| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent dye;
Sodium - coupled glucose cotransporters (SGLT1 and SGLT2) [1] Glucose transporters (GLUTs) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用1-NBDG作为荧光葡萄糖类似物，在用稳定表达hSGLT2的pcDNAhSGLT1和CHO–K1细胞瞬时转染的COS-7细胞中进行葡萄糖摄取测定，分别用于筛选SGLT1抑制剂和SGLT2抑制剂。在这里，我们证明了使用pcDNAhSGLT2瞬时转染的COS-7细胞（hSGLT2/COS-7）来筛选SGLT2抑制剂也是可行的。该方法也从24孔格式扩展到适合高通量筛选的96孔格式。将使用1-NBDG的验证方法应用于测试樟科约60种植物的195种粗甲醇提取物，以寻找新的天然SGLT抑制剂，并从大桂皮的叶子中鉴定出两种有效的天然SGLT1和SGLT2抑制剂（Yang等人，制备中的手稿）。这两种化合物（I和II）的IC50值在纳摩尔范围内，与根皮苷相当，根皮苷是最有效的天然SGLT抑制剂，在我们的测定系统中，SGLT1和SGLT2的IC50分别为110±10.2 nM和9.65±1.83 nM。
- 细胞葡萄糖摄取：1 - NBDG可被SGLT1、SGLT2和GLUTs转运进入细胞，可用于检测细胞介导的葡萄糖摄取。其荧光在碱性条件下可淬灭，中和后恢复，这使得细胞裂解后易于检测细胞内1 - NBDG水平。细胞裂解后其可稳定达5小时，但细胞内的1 - NBDG不稳定，其荧光在1小时内显著降低[1] SGLT抑制剂筛选：1 - NBDG用于基于细胞的高通量筛选方法，以筛选潜在的SGLT1和SGLT2抑制剂。通过测量受试化合物对1 - NBDG摄取的抑制作用，对67种黄酮类和黄酮苷类化合物进行了评估，鉴定出了几种选择性SGLT1、选择性SGLT2和双功能SGLT1/2抑制剂[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
葡萄糖是细胞的重要能量来源。葡萄糖转运由两种类型的葡萄糖转运蛋白介导：活性钠偶联葡萄糖协同转运蛋白（SGLTs）和被动葡萄糖转运蛋白（GLUTs）。开发一种简单的方法来检测细胞对葡萄糖的吸收，这对研究很有价值。1-（N-（7-硝基苯-2-氧杂-1,3-二唑-4-基）氨基）-1-脱氧-d-葡萄糖（1-NBDG）是一种新合成的荧光葡萄糖类似物。2-NBDG是GLUT但不是SGLT的良好底物，与此不同，1-NBDG可以通过GLUT和SGLT运输。因此，1-NBDG可用于筛选SGLT1和SGLT2抑制剂。在这里，我们进一步表征了1-NBDG，并将其与2-NBDG进行了比较。1-NBDG和2-NBDG的荧光在碱性条件下都被猝灭，但在中和后只能恢复1-NBDG荧光。HPLC分析显示，2-NBDG被分解导致荧光损失，而1-NBDG在NaOH溶液中保持完整。因此，在细胞摄取后，可以简单地通过在NaOH溶液中的细胞裂解，然后用HCl溶液中和，在平板读取器上检测1-NBDG荧光。一旦细胞裂解，1-NBDG的荧光稳定性稳定达5小时；然而，与2-NBDG类似，细胞内1-NBDG不稳定，并且荧光在一小时内显著减弱。还可以在单细胞水平上检测1-NBDG摄取，并且可以通过流式细胞术检测SGLT抑制剂对1-NBDG摄入的抑制。此外，1-NBDG成功地用于基于高通量细胞的方法来筛选潜在的SGLT1和SGLT2抑制剂。对从植物中纯化的67种黄酮类化合物和黄酮苷的SGLT抑制活性进行了评估，并鉴定了几种选择性SGLT1、选择性SGLT2以及双SGLT1/2抑制剂。结构-活性关系分析表明，糖苷基残基是至关重要的，因为糖苷配基没有显示出SGLT抑制活性。此外，糖的相互连接及其对苷元的取代位置不仅影响抑制活性，还影响对SGLT1和SGLT2的选择性。[1]
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| 酶活实验 |
1-NBDG和2-NBDG在碱性、酸性条件下或不同pH下的稳定性测定。[1]
将1-NBDG或2-NBDG在pH值为6.8、7.5、8.0、8.8和9.8的0.2N NaOH、0.2N HCl或20mM Tris缓冲液中稀释。使用SpectraMax Paradigm多模微孔板读取器（Molecular Devices）在黑色96孔板中检测荧光，1-NBDG的激发波长为458nm，发射波长为528nm（458/528nm），2-NBDG的发射波长为475/550nm HPLC分析[1] Mightysil RP-18GP柱用于HPLC分析，流动相为水和乙腈的梯度，从4分钟的100%水到30分钟的100%乙腈，流速为1mL/min。注入10微升样品，并通过UV/Vis检测器（设定在475nm）进行检测 1-NBDG和2-NBDG细胞内稳定性的测定[1] 将SCC131细胞以1×105个细胞/孔接种到24孔板中，并在第二天进行葡萄糖摄取测定。用500μL温胆碱缓冲液冲洗细胞两次，然后用200μL 160μM 1-NBDG或2-NBDG在钠缓冲液中孵育2小时。然后用温胆碱缓冲溶液洗涤细胞两次、在CO2培养箱中于37°C的500μL PBS中保持0-5小时，并在600μL中性缓冲液中裂解，该缓冲液含有1%脱氧胆酸钠、1%NP-40、40mM KCl和20mM Tris–HCl，pH 7.5。将100微升等分的细胞裂解物转移到黑色96孔板上，用于检测荧光强度。 |
| 细胞实验 |
使用1-NBDG的SGLT1和SGLT2抑制剂的基于细胞的筛选方法[1]
如前所述，用pcDNAhSGLT1或pcDNAhSG LT2转染COS-7细胞，并在第二天以3-5×104个细胞/孔的速度接种到96个孔中。让细胞附着过夜并达到100%汇合，然后在含有测试化合物和100或160μM 1-NBDG的钠缓冲液中在37°C下进行葡萄糖摄取测定1.5小时（SGLT1）或2小时（SGLTE2）。用150μL温胆碱缓冲液冲洗96孔中的细胞，然后用50μL含有1-NBDG和测试化合物的钠缓冲液孵育。孵育后，用冷胆碱缓冲液洗涤细胞两次，在显微镜下检查细胞条件，然后在75μL 0.2 N NaOH中裂解，并用75μL 0.2N HCl中和。将裂解物（100μL）转移到黑色96孔板中进行荧光检测。Phlorizin用作SGLT抑制剂的阳性对照，胆碱缓冲液中的1-NBDG用于通过GLUT测量钠非依赖性葡萄糖摄取。使用不含1-NBDG的钠缓冲液中的细胞来测量自发荧光（细胞背景）。
流式细胞术检测葡萄糖摄取[1] 用1 mL温胆碱缓冲液冲洗6孔板中指数生长的细胞两次，然后在37°C下与500μL的100μM 1-NBDG或2-NBDG在钠缓冲液或胆碱缓冲液中孵育30分钟。然后用温热的胆碱缓冲液洗涤细胞3次，并通过胰蛋白酶消化收获细胞。离心后，将细胞重悬于冷PBS中，并通过FACSCalibur进行流式细胞术分析，FL1通道的激发波长为488nm。Phlorizin用于抑制葡萄糖通过hSGLT1的转运。流动软件2用于定量分析。 - 细胞摄取实验：将细胞与适当浓度的1 - NBDG孵育。孵育一定时间后，洗涤细胞以去除细胞外的1 - NBDG，然后用NaOH溶液裂解细胞，用HCl中和后测量荧光。荧光强度反映了细胞摄取1 - NBDG的量。也可通过流式细胞术在单细胞水平检测1 - NBDG的摄取情况[1] - SGLT抑制剂筛选实验：将表达SGLT1或SGLT2的细胞与不同的受试化合物和1 - NBDG一起孵育。在特定的孵育时间后，使用上述细胞裂解和荧光测量方法测量1 - NBDG摄取量。比较有无受试化合物存在时1 - NBDG的摄取量，以评估受试化合物对SGLT1或SGLT2的抑制作用[1] |
| 参考文献 |
[1]. Characterization of a fluorescent glucose derivative 1-NBDG and its application in the identification of natural SGLT1/2 inhibitors. J Food Drug Anal. 2021; 29(3): 521–532.
[2]. Development of a novel non-radioactive cell-based method for the screening of SGLT1 and SGLT2 inhibitors using 1-NBDG. Mol Biosyst. 2013 Aug;9(8):2010-20. doi: 10.1039/c3mb70060g. |
| 其他信息 |
葡萄糖是细胞的重要能量来源。葡萄糖的转运由两种类型的葡萄糖转运蛋白介导：主动钠偶联葡萄糖协同转运蛋白（SGLT）和被动葡萄糖转运蛋白（GLUT）。开发一种简便的细胞葡萄糖摄取检测方法对研究具有重要价值。1-(N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基)-1-脱氧-D-葡萄糖 (1-NBDG) 是一种新合成的荧光葡萄糖类似物。与 2-NBDG（GLUT 的良好底物，但 SGLT 的底物）不同，1-NBDG 可被 GLUT 和 SGLT 转运。因此，1-NBDG 可用于筛选 SGLT1 和 SGLT2 抑制剂。本文进一步表征了 1-NBDG，并将其与 2-NBDG 进行了比较。 1-NBDG 和 2-NBDG 的荧光在碱性条件下均被猝灭，但中和后仅 1-NBDG 的荧光能够恢复。高效液相色谱 (HPLC) 分析表明，2-NBDG 在 NaOH 溶液中分解导致荧光丧失，而 1-NBDG 则保持完整。因此，细胞摄取后，只需用 NaOH 溶液裂解细胞，再用 HCl 溶液中和，即可在酶标仪上检测到 1-NBDG 的荧光。细胞裂解后，1-NBDG 的荧光稳定性可持续长达 5 小时；然而，与 2-NBDG 类似，细胞内 1-NBDG 的稳定性较差，荧光强度在 1 小时内显著降低。1-NBDG 的摄取也可以在单细胞水平上进行检测，并且可以通过流式细胞术检测 SGLT 抑制剂对 1-NBDG 摄取的抑制作用。此外，1-NBDG 已成功应用于高通量细胞筛选方法，用于筛选潜在的 SGLT1 和 SGLT2 抑制剂。研究人员评估了从植物中纯化的 67 种黄酮类化合物和黄酮苷的 SGLT 抑制活性，并鉴定出几种选择性 SGLT1 抑制剂、选择性 SGLT2 抑制剂以及 SGLT1/2 双重抑制剂。构效关系分析表明，糖基残基至关重要，因为苷元本身不具有 SGLT 抑制活性。此外，糖苷键及其在苷元上的取代位置不仅影响抑制活性，还影响对 SGLT1 和 SGLT2 的选择性。[1] 1-NBDG 是一种荧光葡萄糖类似物。葡萄糖转运由 SGLT 和 GLUT 介导，它们是抗糖尿病和抗癌药物研发的重要靶点。 1-NBDG可用于筛选SGLT抑制剂，这对相关药物的研发具有重要意义。构效关系分析表明，糖基残基对SGLT抑制剂的抑制活性至关重要，糖间连接和取代位置会影响抑制活性和选择性[1]
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| 分子式 |
C12H14N4O8
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|---|---|
| 分子量 |
342.261562824249
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| 精确质量 |
342.0812
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| 元素分析 |
C, 42.11; H, 4.12; N, 16.37; O, 37.40
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| CAS号 |
2376921-70-7
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| 相关CAS号 |
186689-07-6 (2-NBDG)
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| LogP |
-1.1
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| tPSA |
187Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
465
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
O1[C@H]([C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1CO)O)O)O)NC1=CC=C(C2C1=NON=2)[N+](=O)[O-]
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| InChi Key |
ZXXYZPVBLJMGPU-UJDFUTJXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H14N4O8/c17-3-6-9(18)10(19)11(20)12(23-6)13-4-1-2-5(16(21)22)8-7(4)14-24-15-8/h1-2,6,9-13,17-20H,3H2/t6-,9-,10+,11-,12-/m1/s1
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| 化学名 |
(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(hydroxymethyl)-6-[(4-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-7-yl)amino]oxane-3,4,5-triol
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| 别名 |
1-NBDG; 1NBDG; 1 NBDG; (2R,3S,4S,5R,6R)-2-(Hydroxymethyl)-6-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol; 2376921-70-7; 1-NBDG; (2R,3S,4S,5R,6R)-2-(Hydroxymethyl)-6-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: > 10 mM
H2O : > 10 mM (estimate) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9218 mL | 14.6088 mL | 29.2176 mL | |
| 5 mM | 0.5844 mL | 2.9218 mL | 5.8435 mL | |
| 10 mM | 0.2922 mL | 1.4609 mL | 2.9218 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
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COA
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463611831
