶液）下，尚未报告有明显的毒性。动物研究表明，即使经过 20 周，该染料对神经元存活率也没有影响。处理粉末时应遵循标准的化学品安全防护措施（戴手套、穿实验服、戴护目镜）。避免吸入粉尘。该染料不被认为是致癌物或生殖危害物。急性毒性：LD50 尚未确定，但由于用于神经元示踪的通常用量很小（0.5-10% 溶液，颅内注射 0.5-2 μL），预计该化合物的全身毒性较低。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
True Blue 是一种研究用化合物，尚未获准用于临床。它是神经科学研究中常用的几种荧光逆行示踪剂之一，其他常用示踪剂包括 Fluorogold、DiI 和 Fast Blue。True Blue 的优势在于，除了标记细胞质外，还能显著标记细胞核和核仁，从而更好地观察神经元胞体。该染料可被紫外光激发，发出蓝色荧光，因此可以与其他荧光染料结合，用于双重或三重标记研究。研究表明，True Blue 对神经元无细胞毒性作用，应用后 4 天或 20 周，神经元存活率均未降低。True Blue 可通过浸泡切断的坐骨神经来标记背根神经节神经元和运动神经元。本产品仅供研究使用，不得用于人体治疗或诊断。
|
| 分子式 |
C20H16N4O2.2[HCL]
|
|---|---|
| 分子量 |
417.28852
|
| 精确质量 |
416.081
|
| CAS号 |
71431-30-6
|
| 相关CAS号 |
71431-30-6 (HCl);50638-24-9;
|
| PubChem CID |
5706759
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 沸点 |
600.6ºC at 760 mmHg
|
| 闪点 |
317.1ºC
|
| LogP |
7.121
|
| tPSA |
126.02
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
28
|
| 分子复杂度/Complexity |
542
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1=CC2=C(C=C1C(=N)N)C=C(O2)/C=C/C3=CC4=C(O3)C=CC(=C4)C(=N)N.Cl.Cl
|
| InChi Key |
WFZFMHDDZRBTFH-CZEFNJPISA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H16N4O2.2ClH/c21-19(22)11-1-5-17-13(7-11)9-15(25-17)3-4-16-10-14-8-12(20(23)24)2-6-18(14)26-16;;/h1-10H,(H3,21,22)(H3,23,24);2*1H/b4-3+;;
|
| 化学名 |
2-[(E)-2-(5-carbamimidoyl-1-benzofuran-2-yl)ethenyl]-1-benzofuran-5-carboximidamide;dihydrochloride
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3964 mL | 11.9821 mL | 23.9641 mL | |
| 5 mM | 0.4793 mL | 2.3964 mL | 4.7928 mL | |
| 10 mM | 0.2396 mL | 1.1982 mL | 2.3964 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
