Squalene Synthase: YM-53601 is an inhibitor of squalene synthase (farnesyl-diphosphate: farnesyl-diphosphate farnesyl-transferase, EC 2.5.1.21). (IC50 values: rat liver microsomes: 90 nM; hamster liver microsomes: 170 nM; guinea-pig liver microsomes: 46 nM; rhesus monkey liver microsomes: 45 nM; human HepG2 cell microsomes: 79 nM) [1]

在仓鼠、豚鼠、恒河猴和人HepG2细胞的肝微粒体中，YM-53601对角鲨烯合酶活性的IC50值分别为90、170、46、45和79 nM[1]。YM-53601还能抑制仓鼠δ-角鲨烯合酶，该酶可将[3H]法尼基二磷酸转化为[3H]角鲨烯，其IC50值为170 nM[2]。在H35细胞中，YM-53601（1 μM）可增加毒胡萝卜素的烹饪水平，而在HepG2和H35细胞中，它则会降低烹饪水平[4]。细胞活力检测[4]

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角鲨烯合酶抑制：YM-53601 以剂量依赖的方式抑制不同物种微粒体中的角鲨烯合酶活性。在大鼠肝微粒体中 IC50 值为 90 nM，在仓鼠肝微粒体中为 170 nM，在豚鼠肝微粒体中为 46 nM，在恒河猴肝微粒体中为 45 nM，在人 HepG2 细胞微粒体中为 79 nM。其抑制活性与参考角鲨烯合酶抑制剂 FBQ 相当或更强。[1]

使用 YM-53601 悬浮液（ED50 为 32 mg/kg）抑制胆固醇生物合成[1]。此外，在 50 mg/kg/天的剂量下，YM-53601 可在 5 天内使仓鼠的非高密度脂蛋白胆固醇水平降低近 70%[2]。YM-53601 可增强体内阿霉素诱导的肝细胞癌 (HCC) 的发展和细胞死亡[4]。

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抑制大鼠胆固醇生物合成：在大鼠中，单次口服 YM-53601（6.25、12.5、25 或 50 mg/kg）可剂量依赖性地抑制由 [14C]-乙酸酯从头合成胆固醇。该抑制作用的 ED50 为 32 mg/kg。 [1]
- 高脂饮食喂养大鼠的血浆脂质降低：在高脂饮食喂养的大鼠中，YM-53601（50 mg/kg/天，连续7天）与对照组相比，血浆非高密度脂蛋白胆固醇降低了44%，甘油三酯降低了33%。相比之下，普伐他汀（50 mg/kg/天）对该模型中的血浆脂质水平几乎没有影响。[1]
- 豚鼠的血浆脂质降低：在正常饮食喂养的豚鼠中，YM-53601（10、30或100 mg/kg/天，连续14天）可剂量依赖性地降低总胆固醇（100 mg/kg时最高降低44%）和非高密度脂蛋白胆固醇（100 mg/kg时最高降低47%）。普伐他汀（100 mg/kg/天）分别使总胆固醇和非高密度脂蛋白胆固醇降低了32%和33%。YM-53601对血浆高密度脂蛋白胆固醇无影响，而普伐他汀则显著降低了高密度脂蛋白胆固醇。YM-53601在最高剂量下也使血浆甘油三酯降低了30%，而普伐他汀则使甘油三酯升高了17%。[1]
- 正常饮食仓鼠的血浆脂质降低：在喂食正常饮食的仓鼠中，YM-53601（12.5、25或50 mg/kg/天，连续5天）呈剂量依赖性地降低了血浆总胆固醇（39-57%）、非高密度脂蛋白胆固醇（57-74%）和甘油三酯（75-81%）。在50 mg/kg剂量下，这些降低幅度显著大于参考角鲨烯合酶抑制剂FBQ所达到的效果。 [1]
- 高脂饮食喂养仓鼠的血浆脂质降低：在喂食高脂饮食的仓鼠中，YM-53601（10、30 或 100 mg/kg/天，连续 7 天）呈剂量依赖性地降低了血浆总胆固醇（24-59%）、非高密度脂蛋白胆固醇（31-76%）和甘油三酯（35-73%）水平。YM-53601 的降甘油三酯作用（100 mg/kg 时降低 73%）显著优于非诺贝特（100 mg/kg 时降低 53%）。YM-53601 的 ED50 值分别为：总胆固醇 49 mg/kg，非高密度脂蛋白胆固醇 22 mg/kg，甘油三酯 23 mg/kg。非诺贝特的ED50值分别为2221 mg/kg、297 mg/kg和84 mg/kg。[1]
- 恒河猴血浆脂质降低：在喂食正常饮食的恒河猴中，YM-53601（12.5、25或50 mg/kg，每日两次，持续3周）以剂量依赖的方式降低血浆非高密度脂蛋白胆固醇（non-HDL-C）（50 mg/kg剂量下降低高达37%）。在另一项为期4周的研究中，YM-53601（50 mg/kg，每日两次）使non-HDL-C降低了21%，显著高于普伐他汀（25 mg/kg，每日两次）所达到的13%的降低幅度。在这些研究中，YM-53601对血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平没有影响。在所测试的剂量下，未观察到YM-53601引起肝损伤的迹象。 [1]

角鲨烯合酶活性测定：从不同物种（大鼠、仓鼠、豚鼠、犬、恒河猴）的肝组织和人HepG2细胞中制备微粒体。该测定在含有NaF、MgCl₂、DTT、NADPH、5 μM法尼基焦磷酸（FPP）、[³H]-FPP、10 μM NB-598（一种角鲨烯环氧化酶抑制剂，用于阻止角鲨烯的进一步代谢）和焦磷酸钠的HEPES缓冲液（pH 7.5）中进行。在30℃预孵育5分钟后，加入微粒体（10 μg蛋白）启动反应。反应在30℃下进行20分钟，然后加入KOH：乙醇溶液终止反应。用石油醚萃取合成的[³H]-角鲨烯，并通过液体闪烁计数法进行定量。 [1]

细胞活力检测[4]
细胞类型： H35 和 HepG2 细胞
测试浓度： 1 μM
孵育时间： 24 小时
实验结果： H35 和 HepG2 细胞线粒体胆固醇水平降低。

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微粒体制备的细胞培养：培养并收集人肝癌细胞系 HepG2 细胞。从这些细胞中制备微粒体，以评估角鲨烯合酶抑制情况。文中未详细说明具体的培养条件。[1]

动物/疾病模型： SD（Sprague-Dawley）大鼠，体重 150-170 g[1]
剂量： 6.25、12.5、25 或 50 mg/kg
给药途径： 单次口服
实验结果： 在大鼠中，乙酸盐以剂量依赖的方式抑制胆固醇生物合成。YM-53601 抑制胆固醇生物合成的 ED50 值为 32 mg/kg。

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动物/疾病模型： 5-6周龄雄性BALB/c无胸腺（nu/nu）裸鼠[4]
剂量： 15 mg/kg
给药途径： 每日灌胃给药，持续2周
实验结果： 肿瘤内胆固醇水平显著降低。

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大鼠胆固醇生物合成研究：** 将雄性SD大鼠（150-170 g）置于反光周期（07:30-20:30关灯）条件下饲养一周，以增加白天肝脏胆固醇的生物合成。将YM-53601或FBQ悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，于13:00以6.25、12.5、25或50 mg/kg的剂量进行口服给药。一小时后，腹腔注射[¹⁴C]-乙酸盐（40.5 μCi/只）。给药2小时后处死大鼠，并测定血浆[¹⁴C]-胆固醇水平。[1]
- **大鼠高脂饮食研究：** 雄性SD大鼠（5周龄）饲喂高脂饮食（CE-2，添加1.5%胆固醇、0.5%胆酸盐和10%椰子油）7天。 YM-53601（12.5、25 或 50 mg/kg/天）或普伐他汀（50 mg/kg/天）每日口服一次，持续相同时间。化合物悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中。在禁食 18 小时后，于末次给药后 2 小时采集血样。[1]
- **豚鼠研究：**雄性 Hartley 豚鼠（4 周龄）饲喂正常饲料 (GC-4)。YM-53601（10、30 或 100 mg/kg/天）或普伐他汀（100 mg/kg/天）每日口服一次，持续 14 天。化合物悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中。在禁食 18 小时后，于末次给药后 2 小时采集血样。 [1]
- **仓鼠正常饮食研究：**雄性叙利亚金仓鼠（8周龄，约140克）在反转光照周期下饲养一周，并喂以标准低胆固醇饲料（CE-2）。YM-53601（12.5、25或50毫克/公斤/天）或FBQ（50毫克/公斤/天）每日口服一次，连续5天。化合物悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中。在禁食18小时后，于最后一次给药后2小时采集血样。[1]
- **仓鼠高脂饮食研究：**雄性叙利亚金仓鼠喂以高脂饲料（CE-2，添加0.5%胆固醇和5%椰子油），持续11天。从第5天开始，每天口服一次YM-53601或非诺贝特（10、30或100 mg/kg/天），持续7天。在禁食18小时后，于最后一次给药后2小时采集血样。[1]
- **恒河猴研究：**成年雄性恒河猴（约4 kg）饲喂添加香蕉的商业饲料（灵长类动物饲料5048号）。在第一项实验中，将YM-53601（12.5、25或50 mg/kg）混入饲料中，每天两次（09:00和17:00）给药，持续3周。在第二项实验中，将YM-53601（25或50 mg/kg，每天两次）或普伐他汀（25 mg/kg，每天两次）混入饲料中给药，持续4周。在治疗前、治疗期间和治疗后，于上午 9:00 采集血样，采集前需禁食 16 小时。[1]

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大鼠胆固醇生物合成研究：雄性 SD 大鼠（150-170 g）在反转光照周期（7:30-20:30 关灯）下饲养一周，以增加白天肝脏胆固醇的生物合成。将 YM-53601 或 FBQ 悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中，于下午 1:00 以 6.25、12.5、25 或 50 mg/kg 的剂量口服给药。一小时后，腹腔注射 [¹⁴C]-乙酸盐（40.5 μCi/只）。给药 2 小时后处死大鼠，并测定血浆 [¹⁴C]-胆固醇水平。 [1]
- 大鼠高脂饮食研究：雄性SD大鼠（5周龄）喂食高脂饮食（CE-2，添加1.5%胆固醇、0.5%胆酸钠和10%椰子油），持续7天。YM-53601（12.5、25或50 mg/kg/天）或普伐他汀（50 mg/kg/天）每日口服一次，持续相同时间。化合物悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中。禁食18小时后，于末次给药后2小时采集血样。[1]
- 豚鼠研究：雄性Hartley豚鼠（4周龄）喂食正常饮食（GC-4）。 YM-53601（10、30 或 100 mg/kg/天）或普伐他汀（100 mg/kg/天）每日口服一次，连续给药 14 天。化合物悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中。在禁食 18 小时后，于末次给药后 2 小时采集血样。[1]
- 仓鼠正常饮食研究：雄性叙利亚金仓鼠（8 周龄，约 140 g）在反转光照周期下饲养一周，并喂以标准低胆固醇饲料 (CE-2)。YM-53601（12.5、25 或 50 mg/kg/天）或 FBQ（50 mg/kg/天）每日口服一次，连续给药 5 天。化合物悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中。在禁食 18 小时后，于末次给药后 2 小时采集血样。 [1]
- 仓鼠高脂饮食研究：雄性叙利亚金仓鼠喂食高脂饮食（CE-2，添加0.5%胆固醇和5%椰子油），持续11天。从第5天开始，每天口服一次YM-53601或非诺贝特（10、30或100 mg/kg/天），持续7天。在最后一次给药后2小时，禁食18小时，采集血样。[1]
- 恒河猴研究：成年雄性恒河猴（约4 kg）喂食添加香蕉的商业饲料（灵长类动物饲料5048号）。在第一个实验中，将YM-53601（12.5、25或50 mg/kg）混入饲料中，每天两次（09:00和17:00）喂食，持续3周。在第二个实验中，将YM-53601（25或50 mg/kg，每日两次）或普伐他汀（25 mg/kg，每日两次）通过饲料添加的方式给药，持续4周。在治疗前、治疗期间和治疗后，于上午9:00采集血样，采集前需禁食16小时。[1]

恒河猴安全性研究：在恒河猴研究中，每日两次、每次剂量高达 50 mg/kg 的 YM-53601 给药后，未观察到肝损伤迹象。相比之下，每日两次、每次剂量为 25 mg/kg 的普伐他汀给药后，观察到血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 升高，ALT 是肝损伤的指标，表明该剂量已接近普伐他汀的安全上限。[1]

[1]. YM-53601, a novel squalene synthase inhibitor, reduces plasma cholesterol and triglyceride levels in several animal species. Br J Pharmacol. 2000 Sep;131(1):63-70.

[2]. Syntheses of 3-ethylidenequinuclidine derivatives as squalene synthase inhibitors. Part 2: enzyme inhibition and effects on plasma lipid levels. Bioorg Med Chem. 2003 Aug 15;11(17):3735-45.

[3]. Farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1 regulates hepatitis C virus propagation. FEBS Lett. 2014 May 2;588(9):1813-20.

[4]. Mitochondrial cholesterol contributes to chemotherapy resistance in hepatocellular carcinoma. Cancer Res. 2008 Jul 1;68(13):5246-56.

背景：YM-53601 是一种新型角鲨烯合酶抑制剂。与 HMG-CoA 还原酶抑制剂（他汀类药物）不同，角鲨烯合酶抑制剂不会降低泛醌和多萜醇的水平，而泛醌和多萜醇是细胞生长和存活所必需的。[1] 作用机制：YM-53601 抑制角鲨烯合酶，该酶催化两个法尼基焦磷酸分子二聚化形成角鲨烯，这是胆固醇生物合成的关键步骤。通过抑制这一步骤，YM-53601 可降低胆固醇的生物合成，从而降低血浆胆固醇水平。它还具有降低甘油三酯的作用，其机制尚未完全阐明，但基于相关性分析，其作用机制似乎与贝特类药物不同。 [1]
- 治疗潜力：YM-53601 在动物模型中可降低血浆胆固醇和甘油三酯水平，在降低恒河猴非高密度脂蛋白胆固醇方面优于普伐他汀（一种 HMG-CoA 还原酶抑制剂），在降低仓鼠甘油三酯方面优于非诺贝特（一种贝特类药物）。这些发现表明，YM-53601 可能是一种有前景的降脂疗法，可用于治疗人类高胆固醇血症和高甘油三酯血症，并有可能以单一药物实现联合治疗。[1]

C21H22CLFN2O

372.86

372.14

182959-33-7

YM-53601 free base;182959-28-0

60196293

Off-white to light brown solid powder

5.389

28.26

2

3

3

26

528

0

C1=CC=C2C(=C1)C3=C(C=C(C=C3)OC/C(=C/4\CN5CCC4CC5)/F)N2.Cl

JWXYVHMBPISIJQ-TVWXOORISA-N

InChI=1S/C21H21FN2O.ClH/c22-19(18-12-24-9-7-14(18)8-10-24)13-25-15-5-6-17-16-3-1-2-4-20(16)23-21(17)11-15;/h1-6,11,14,23H,7-10,12-13H2;1H/b19-18-;

2-[(2E)-2-(1-azabicyclo[2.2.2]octan-3-ylidene)-2-fluoroethoxy]-9H-carbazole;hydrochloride

YM-53601 YM53601 YM 53601

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~268.20 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。