Verrucarin J

目录号: V16353 纯度: ≥98%
Verrucarin J (Muconomycin B) 是 Myrothecium 真菌家族的代谢产物。
Verrucarin J CAS号: 4643-58-7
产品类别: New1
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产品描述
Verrucarin J (Muconomycin B) 是 Myrothecium 真菌家族的代谢产物。 Verrucarin J 诱导癌症/肿瘤细胞系(如 A549、HCT 116 和 SW-620 细胞)中活性氧 (ROS) 的产生和凋亡。 Verrucarin J 具有对抗白色念珠菌和米黑毛霉的活性。 Verrucarin J 抑制沙粒病毒 Junin (JUNV) 的产生,IC50 为 1.2 ng/mL。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
在 A549 细胞中,verrucarin J(0、5、10、20、50 nM;24 小时)会导致细胞凋亡 [1]。 Verrucarin J(0、1、2、5、10、20、50 nM;24、48、72 小时)显着降低 A549 和 H1793 细胞的细胞生长,48 小时后 IC50 值约为 10 nM 和 20 nM分别治疗小时数[1]。对于 HCT 116 和 SW-620 细胞生长,verrucarin J(0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 μM;24 小时)的 IC50 为 300 nM [2]。 Verrucarin J(0、10、20 nM,48 小时)抑制 A549 细胞中重要的 CSC 特异性基因(ALDH1、LGR5、OCT4 和 CD133)的表达,并抑制 Wnt1/β-catenin 和 Notch1 癌症干细胞 (CSC) )自我更新途径[1]。化合物 2 Verrucarin J 在 50 μg/盘时对白色念珠菌和含笑毛霉表现出显着的功效 [3]。 Verrucarin J 对沙粒病毒 Tacaribe 具有类似的影响,并将 JUNV 产量减少超过 2 个对数单位 [4]。 Verrucarin J 的细胞毒性浓度 50% (CC50) 为 8.2 ng/mL,有可能降低 Vero 细胞活力 [4]。
体内研究 (In Vivo)
在异种移植动物中,腹腔注射 Verrucarin J (0.5 mg/kg) 4 周可抑制 AKT 产生的肿瘤生长 [2]。 Verrucarin J 是一种极其有效的抗癌药物,可以阻止肿瘤的发展和转移(0.1、0.5、2.0 mg/kg;腹腔内给药三周)[5]。
动物实验
动物/疾病模型: 6-8 周龄 BALB/c 无胸腺裸鼠 (nu/nu)[2],携带 pCMV/HCT 116 和 AKT/HCT 116 异种移植瘤 [2]
剂量: 0.5 mg/kg 体重
给药途径: 腹腔注射 注射后 4 周的结果:所有肿瘤中促生存标志物 pAKT、Notch1、p65 和 Ki67 的表达均降低。

动物/疾病模型: 5至6周龄雌性裸鼠(nu/nu),移植A2780异种肿瘤[5]。剂量:0.1、0.5、2.0 mg/kg(溶剂:10% DMSO,90% 三辛酸甘油酯)。
给药途径: 腹腔注射(ip),持续三周。注射A2780细胞10天后结果:0.1 mg/kg剂量组肿瘤重量减轻(较对照组减少32%),可见转移灶减少。0.5 mg/kg剂量组腹膜肿瘤显著减少(较对照组减少61%),转移灶也显著减少。0.5 mg/kg剂量组卵巢肿瘤重量较溶剂组减少71%。小鼠服用致死剂量 2 mg/kg 后,出现腹部肿胀、体液潴留,随后发生
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢产物
单端孢霉烯族毒素具有亲脂性,因此易于通过皮肤、肠道和肺黏膜吸收。它们主要在肝脏中通过细胞色素P-450和单端孢霉烯族毒素特异性羧酸酯酶进行代谢,尽管肾脏、脾脏和肠道等其他组织也表现出一定的代谢活性。单端孢霉烯族毒素通过水解、羟基化、脱环氧化和葡萄糖醛酸化等反应代谢转化为毒性较低的代谢产物。代谢产物经尿液和粪便排出体外。(L1910, L1949)
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
毒性概述
与其他许多真菌毒素不同,单端孢霉烯族毒素无需代谢活化即可发挥其生物活性,而是直接与细胞成分反应。单端孢霉烯族毒素对大多数真核细胞具有细胞毒性,因为它们能够强效抑制蛋白质合成。它们通过自由穿过质膜并与核糖体高亲和力结合来实现这一作用。具体而言,它们会干扰位于28S核糖体RNA 3'端的肽基转移酶活性位点,抑制蛋白质合成的起始、延伸或终止步骤,并导致多核糖体解聚。蛋白质合成是所有组织的基本功能,但细胞活跃且快速生长和分裂的组织对这类毒素非常敏感。此外,与核糖体的结合被认为可以激活与免疫反应和细胞凋亡相关的下游信号通路中的蛋白质,例如丝裂原活化蛋白激酶。这被称为核糖体毒性应激反应。单端孢霉烯族毒素还可能诱导膜结构发生一些改变,导致脂质过氧化增加和线粒体电子传递活性抑制。它们还可以通过产生活性氧进一步诱导细胞凋亡。单端孢霉烯族毒素的其他次级效应包括抑制RNA和DNA合成以及抑制有丝分裂。(L1948, L1949, A2962, A2963, A2964, A2980)
参考文献

[1]. Targeting of Lung Cancer Stem Cell Self-Renewal Pathway by a Small Molecule Verrucarin J. Stem Cell Rev Rep. 2019 Aug;15(4):601-611.

[2]. Suppression of Notch1 and AKT mediated epithelial to mesenchymal transition by Verrucarin J in metastatic colon cancer. Cell Death Dis. 2018 Jul 23;9(8):798.

[3]. Macrocyclic Trichothecenes from Myrothecium roridum Strain M10 with Motility Inhibitory and Zoosporicidal Activities against Phytophthora nicotianae. J Agric Food Chem. 2015 Oct 14;63(40):8777-86.

[4]. García CC, et al, Damonte EB. Evaluation of the antiviral activity against Junin virus of macrocyclic trichothecenes produced by the hypocrealean epibiont of Baccharis coridifolia. Planta Med. 2002 Mar;68(3):209-12.

[5]. Verrucarin J inhibits ovarian cancer and targets cancer stem cells. Oncotarget. 2017 Oct 6;8(54):92743-92756.

其他信息
疣孢菌素J是一种单端孢霉烯族毒素。单端孢霉烯族毒素是一类化学结构相关的真菌毒素,由多种镰刀菌属(Fusarium)、霉菌属(Myrothecium)、木霉属(Trichoderma)、头孢霉属(Cephalosporium)、轮枝单孢霉属(Verticimonosporium)和葡萄穗霉属(Stachybotrys)真菌产生。单端孢霉烯族毒素生物活性的最重要结构特征包括:12,13-环氧环、单端孢霉烯族毒素核心上适当位置的羟基或乙酰基以及侧链的结构和位置。它们由多种镰刀菌属真菌产生,例如禾谷镰刀菌(F. graminearum)、孢子丝镰刀菌(F. sporotrichioides)、草生镰刀菌(F. poae)和马尾镰刀菌(F. equiseti),这些真菌存在于小麦、燕麦或玉米等多种谷物上。一些产生单端孢霉烯族毒素的霉菌,例如黑曲霉(Stachybotrys chartarum),可以在潮湿的室内环境中生长,并可能导致建筑物居住者的健康问题。 (L1948)
另见:Verrucarin J(注释已移至)。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C27H32O8
分子量
484.53818
精确质量
484.21
CAS号
4643-58-7
PubChem CID
6437363
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.297g/cm3
沸点
735.353°C at 760 mmHg
闪点
312.2°C
LogP
3.119
tPSA
100.66
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
35
分子复杂度/Complexity
1050
定义原子立体中心数目
6
SMILES
CC1=C[C@@H]2[C@@]3(CC1)COC(=O)/C=C(/CCOC(=O)/C=C/C=C/C(=O)O[C@H]4[C@]3([C@]5(CO5)[C@@H](C4)O2)C)\C
InChi Key
GXCGYHWSYNQVHU-UGAPSZEOSA-N
InChi Code
InChI=1S/C27H32O8/c1-17-8-10-26-15-32-24(30)13-18(2)9-11-31-22(28)6-4-5-7-23(29)35-19-14-21(34-20(26)12-17)27(16-33-27)25(19,26)3/h4-7,12-13,19-21H,8-11,14-16H2,1-3H3/b6-4+,7-5+,18-13+/t19-,20-,21-,25-,26-,27+/m1/s1
化学名
(1R,3R,8R,12E,18E,20E,24R,25S,26S)-5,13,25-trimethylspiro[2,10,16,23-tetraoxatetracyclo[22.2.1.03,8.08,25]heptacosa-4,12,18,20-tetraene-26,2'-oxirane]-11,17,22-trione
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0638 mL 10.3191 mL 20.6381 mL
5 mM 0.4128 mL 2.0638 mL 4.1276 mL
10 mM 0.2064 mL 1.0319 mL 2.0638 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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