| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Auristatin
CD30 (highly expressed on Hodgkin lymphoma and anaplastic large cell lymphoma cells)[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
由于其膜渗透性,单甲基阿里他汀 E (MMAE) 可以在 CD30+ 癌细胞内有效地从 SGN-35 中释放,并在旁观者细胞中引起细胞毒性 [1]。 MMAE 以与有丝分裂停滞相关的时间和剂量依赖性方式对结直肠癌细胞和胰腺癌细胞敏感。暴露细胞中克隆形成存活率降低和 DNA 双链断裂增多是放射增敏的迹象[2]。
VcMMAE(SGN-35)在低皮摩尔浓度下即可杀死CD30阳性细胞,其所需浓度比抗原饱和所需浓度低几个数量级。 该ADC对CD30阳性细胞系具有强效细胞毒性:Karpas299细胞的IC₅₀为1.3 ng/mL(每抗体连接8个药物),L540cy细胞为9.9 ng/mL,CD30阴性Ramos细胞为3300 ng/mL。 在CD30阳性细胞中,VcMMAE释放的MMAE在24小时内细胞内浓度可达 >400 nmol/L,细胞内MMAE的半衰期为15–20小时。 从CD30阳性细胞释放的MMAE能够杀死共培养的CD30阴性细胞(旁观者效应)。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
肿瘤靶向 ACPP-cRGD-MMAE 与 IR 相结合,可在异种移植模型中实现更稳健且显着延长的肿瘤消退。相比之下,单甲基阿里他汀 E (MMAE) 联合 IR 会延迟肿瘤生长[2]。
VcMMAE治疗可使已建立的霍奇金淋巴瘤异种移植瘤在小鼠体内消退并治愈,剂量为1 mg/kg,远低于最大耐受剂量120 mg/kg。[1] |
| 酶活实验 |
MMAE在CD30(+)癌症细胞内从SGN-35有效释放,并且由于其膜渗透性,能够对旁观者细胞施加细胞毒性活性。这为SGN-35观察到的显著临床前和临床抗肿瘤活性提供了机制见解[1]。
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| 细胞实验 |
收集用电离辐射 (IR) 和单甲基 auristatin E (MMAE, 5 nM) 处理的细胞,并在含有磷酸酶和蛋白酶抑制剂的 RIPA 缓冲液中裂解。 30μg 裂解液在 4-12% Bis-Tris 凝胶上进行电泳,然后将其转移至 PVDF 膜上并添加相关一抗。 ECL 用于显影印迹。
细胞在持续暴露条件下用约200 ng/mL(6 nmol/L药物当量)的VcMMAE处理长达72小时。 使用放射性测量和LC/MS方法测定细胞内和细胞外药物浓度。 在旁观者活性实验中,将CD30阳性(Karpas299或L540cy)和CD30阴性(Ramos)细胞共培养,用1 µg/mL VcMMAE或对照ADC处理120小时,随后使用抗CD30和抗CD19抗体进行流式细胞术分析。[1] |
| 动物实验 |
将6-8周龄的雌性无胸腺裸鼠(nu/nu)大腿皮下注射1:1的Matrigel和PBS混合溶液,其中含有5×10⁶个HCT-116或PANC-1细胞。随后,分别静脉注射(IV)或口服(IR)ACPP-cRGD-MMAE(6 nmol/天,共18 nmol),对小鼠进行治疗。之后取出肿瘤组织,进行石蜡包埋、福尔马林固定,并用相应的抗体进行染色。使用 UltraMap 系统,DAB 用作显色剂,一抗稀释度为 1:250 用于可视化。
肿瘤异种移植模型建立:将 5×10^6 个 HCT-116 或 PANC-1 细胞悬浮于 Matrigel 和 PBS 的 1:1 混合物中,皮下注射到 6-8 周龄雌性无胸腺裸鼠(nu/nu)的大腿区域。待肿瘤平均体积超过 200 mm³ 后,将小鼠随机分组。肿瘤体积的计算公式为:体积 = 1/2 × 长度 × 宽度²。[2] 局部肿瘤照射:当肿瘤达到合适大小时,将小鼠摆放成能够对右后肢肿瘤进行局部照射的姿势。小鼠的其余部分,包括对侧(左侧)肿瘤,均用定制的铅块屏蔽,经剂量计验证,铅块可阻挡 95% 以上的辐射剂量。辐射剂量因实验而异(例如,每日 3 Gy,单次 6 Gy)。[2] 药物给药(游离 MMAE):游离 MMAE 溶解于 DMSO 中,并进一步稀释后注射。在指定日期通过静脉注射给药。剂量与靶向偶联物递送的 MMAE 有效载荷等摩尔(例如,每次注射 6 nmol MMAE)。[2] 药物给药(靶向偶联物):ACPP-cRGD-MMAE 通过静脉注射给药。在疗效研究中,通常每次注射 6 或 7.5 nmol MMAE。给药时间与照射时间的关系有所不同:在一些研究中,首次给药在首次照射前一天进行;在另一些研究中,则在同一天照射后 6 小时进行。 [2] 组织分析(酶谱分析):切除肿瘤异种移植组织,在Tris-SDS缓冲液中匀浆(每毫克组织9 µL),然后离心。将上清液用PBS稀释,与样品缓冲液混合,并在明胶酶谱凝胶上进行电泳。凝胶复性后,在显色缓冲液中孵育,以检测MMP(明胶酶)活性,表现为蓝色背景上的清晰条带。[2] 体内光学成像:将荷瘤小鼠麻醉,并静脉注射荧光标记探针(例如,比率型ACPP或Cy5标记的ACPP-cRGD-MMAE)。2-6小时后,使用配备适当激发和发射滤光片的小动物成像仪对动物进行成像。成像分别在保留皮肤和去除皮肤后进行,以减少自发荧光。 [2] 免疫组织化学:采集肿瘤组织,用福尔马林固定,石蜡包埋。使用自动化染色系统,用特异性一抗(例如,针对β3整合素、磷酸化S10组蛋白H3的抗体)对切片进行染色。使用DAB显色剂对一抗进行显色。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
VcMMAE释放的细胞内MMAE在CD30阳性细胞中的滞留半衰期为15-20小时。
释放的MMAE可以扩散出细胞并在培养基中积累,但浓度远低于细胞内水平。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠对VcMMAE的最大耐受剂量为120 mg/kg。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
VcMMAE是一种抗体药物偶联物,由抗CD30单克隆抗体cAC10通过蛋白酶可切割的二肽连接子(mc-缬氨酸-瓜氨酸-PABC)与单甲基澳瑞他汀E (MMAE) 连接而成。
该抗体药物偶联物通过CD30介导的内吞作用进入细胞,随后经溶酶体蛋白水解切割释放游离的MMAE。 释放的MMAE可透过细胞膜,并对邻近的抗原阴性细胞产生细胞毒性作用(旁观者效应),这对于治疗异质性肿瘤具有重要意义。[1] |
| 分子式 |
C68H105N11O15
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|---|---|
| 分子量 |
1316.6260
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| 精确质量 |
1315.779
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| 元素分析 |
C, 62.03; H, 8.04; N, 11.70; O, 18.23
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| CAS号 |
646502-53-6
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| 相关CAS号 |
VcMMAE;646502-53-6
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| PubChem CID |
46944733
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
1347.6±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
768.8±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.556
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| LogP |
6.04
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| tPSA |
347Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
8
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| 氢键受体(HBA)数目 |
15
|
| 可旋转键数目(RBC) |
39
|
| 重原子数目 |
94
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| 分子复杂度/Complexity |
2520
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| 定义原子立体中心数目 |
12
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| SMILES |
O(C([H])([H])[H])[C@]([H])([C@]([H])(C(N([H])[C@]([H])(C([H])([H])[H])[C@]([H])(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])O[H])=O)C([H])([H])[H])[C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N1C(C([H])([H])[C@]([H])([C@]([H])([C@@]([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])N(C([H])([H])[H])C([C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N(C(=O)OC([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])N([H])C([C@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(N([H])[H])=O)N([H])C([C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N([H])C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N1C(C([H])=C([H])C1=O)=O)=O)=O)=O)C([H])([H])[H])=O)=O)OC([H])([H])[H])=O
|
| InChi Key |
NLMBVBUNULOTNS-HOKPPMCLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C68H105N11O15/c1-15-43(8)59(51(92-13)38-55(83)78-37-23-27-50(78)61(93-14)44(9)62(85)71-45(10)60(84)47-24-18-16-19-25-47)76(11)66(89)57(41(4)5)75-65(88)58(42(6)7)77(12)68(91)94-39-46-29-31-48(32-30-46)72-63(86)49(26-22-35-70-67(69)90)73-64(87)56(40(2)3)74-52(80)28-20-17-21-36-79-53(81)33-34-54(79)82/h16,18-19,24-25,29-34,40-45,49-51,56-61,84H,15,17,20-23,26-28,35-39H2,1-14H3,(H,71,85)(H,72,86)(H,73,87)(H,74,80)(H,75,88)(H3,69,70,90)/t43-,44+,45+,49-,50-,51+,56-,57-,58-,59-,60+,61+/m0/s1
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| 化学名 |
4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl)hexanamido)-3-methylbutanamido)-5-ureidopentanamido)benzyl ((S)-1-(((S)-1-(((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl)amino)-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl)pyrrolidin-1-yl)-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl)(methyl)amino)-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)amino)-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)(methyl)carbamate
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| 别名 |
mc-vc-PAB-MMAE; VcMMAE; Vc-MMAE; MC-VC-PAB-MMAE; MMAE Vc linker, MMAE antibody conjugate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 1) 本产品溶液不稳定,请使用新鲜配制的工作溶液以获得最佳效果; 2) 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 54 mg/mL (~41.0 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL Ethanol: ~50 mg/mL (38 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7595 mL | 3.7976 mL | 7.5951 mL | |
| 5 mM | 0.1519 mL | 0.7595 mL | 1.5190 mL | |
| 10 mM | 0.0760 mL | 0.3798 mL | 0.7595 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
![]() MMAE has increased potency compared to paclitaxel in tumor cells.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. th> |
|---|
![]() MMAE increases IR induced DNA double strand breaks in a schedule and dose dependent manner.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. td> |
![]() MMAE decreases clonogenic survival of irradiated tumor cells.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. td> |
![]() MMAE increases DNA damage response in irradiated tumor cells.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. th> |
|---|
![]() ACPP-cRGD-MMAE in combination with IR significantly reduces tumor growth.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. td> |
![]() Activatable cell penetrating peptides are cleaved in irradiated tumor microenvironments.Cancer Res.2015 Apr 1;75(7):1376-1387. td> |