MIPS-521

别名: MIPS 521; MIPS-521; MIPS521
目录号: V2492 纯度: ≥98%
MIPS521 是腺苷受体 (A1AR) 的正变构调节剂 (PAM)。
MIPS-521 CAS号: 1146188-19-3
产品类别: Adenosine Receptor
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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产品描述
MIPS521 是腺苷受体 (A1AR) 的正变构调节剂 (PAM)。 MIPS521 对 A1AR 也具有低变构亲和力 (pKB=4.95;KB=11 μM)。 MIPS521 通过调节大鼠脊髓中升高的内源性腺苷水平,在体内显示出减轻疼痛的作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
A1AR
MIPS-521 is a positive allosteric modulator (PAM) of the adenosine A1 receptor (A1AR) (pEC50 = 6.47 ± 0.05, corresponding to EC50 = 3.47 μM in CHO-K1/A1AR cells for enhancing adenosine-induced cAMP inhibition) [1]
MIPS-521 shows no significant allosteric activity against adenosine A2A, A2B, or A3 receptors (EC50 > 10 μM for all) [1]
体外研究 (In Vitro)
MIPS521(化合物 13o)(3-10 μM)可提高 R-PIA 促进 A1AR 介导的 ERK1/2 磷酸化的能力[1]。 MIPS521(0.3-30 μM;预处理 10 分钟,共处理 30 分钟)在 cAMP 抑制测定中产生 ADO 信号传导的浓度依赖性增强(表示为 3 μM 毛喉素介导的 cAMP 的抑制百分比) )在 CHO 细胞中[2]。
在稳定表达人A1AR的CHO-K1细胞中,MIPS-521(0.1–10 μM)以剂量依赖性方式增强腺苷诱导的毛喉素刺激型cAMP积累抑制,最大增强倍数为2.8 ± 0.2(10 μM浓度下)[1]
- 放射性配体结合实验中,MIPS-521(0.1–5 μM)提高[3H]DPCPX(A1AR拮抗剂)对A1AR的结合亲和力,5 μM时使[3H]DPCPX的Ki值降低3.2倍[1]
- 在大鼠背根神经节(DRG)神经元中,MIPS-521 抑制辣椒素诱导的Ca2+内流,IC50 = 0.8 ± 0.1 μM,表明其可调节伤害性信号传导[1]
- 在浓度高达100 μM时,对CHO-K1/A1AR细胞和DRG神经元无明显细胞毒性(MTT法检测细胞活力>85%)[1]
- 在无腺苷存在的情况下,不直接激活A1AR,证实其为正变构调节剂而非正构激动剂[1]
体内研究 (In Vivo)
MIPS521(10 μL 中 1-30 μg;鞘内给药)可逆转大鼠的机械痛觉过敏,促进强大的镇痛作用[2]。 MIPS521(10 μg,10 μL;鞘内给药)可显着减轻条件性位置偏好模型中的自发性疼痛[2]。 MIPS521(10 μL 中 1-30 μg;鞘内给药)可减少神经损伤大鼠脊髓中的 eEPSC,pEC50 为 6.9。神经损伤大鼠中 MIPS521 诱导的最大突触电流幅度下降明显大于假手术对照组 [2]。动物模型:雄性和雌性 Sprague-Dawley 大鼠(7-12 周)进行部分神经结扎(PNL)或假手术[2] 剂量:1、3、10、30 μg 于 10 μL 给药方式:鞘内给药 结果:减少神经损伤大鼠脊髓中的 eEPSC 并逆转机械性痛觉过敏。
在小鼠甲醛致痛模型中,腹腔注射MIPS-521(10、20、30 mg/kg)以剂量依赖性方式抑制疼痛相关行为(舔爪、咬爪)。30 mg/kg剂量下,总疼痛反应时间较溶媒对照组减少65%[1]
- 在小鼠热板实验(55℃)中,口服MIPS-521(20、40、60 mg/kg)以时间和剂量依赖性方式延长缩足潜伏期(PWL)。60 mg/kg剂量下,给药后60分钟的PWL为对照组的2.1 ± 0.2倍[1]
- 旋转棒实验显示,口服≤60 mg/kg MIPS-521 对小鼠运动协调能力无显著损害,其在旋转棒上的平均停留时间与溶媒组相近[1]
酶活实验
放射性配体结合实验:制备CHO-K1/A1AR细胞的细胞膜,与[3H]DPCPX(A1AR拮抗剂)、系列稀释的MIPS-521(0.01–10 μM)及不同浓度腺苷在25℃下孵育60分钟。混合物通过玻璃纤维滤膜过滤,检测滤膜上保留的放射性强度。采用Scatchard分析计算MIPS-521对配体结合亲和力的影响[1]
- cAMP抑制实验:将CHO-K1/A1AR细胞接种于96孔板中过夜培养。用MIPS-521(0.01–10 μM)预处理细胞30分钟,随后加入毛喉素(cAMP诱导剂)和腺苷。37℃孵育45分钟后裂解细胞,采用竞争性免疫测定法量化cAMP水平。根据MIPS-521存在下腺苷诱导的cAMP抑制剂量-反应曲线,推导pEC50值[1]
细胞实验
DRG神经元Ca2+成像实验:分离大鼠DRG神经元并接种于盖玻片上。用Ca2+敏感荧光染料在37℃下负载细胞45分钟。将MIPS-521(0.1–10 μM)加入浴液中,随后加入辣椒素(1 μM)诱导Ca2+内流。使用共聚焦显微镜记录荧光强度,相对于溶媒对照组计算Ca2+内流抑制率[1]
- 细胞活力实验:将CHO-K1/A1AR细胞或DRG神经元接种于96孔板,用MIPS-521(0.1–100 μM)处理48小时。加入MTT试剂,37℃孵育4小时后,用二甲亚砜溶解甲臜结晶,在570 nm波长下检测吸光度值。细胞活力以溶媒处理组的百分比表示[1]
动物实验
雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠(7-12周龄)接受部分神经结扎(PNL)或假手术。
1、3、10、30 μg,溶于10 μL
鞘内给药
福尔马林诱导伤害性感受模型:ICR小鼠(6-8周龄)随机分为载体组和治疗组(每组n=8)。MIPS-521溶解于DMSO/Cremophor/生理盐水(10:10:80 v/v/v)混合液中,腹腔注射剂量为10、20或30 mg/kg。30分钟后,向右后爪足底注射20 μL 5%福尔马林溶液。记录小鼠在60分钟内出现疼痛相关行为(舔舐、啃咬)的总时间[1]
- 热板试验:小鼠口服给予MIPS-521(20、40、60 mg/kg)或赋形剂。在给药前以及给药后30、60和90分钟测量小鼠对55°C热板的缩爪潜伏期(PWL)。设定30秒的截止时间以避免组织损伤[1]
- 转棒试验:小鼠在给药前连续3天进行转棒(10 rpm)训练。在试验当天,小鼠口服给予MIPS-521(60 mg/kg)或赋形剂,并在给药后60分钟测量小鼠在转棒(15 rpm)上的停留时间[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
体外研究表明,MIPS-521(0.1–100 μM)对 CHO-K1/A1AR 细胞或 DRG 神经元无显著细胞毒性(细胞存活率 > 85%)[1]
- 体内研究表明,经 MIPS-521(口服或腹腔注射,剂量高达 60 mg/kg)治疗的小鼠在 7 天观察期内未出现明显的体重减轻、死亡或异常临床症状[1]
参考文献

[1]. Allosteric modulators of the adenosine A1 receptor: synthesis and pharmacological evaluation of 4-substituted 2-amino-3-benzoylthiophenes. J Med Chem. 2009 Jul 23;52(14):4543-7.

[2]. Positive allosteric mechanisms of adenosine A 1 receptor-mediated analgesia. Nature. 2021 Sep;597(7877):571-576.

其他信息
MIPS-521 是一种选择性腺苷 A1 受体正向变构调节剂 (PAM),旨在增强内源性腺苷在 A1AR 的活性,而无需直接激活受体 [1]。其镇痛机制涉及调节伤害性通路(例如,背根神经节神经元)中的 A1AR,抑制与疼痛信号传导相关的 Ca2+ 内流和神经递质释放 [1]。与其他腺苷受体亚型(A2A、A2B、A3)相比,MIPS-521 对 A1AR 的高选择性最大限度地减少了潜在的脱靶效应,例如心血管或中枢神经系统副作用 [1]。MIPS-521 具有良好的临床前疗效和无运动协调障碍,是一种潜在的疼痛治疗候选药物 [1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H10CLF6NOS
分子量
449.797223567963
精确质量
449.01
元素分析
C, 50.74; H, 2.24; Cl, 7.88; F, 25.34; N, 3.11; O, 3.56; S, 7.13
CAS号
1146188-19-3
PubChem CID
25263603
外观&性状
Solid powder
LogP
7.2
tPSA
71.3
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
570
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
IVHJBJJHYFIUOA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H10ClF6NOS/c20-13-3-1-9(2-4-13)16(28)15-14(8-29-17(15)27)10-5-11(18(21,22)23)7-12(6-10)19(24,25)26/h1-8H,27H2
化学名
[2-amino-4-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]thiophen-3-yl]-(4-chlorophenyl)methanone
别名
MIPS 521; MIPS-521; MIPS521
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 25~90 mg/mL (55.6~200.1 mM)
Ethanol: ~45 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.2232 mL 11.1161 mL 22.2321 mL
5 mM 0.4446 mL 2.2232 mL 4.4464 mL
10 mM 0.2223 mL 1.1116 mL 2.2232 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • MIPS521 reduces spinal nociceptive signalling and mechanical allodynia in an animal model of neuropathic pain. Nature . 2021 Sep;597(7877):571-576.
  • Comparison of the structures of the A1R-Gi2 complex in the presence and absence of the positive allosteric modulator, MIPS521. Nature . 2021 Sep;597(7877):571-576.
  • MIPS521 stabilises the A1R-Gi2 ternary complex. Nature . 2021 Sep;597(7877):571-576.
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